目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对大鼠神经元来源的细胞系H19-7细胞中神经连接蛋白3(NLGN3)表达的影响及分子机制。方法:分别利用NMDA、NMDA受体(NMDAR)特异性拮抗剂D-AP5和β-catenin特异性siRNA处理大鼠海马神经元细胞系H19-7细胞...目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对大鼠神经元来源的细胞系H19-7细胞中神经连接蛋白3(NLGN3)表达的影响及分子机制。方法:分别利用NMDA、NMDA受体(NMDAR)特异性拮抗剂D-AP5和β-catenin特异性siRNA处理大鼠海马神经元细胞系H19-7细胞,通过Western Blot和real time RT-PCR检测β-连环蛋白(β-catenin)、NLGN3及c-Myc的表达变化。结果:NMDA刺激后H19-7细胞中β-catenin蛋白上调,与此同时NLGN3和c-Myc表达增加;使用D-AP5阻断NMDAR以及特异性siRNA沉默β-catenin均能抑制NLGN3的表达。结论:NMDA能够通过Wnt/β-catenin通路促进大鼠神经元中NLGN3表达。展开更多
目的:探讨肿瘤微环境中神经元对胶质瘤细胞迁移能力的影响。方法:分离培养胚胎18 d(E18)大鼠神经元,利用表达靶向神经连接蛋白3(NLGN3)分子shRNA的重组慢病毒(Lv-NLGN3-shRNA)感染神经元,real time RT-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测...目的:探讨肿瘤微环境中神经元对胶质瘤细胞迁移能力的影响。方法:分离培养胚胎18 d(E18)大鼠神经元,利用表达靶向神经连接蛋白3(NLGN3)分子shRNA的重组慢病毒(Lv-NLGN3-shRNA)感染神经元,real time RT-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NLGN3的表达,收集神经元培养上清与胶质瘤细胞系U251细胞共培养,Transwell实验检测U251细胞迁移能力,Western Blot方法检测U251细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果:Lv-NLGN3-shRNA重组慢病毒感染能够降低大鼠原代神经元中NLGN3 mRNA和蛋白的的表达,神经元培养上清与U251细胞共培养可以增加后者的迁移能力并上调mTOR和MMP-9的表达。然而,NLGN3表达被Lv-NLGN3-shRNA抑制后,培养上清对U251细胞促迁移能力下降,同时mTOR和MMP-9表达降低。结论:大鼠原代神经元可以通过NLGN3/mTOR/MMP-9信号通路增强U251细胞的迁移能力,这一途径可能是胶质瘤细胞转移的机制之一。展开更多
文摘目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对大鼠神经元来源的细胞系H19-7细胞中神经连接蛋白3(NLGN3)表达的影响及分子机制。方法:分别利用NMDA、NMDA受体(NMDAR)特异性拮抗剂D-AP5和β-catenin特异性siRNA处理大鼠海马神经元细胞系H19-7细胞,通过Western Blot和real time RT-PCR检测β-连环蛋白(β-catenin)、NLGN3及c-Myc的表达变化。结果:NMDA刺激后H19-7细胞中β-catenin蛋白上调,与此同时NLGN3和c-Myc表达增加;使用D-AP5阻断NMDAR以及特异性siRNA沉默β-catenin均能抑制NLGN3的表达。结论:NMDA能够通过Wnt/β-catenin通路促进大鼠神经元中NLGN3表达。
