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腺病毒介导的siRNA沉默PNUTS基因对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭的影响 被引量:1
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作者 刘霞 余维 +3 位作者 余丹 陈娟 骆小华 李兵 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期161-166,共6页
目的·探讨腺病毒介导小RNA干扰(small interfering RNA,siRNA)下调蛋白磷酸酶1核目标亚基(phosphatase nuclear targeting subunit,PNUTS)的表达对喉癌细胞Hep-2增殖、侵袭、迁移和上皮细胞间质化(epithelial-mesenchymal transiti... 目的·探讨腺病毒介导小RNA干扰(small interfering RNA,siRNA)下调蛋白磷酸酶1核目标亚基(phosphatase nuclear targeting subunit,PNUTS)的表达对喉癌细胞Hep-2增殖、侵袭、迁移和上皮细胞间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法·用携带表达PNUTS siRNA序列的重组腺病毒感染喉癌Hep-2细胞。实验分为空白对照(PBS)组、腺病毒空载(Ad-GFP)组和实验(Ad-siPNUTS)组。实时荧光定量PCR及Western blotting检测细胞中PNUTS的表达。MTT法检测细胞增殖情况。Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力。Western blotting检测细胞中总Rb、磷酸化Rb(p-Rb)、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)、E2F1、E-cadherin、N-cadherin和ZEB1蛋白的表达。结果·与Ad-GFP组比较,Ad-si PNUTS组Hep-2细胞中PNUTS mRNA和蛋白(均P=0.000)表达水平降低;细胞增殖在第2日(P=0.004)、第3日(P=0.001)、第4日(P=0.000)受到抑制;细胞侵袭及迁移(均P=0.000)能力降低;总Rb(P=0.000)、p-Rb(P=0.000)、PI3K(P=0.023)、p-AKT(P=0.000)、E2F1(P=0.000)、N-cadherin(P=0.005)、ZEB1(P=0.000)蛋白表达水平降低,E-cadherin(P=0.003)蛋白表达水平增加。结论·Ad-si PNUTS抑制喉癌细胞Hep-2的增殖、侵袭及转移能力,并逆转EMT,其可能与PI3K/AKT信号通路、Rb信号通路有关。 展开更多
关键词 喉癌 磷酸酶1核目标亚基 磷酸化Rb 侵袭 上皮细胞间质化
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