本研究通过对tet(A)、tet(B)、tet(C)和tet(M)基因的序列分析,利用Primer Premier 5.0软件设计并合成了4对特异性引物,建立了四环素类抗生素主要耐药基因的PCR检测方法。通过反复试验确定这4对特异性引物的最佳退火温度均为55℃。灵敏...本研究通过对tet(A)、tet(B)、tet(C)和tet(M)基因的序列分析,利用Primer Premier 5.0软件设计并合成了4对特异性引物,建立了四环素类抗生素主要耐药基因的PCR检测方法。通过反复试验确定这4对特异性引物的最佳退火温度均为55℃。灵敏性试验和特异性试验表明这4对特异性引物能够在核酸浓度分别为1.36、10.8、0.206和136 pg/μL时扩增出清晰地目的基因,并具有较高的特异性。稳定性与重复性试验表明本方法具有良好的稳定性。应用所建立的方法对25株辽宁地区猪源大肠杆菌中四环素类耐药菌株主要耐药基因进行检测分析,辽宁省猪源大肠杆菌中对四环素类的耐药性可能主要与tet(A)、tet(B)介导的主动外排机制有关,其次与tet(M)介导的核糖体保护机制有关。展开更多
耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)是临床常见的耐药菌之一。本研究对88株全国49家医院收集的CRKP菌株进行碳青霉烯类耐药基因检测,其中65株(73.9%)检出bla_(KPC)类基因(64株检出bla_(K...耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)是临床常见的耐药菌之一。本研究对88株全国49家医院收集的CRKP菌株进行碳青霉烯类耐药基因检测,其中65株(73.9%)检出bla_(KPC)类基因(64株检出bla_(KPC-2)、1株检出bla_(KPC-3))、9株(10.2%)检出bla_(NDM)类基因(均为bla_(NDM-1))、7株(8.0%)检出bla_(IMP)类基因(均为bla_(IMP-4))。通过多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)将88株CRKP分为25个MLST型,其中ST11型为优势型别,包含48株菌。88株CRKP通过脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分为79个PFGE型,呈现高度多态性。本研究揭示了我国blaKPC-2阳性CRKP菌株存在克隆化现象,存在ST11型流行克隆;而bla_(NDM-1)和bla_(IMP-4)阳性CRKP菌株分子型别多态性大,还没形成流行克隆。需要密切监测并采取措施控制携带blaKPC-2基因的ST11型CRKP的传播扩散。展开更多
文摘本研究通过对tet(A)、tet(B)、tet(C)和tet(M)基因的序列分析,利用Primer Premier 5.0软件设计并合成了4对特异性引物,建立了四环素类抗生素主要耐药基因的PCR检测方法。通过反复试验确定这4对特异性引物的最佳退火温度均为55℃。灵敏性试验和特异性试验表明这4对特异性引物能够在核酸浓度分别为1.36、10.8、0.206和136 pg/μL时扩增出清晰地目的基因,并具有较高的特异性。稳定性与重复性试验表明本方法具有良好的稳定性。应用所建立的方法对25株辽宁地区猪源大肠杆菌中四环素类耐药菌株主要耐药基因进行检测分析,辽宁省猪源大肠杆菌中对四环素类的耐药性可能主要与tet(A)、tet(B)介导的主动外排机制有关,其次与tet(M)介导的核糖体保护机制有关。
文摘耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)是临床常见的耐药菌之一。本研究对88株全国49家医院收集的CRKP菌株进行碳青霉烯类耐药基因检测,其中65株(73.9%)检出bla_(KPC)类基因(64株检出bla_(KPC-2)、1株检出bla_(KPC-3))、9株(10.2%)检出bla_(NDM)类基因(均为bla_(NDM-1))、7株(8.0%)检出bla_(IMP)类基因(均为bla_(IMP-4))。通过多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)将88株CRKP分为25个MLST型,其中ST11型为优势型别,包含48株菌。88株CRKP通过脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分为79个PFGE型,呈现高度多态性。本研究揭示了我国blaKPC-2阳性CRKP菌株存在克隆化现象,存在ST11型流行克隆;而bla_(NDM-1)和bla_(IMP-4)阳性CRKP菌株分子型别多态性大,还没形成流行克隆。需要密切监测并采取措施控制携带blaKPC-2基因的ST11型CRKP的传播扩散。
