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离心超滤法测定蛋白质标记物的放射化学纯度
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作者 张云艳 万建美 +3 位作者 钱晓敏 郭萍 朱然 张友九 《核化学与放射化学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期317-320,共4页
用高效液相色谱法(HPLC)、三氯醋酸(TCA)沉淀法和超滤法分离测定125I-AAFP(抗过敏融合蛋白)标记物的放射化学纯度(RCP),并对其进行比较。结果表明:三种方法均能有效分离标记物和游离碘,用超滤法、TCA沉淀法和HPLC三种方法测定125I-AAFP... 用高效液相色谱法(HPLC)、三氯醋酸(TCA)沉淀法和超滤法分离测定125I-AAFP(抗过敏融合蛋白)标记物的放射化学纯度(RCP),并对其进行比较。结果表明:三种方法均能有效分离标记物和游离碘,用超滤法、TCA沉淀法和HPLC三种方法测定125I-AAFP低、中、高放射化学纯度,样本的RCP分别为0.62%±0.21%、7.25%±1.38%、0.97%±0.12%,61.58%±0.52%、63.18%±1.98%、63.77%±1.23%,98.89%±0.31%、98.76%±0.41%、98.80%±0.82%。当RCP很低时,超滤法与HPLC法测得的RCP间无明显差异(P>0.05),而要低于TCA沉淀法(P<0.05);除此之外,三种方法无明显差异(P>0.05)。这说明离心超滤法可用于分离测定蛋白质标记物的放射化学纯度。 展开更多
关键词 放射化学纯度 高效液相色谱 三氯醋酸沉淀 离心超滤法
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中空纤维离心超滤-高效凝胶排阻色谱法测定青霉素V钾中蛋白杂质 被引量:3
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作者 杨中华 张立娜 +5 位作者 张锦 高敬林 庞海英 王薇 王聪聪 蒋晔 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期209-213,共5页
建立了一种采用中空纤维离心超滤(HFCF-UF)-高效凝胶排阻色谱法(HPSEC)对青霉素V钾中的残留蛋白进行检测的方法。样品用HFCF-UF进行富集,采用HPSEC进行分析,色谱柱为TSK gel Super SW2000凝胶色谱柱(300×4.6mm,4μm),流动相为0.06m... 建立了一种采用中空纤维离心超滤(HFCF-UF)-高效凝胶排阻色谱法(HPSEC)对青霉素V钾中的残留蛋白进行检测的方法。样品用HFCF-UF进行富集,采用HPSEC进行分析,色谱柱为TSK gel Super SW2000凝胶色谱柱(300×4.6mm,4μm),流动相为0.06mol/L NaCl-0.02mol/L NaH_2PO_4(pH=7.0),流速为0.3mL/min,紫外检测波长为220nm,柱温为室温。对照品牛血清白蛋白(BSA)在1.0~100.0μg/mL内线性关系良好(R2=0.999),回收率均大于87%,检测限为3.03ng/mL,经HFCF-UF富集处理后,富集倍数(EF)高达99倍。结果表明,该方法操作简便、结果准确、灵敏度高,为同类药物中的大分子蛋白检测提供了有效手段。 展开更多
关键词 青霉素V钾 蛋白杂质 高效凝胶排阻色谱 中空纤维离心超滤法
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聚乙二醇化重组人白细胞介素6的放射性标记 被引量:1
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作者 徐贤坤 王霜 +1 位作者 曾宪垠 汪淑芳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期236-240,共5页
分别用常规氯氨T和改进的双相氯氨T法对PEG-rhIL-6进行放射性碘标记,用柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化,同时用三氯乙酸沉淀法和SDS-PAGE电泳法鉴定纯化后的标记化合物放射化学纯度,采用rhIL-6依赖细胞7TD1,用MTT比色法测定标记... 分别用常规氯氨T和改进的双相氯氨T法对PEG-rhIL-6进行放射性碘标记,用柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化,同时用三氯乙酸沉淀法和SDS-PAGE电泳法鉴定纯化后的标记化合物放射化学纯度,采用rhIL-6依赖细胞7TD1,用MTT比色法测定标记物的生物学活性。结果表明:1.改进的双相氯氨T法标记率为74.5%,高于常规氯氨T法的62.3%,放射性比活度分别为5.513×105和4.610×105Bq/μg。2.经柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化后,用三氯乙酸沉淀法测得放射化学纯度均能达到99%以上。3.用SDS-PAGE电泳法检测两种标记方法所得的标记物与非标记物的结果表明,常规氯氨T法标记物比非标记物多1条高分子量蛋白带,认为是标记过程中蛋白质受到部分损伤;改进的双相氯氨T的标记物与非标记物蛋白质条带一致,认为蛋白质标记后基本没有受到损伤。4.生物活性检测表明改进的双相氯氨T标记物与非标记物活性之间无显著差异,常规氯氨T法标记物活性略低于双相氯氨T的标记物活性。 展开更多
关键词 聚乙二醇化重组人白细胞介素-6 放射性碘标记 离心超滤法 MTT比色
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不同精制工艺对金银花水提液中绿原酸含量的影响 被引量:9
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作者 高红宁 金万勤 郭立玮 《世界科学技术-中医药现代化》 2010年第2期241-244,共4页
目的:考察不同工艺精制金银花水提液的效果,优选出金银花的最佳精制工艺。方法:采用醇沉、离心-超滤、微滤-超滤、大孔吸附树脂等4种工艺对金银花水提液进行精制,并采用HPLC法测定金银花水提液中绿原酸的含量,对4种工艺进行了定量对比... 目的:考察不同工艺精制金银花水提液的效果,优选出金银花的最佳精制工艺。方法:采用醇沉、离心-超滤、微滤-超滤、大孔吸附树脂等4种工艺对金银花水提液进行精制,并采用HPLC法测定金银花水提液中绿原酸的含量,对4种工艺进行了定量对比研究。并对4种工艺操作过程进行了比较。结果:金银花水提液经醇沉、离心-超滤、微滤-超滤、大孔吸附树脂工艺处理后,其绿原酸的转移率分别为59.30%、83.07%、80.13%、23.47%;固形物去除率分别为36.59%、40.12%、39.81%、90.07%。结论:离心-超滤工艺精制后绿原酸的转移率高于其他方法,固形物去除率适中,具有简化工艺,缩短操作周期的优点,可作为金银花水提液的最佳精制工艺。 展开更多
关键词 金银花 绿原酸 醇沉 离心-超滤 微滤-超滤 大孔吸附树脂
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鳖甲肽-长循环脂质体的制备及评价 被引量:1
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作者 汤晗霄 赵天文 +4 位作者 盛云杰 郑杭生 朱飞叶 盛振华 张永生 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第11期2874-2877,共4页
目的:采用薄膜分散法制备鳖甲肽-长循环脂质体,并检测其表征。以超滤离心-HPLC法及透析法分别考察包封率及药物释放度。方法:采用薄膜分散法制备鳖甲肽-脂质体,检测粒径,PDI并观察脂质体电镜下形态。建立超滤离心-HPLC法测定方法并检测... 目的:采用薄膜分散法制备鳖甲肽-长循环脂质体,并检测其表征。以超滤离心-HPLC法及透析法分别考察包封率及药物释放度。方法:采用薄膜分散法制备鳖甲肽-脂质体,检测粒径,PDI并观察脂质体电镜下形态。建立超滤离心-HPLC法测定方法并检测脂质体的包封率以筛选最佳药脂比;采用透析法考察药物在不同时间点的释放度。结果:采用超滤离心-HPLC法能有效测定鳖甲肽-脂质体的包封率,在药脂比1∶5时包封率最高。并且,在4 h时药物释放度最高,最后释放度趋于平稳。结论:本研究制备的脂质体粒径均匀性及形态良好,超滤离心-HPLC法可高效精确测定脂质体包封率,而透析法考察药物释放度稳定可靠,从而达到质量评价的目的。 展开更多
关键词 长循环脂质体 超滤离心-HPLC 透析 包封率 释放度
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