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外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响
被引量:
2
1
作者
于欢
熊建军
+2 位作者
陈培良
周师洁
李卫东
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期423-427,共5页
目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入...
目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl)thiazole],观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果 S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100~1 000nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3 H-TdR)的摄入量较对照组增加12.3%~50.7%(P<0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P<0.01),500和1 000nmol/L剂量组3 H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8%(P<0.05)和26.5%(P<0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。
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关键词
1-
磷酸
神经
鞘
氨
醇
(S1P)
磷酸神经鞘氨醇激酶
(SphK)
骨骼肌成肌细胞
DNA合成
大鼠
在线阅读
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职称材料
1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响
2
作者
于欢
郑美蓉
+2 位作者
余敬谋
陈培良
李卫东
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期6-10,共5页
【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜...
【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志—肌球蛋白和生肌素表达的改变。使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用。【结果】S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2~3 d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6~7 d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P<0.01);SphK活性抑制剂抑制S1P促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P<0.01)。【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化。
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关键词
1-
磷酸
神经
鞘
氨
醇
磷酸神经鞘氨醇激酶
骨骼肌成肌细胞
分化
肌管
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职称材料
题名
外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响
被引量:
2
1
作者
于欢
熊建军
陈培良
周师洁
李卫东
机构
九江学院江西省系统生物重点实验室
出处
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期423-427,共5页
基金
国家青年科学基金项目(81000075)
江西省教育厅重点科研项目(GJJ11694)~~
文摘
目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl)thiazole],观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果 S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100~1 000nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3 H-TdR)的摄入量较对照组增加12.3%~50.7%(P<0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P<0.01),500和1 000nmol/L剂量组3 H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8%(P<0.05)和26.5%(P<0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。
关键词
1-
磷酸
神经
鞘
氨
醇
(S1P)
磷酸神经鞘氨醇激酶
(SphK)
骨骼肌成肌细胞
DNA合成
大鼠
Keywords
sphingosine 1-phosphate (SIP)
SphK
skeletal myoblast cells
DNA synthesis
rat
分类号
Q253 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响
2
作者
于欢
郑美蓉
余敬谋
陈培良
李卫东
机构
九江学院江西省系统生物重点实验室
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期6-10,共5页
基金
国家青年科学基金(81000075)
江西省教育厅重点科研项目GJJ11694)
文摘
【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志—肌球蛋白和生肌素表达的改变。使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用。【结果】S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2~3 d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6~7 d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P<0.01);SphK活性抑制剂抑制S1P促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P<0.01)。【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化。
关键词
1-
磷酸
神经
鞘
氨
醇
磷酸神经鞘氨醇激酶
骨骼肌成肌细胞
分化
肌管
Keywords
S1P
SphK
skeletal myoblast cells
differentiation
myotube
分类号
Q254 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响
于欢
熊建军
陈培良
周师洁
李卫东
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
2
1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响
于欢
郑美蓉
余敬谋
陈培良
李卫东
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013
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