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MEBT/MEBO对大鼠糖尿病足创面组织TGF-β1、Smad3、P-smad3表达及形态学结构的影响 被引量:40
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作者 唐乾利 李利青 +5 位作者 李辉 曾鸿孟 王澍 刘明 郭满 赵曦 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期283-288,共6页
目的:观察皮肤原位再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足创面组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3、磷酸化smad3(P-smad3)表达及形态学结... 目的:观察皮肤原位再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病足创面组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3、磷酸化smad3(P-smad3)表达及形态学结构的影响。方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、贝复济组和MEBT/MEBO组,每组各20只。模型组、MEBT/MEBO组和贝复济组大鼠参照糖尿病模型制备法,采用腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素,建立糖尿病动物模型;空白对照组大鼠则腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。分别于干预治疗后第5、14天各取相同部位创面组织,采用Western blot法检测TGF-β1、Smad3和P-smad3蛋白表达水平,常规病理技术观察溃疡创面组织形态学结构,各组间差异比较采用方差分析和秩和检验。结果:治疗后5 d,各组大鼠Smad3蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(F=1.036,P=0.388);MEBT/MEBO组、贝复济组的大鼠TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平则均明显低于空白对照组(P=0.005、P=0.026,P=0.001、P=0.005);而且,上述2组大鼠的TGF-β1和P-smad3蛋白表达水平亦明显高于模型组(P=0.000);此外,与第5天结果相比,第14天MEBT/MEBO组与贝复济组的TGF-β1、P-smad3表达水平明显下降,差异均具有统计学意义(P=0.000)。治疗后第5天,MEBT/MEBO组、贝复济组及空白对照组溃疡创面肉芽组织中成纤维细胞形态、毛细血管新生情况优于模型组,但空白对照组成纤维细胞排列紊乱;第14天,MEBO组、贝复济组创面组织成纤维细胞及胶原纤维排列致密成形,空白对照组胶原纤维增生明显但排列紊乱,模型组胶原纤维呈团状增生。结论:MEBT/MEBO在创面愈合早期可激活TGF-β1/Smad3信号通路,促进创面损伤修复,而在愈合晚期则抑制该信号通路的活化,控制创面组织过度增生。 展开更多
关键词 糖尿病足 皮肤原位再生医疗技术 转化生长因子-β1 smad3 磷酸化smad3
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3-吲哚丙酸抑制腹膜间皮细胞EMT和纤维化的机制研究
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作者 李红波 凃璨 +2 位作者 付帅 姜南 熊飞 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期338-343,共6页
目的 评估3-吲哚丙酸(3-indoleacetic acid, IPA)对脂多糖(lipolyaccharide, LPS)诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和纤维化的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度(0.1、1.0和10μmol/L)的IPA... 目的 评估3-吲哚丙酸(3-indoleacetic acid, IPA)对脂多糖(lipolyaccharide, LPS)诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和纤维化的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度(0.1、1.0和10μmol/L)的IPA对LPS处理前后的小鼠腹膜间皮细胞增殖活性的影响,确定IPA最佳使用剂量。将小鼠腹膜间皮细胞分成Control组、LPS组、LPS+IPA组、LPS+LY364947(TGF-β1/Smad3通路抑制剂)组、LPS+IPA+LY364947组和LPS+IPA+SRI-011381(TGF-β1/Smad3通路激活剂)组;CCK-8法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞侵袭,ELISA检测培养上清中间质表型α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的浓度,Western blot检测细胞中α-SMA,EMT相关因子E-cadherin, TGF-β1/Smad3通路相关因子Smad3、p-Smad3的蛋白表达。结果 IPA的最佳使用剂量为1.0μmol/L。与Control组相比,LPS组细胞增殖活力、E-cadherin表达水平下降(均P<0.01),侵袭能力、α-SMA表达水平和p-Smad3/Smad3升高(均P<0.01)。与LPS组相比,LPS+IPA组和LPS+LY364947组细胞增殖活力、E-cadherin表达水平上升(均P<0.01),侵袭能力、α-SMA表达和p-Smad3/Smad3下降(均P<0.01)。与LPS+IPA组相比,LPS+IPA+LY364947组所测指标趋势更加显著,LPS+IPA+SRI-011381组所测指标变化趋势均被逆转。结论 IPA通过抑制TGF-β1/Smad3通路中Smad3蛋白的磷酸化,从而抑制细胞EMT进展,减轻LPS诱导的腹膜间皮细胞损伤。 展开更多
关键词 腹膜间皮细胞 3-吲哚丙酸 smad3磷酸化 上皮-间质转化 纤维化
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TGF-β1/Smads通路在体外培养的鼻息肉组织重构中的作用 被引量:7
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作者 李艺敏 谭国静 +4 位作者 江雨 邹璨 胡国华 刘杰 杨玉成 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期737-743,共7页
目的·在体外培养的原代鼻息肉组织中检测探讨TGF-β1/Samds信号通路在鼻息肉组织重构中的作用。方法·筛选慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)各15例,对照组为单纯鼻中隔偏曲患者10例。在术中收... 目的·在体外培养的原代鼻息肉组织中检测探讨TGF-β1/Samds信号通路在鼻息肉组织重构中的作用。方法·筛选慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)各15例,对照组为单纯鼻中隔偏曲患者10例。在术中收集鼻黏膜或鼻息肉组织,通过免疫组织化学染色(SP法)检测组织中蛋白表达水平及分布;通过马松(Masson)染色法检测胶原表达差异;通过实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测mRNA表达水平,Western blotting检测蛋白质表达水平。体外培养15例鼻息肉组织,用转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)进行刺激,使用qRT-PCR、Western blotting和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测mRNA、蛋白和上清胶原表达情况。结果·与CRSsNP组相比,CRSwNP组中TGF-β1、Smad2/3的蛋白和mRNA表达均降低(均P<0.05)。在所有CRS中,TGF-β1与pSmad2/3的蛋白表达呈正相关(r=0.991,P<0.01),与Smad2、Smad3mRNA表达均呈正相关(r=0.581,r=0.658,均P<0.01),与胶原表达呈正相关(r=0.982,P<0.01)。在体外培养的鼻息肉中,TGF-β1能促进pSmad2/3、Smad2、Smad3和胶原的表达。结论·TGF-β1/Smads通路在CRSwNP的组织重构中有重要作用,可能是鼻息肉胶原减少、组织水肿的重要原因之一。 展开更多
关键词 慢性鼻-鼻窦炎 鼻息肉 转化生长因子β1(TGF-β1) 磷酸化smad2/3(psmad2/3) 组织重构
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