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西瓜噬酸菌磷酸盐特异性转运系统pstS基因功能分析
被引量：
1
1
作者
蔡馥宇
费诺亚
+4 位作者
乔培
关巍
杨玉文
叶云峰
赵廷昌
《中国瓜菜》
CAS
北大核心
2022年第10期16-25,共10页
以西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)Aac5菌株为研究对象,构建了pstS基因的缺失突变菌株和互补菌株,进行了致病能力及生物学表型的测定,并通过荧光定量PCR分析了pstS缺失对西瓜噬酸菌致病相关基因和磷酸盐特异性转运系统相关基因表达量...
以西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)Aac5菌株为研究对象,构建了pstS基因的缺失突变菌株和互补菌株,进行了致病能力及生物学表型的测定,并通过荧光定量PCR分析了pstS缺失对西瓜噬酸菌致病相关基因和磷酸盐特异性转运系统相关基因表达量的影响。此外,测定了西瓜噬酸菌的PstS蛋白在大肠杆菌中表达时对Pi的结合能力。结果表明,pstS的缺失,降低了西瓜噬酸菌的致病能力、运动能力、体外生长能力和生物膜形成能力,但不影响西瓜噬酸菌诱导烟草产生过敏性坏死反应的能力。pstS缺失后Ⅲ型分泌系统基因hrpG、鞭毛基因fliC、毒力相关基因virB、趋化性相关基因cheA、群体感应基因luxR的相对表达量显著上调,Ⅲ型分泌系统基因hrpX的相对表达量下调。磷酸盐特异性转运系统相关基因Aave_2627、Aave_2628、Aave_2629、Aave_2631和Aave_2632表达量均上调。经PstS对Pi的结合能力试验,证明在大肠杆菌中异源表达的PstS蛋白具有Pi结合能力。研究表明,pstS在西瓜噬酸菌致病能力和Pi转运吸收过程中的Pi结合环节起到重要作用。
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关键词
西瓜噬酸菌
磷酸
盐特异性
转运
系统
pstS
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职称材料
解淀粉芽孢杆菌ptsGHI基因的敲除及缺陷株生长特性
被引量：
2
2
作者
杨慧林
王坤
+3 位作者
廖瑜玲
王斌
林影
潘力
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期95-100,共6页
在解淀粉芽孢杆菌磷酸转移酶系统中,葡萄糖主要是由ptsGHI操纵子编码的酶EI、HPr、EIIGlc转运入细胞.文中运用PCR技术,扩增出ptsG和ptsHI基因上下游的DNA片段,共约1kbp,用融合PCR连接上下游片段后,再连接到温敏型质粒pKS2上,然后电转化...
在解淀粉芽孢杆菌磷酸转移酶系统中,葡萄糖主要是由ptsGHI操纵子编码的酶EI、HPr、EIIGlc转运入细胞.文中运用PCR技术,扩增出ptsG和ptsHI基因上下游的DNA片段,共约1kbp,用融合PCR连接上下游片段后,再连接到温敏型质粒pKS2上,然后电转化到解淀粉芽孢杆菌XH7中,最终构建了ptsG和ptsHI基因缺陷株.实验结果显示:在LB培养基中,ptsG及ptsHI基因缺陷株的生长状况与野生型菌株无明显差异;在含葡萄糖的LB培养基中,ptsG基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株提高了28%,且平稳期比野生型菌株要长,而ptsHI基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株降低了约32%,与其在LB中的生长状况基本一致;ptsG和ptsHI缺陷株及野生型菌株经鸟苷发酵实验后,ptsG基因缺陷株的鸟苷产量比野生型菌株提高了约24%,ptsHI基因缺陷株的鸟苷产量则比野生型菌株降低了约82%.以上结果表明:解淀粉芽孢杆菌ptsG基因缺陷株具有良好的生长能力和产物合成能力.
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关键词
解淀粉芽孢杆菌
磷酸转运系统
基因敲除
代谢工程
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职称材料
题名
西瓜噬酸菌磷酸盐特异性转运系统pstS基因功能分析
被引量：
1
1
作者
蔡馥宇
费诺亚
乔培
关巍
杨玉文
叶云峰
赵廷昌
机构
植物病虫害生物学国家重点实验室·中国农业科学院植物保护研究所
沈阳农业大学
广西壮族自治区农业科学院园艺研究所
出处
《中国瓜菜》
CAS
北大核心
2022年第10期16-25,共10页
基金
国家西甜瓜产业技术体系(CARS-25)
科技兴蒙行动重点专项(NMKJXM202107-03)
+4 种基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(S2019XM06)
中国农业科学院创新工程(CAAS-ASTIP)
新疆生产建设兵团科技攻关项目(2202AB015)
国家重点研发计划(2018YFD0201300)
国家青年基金(31701754)。
文摘
以西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)Aac5菌株为研究对象,构建了pstS基因的缺失突变菌株和互补菌株,进行了致病能力及生物学表型的测定,并通过荧光定量PCR分析了pstS缺失对西瓜噬酸菌致病相关基因和磷酸盐特异性转运系统相关基因表达量的影响。此外,测定了西瓜噬酸菌的PstS蛋白在大肠杆菌中表达时对Pi的结合能力。结果表明,pstS的缺失,降低了西瓜噬酸菌的致病能力、运动能力、体外生长能力和生物膜形成能力,但不影响西瓜噬酸菌诱导烟草产生过敏性坏死反应的能力。pstS缺失后Ⅲ型分泌系统基因hrpG、鞭毛基因fliC、毒力相关基因virB、趋化性相关基因cheA、群体感应基因luxR的相对表达量显著上调,Ⅲ型分泌系统基因hrpX的相对表达量下调。磷酸盐特异性转运系统相关基因Aave_2627、Aave_2628、Aave_2629、Aave_2631和Aave_2632表达量均上调。经PstS对Pi的结合能力试验,证明在大肠杆菌中异源表达的PstS蛋白具有Pi结合能力。研究表明,pstS在西瓜噬酸菌致病能力和Pi转运吸收过程中的Pi结合环节起到重要作用。
关键词
西瓜噬酸菌
磷酸
盐特异性
转运
系统
pstS
Keywords
Acidovorax citrulli
Phosphate specific transport system
PstS
分类号
S651 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
解淀粉芽孢杆菌ptsGHI基因的敲除及缺陷株生长特性
被引量：
2
2
作者
杨慧林
王坤
廖瑜玲
王斌
林影
潘力
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
出处
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期95-100,共6页
基金
国家"863"计划项目(2011AA100905)
文摘
在解淀粉芽孢杆菌磷酸转移酶系统中,葡萄糖主要是由ptsGHI操纵子编码的酶EI、HPr、EIIGlc转运入细胞.文中运用PCR技术,扩增出ptsG和ptsHI基因上下游的DNA片段,共约1kbp,用融合PCR连接上下游片段后,再连接到温敏型质粒pKS2上,然后电转化到解淀粉芽孢杆菌XH7中,最终构建了ptsG和ptsHI基因缺陷株.实验结果显示:在LB培养基中,ptsG及ptsHI基因缺陷株的生长状况与野生型菌株无明显差异;在含葡萄糖的LB培养基中,ptsG基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株提高了28%,且平稳期比野生型菌株要长,而ptsHI基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株降低了约32%,与其在LB中的生长状况基本一致;ptsG和ptsHI缺陷株及野生型菌株经鸟苷发酵实验后,ptsG基因缺陷株的鸟苷产量比野生型菌株提高了约24%,ptsHI基因缺陷株的鸟苷产量则比野生型菌株降低了约82%.以上结果表明:解淀粉芽孢杆菌ptsG基因缺陷株具有良好的生长能力和产物合成能力.
关键词
解淀粉芽孢杆菌
磷酸转运系统
基因敲除
代谢工程
Keywords
Bacillus amyloliquefaciens
phosphotransferase system
gene knockout
metabolic engineering
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
西瓜噬酸菌磷酸盐特异性转运系统pstS基因功能分析
蔡馥宇
费诺亚
乔培
关巍
杨玉文
叶云峰
赵廷昌
《中国瓜菜》
CAS
北大核心
2022
1
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职称材料
2
解淀粉芽孢杆菌ptsGHI基因的敲除及缺陷株生长特性
杨慧林
王坤
廖瑜玲
王斌
林影
潘力
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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