目的研究血管平滑肌细胞钙化中受体相互作用蛋白激酶3(Ripk3)调控钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡的作用。方法采用β磷酸甘油和氯化钙培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞诱导钙化。实验随机分为4组:对照组、钙化组、Ripk3^(-/-)组、钙化+Rip...目的研究血管平滑肌细胞钙化中受体相互作用蛋白激酶3(Ripk3)调控钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡的作用。方法采用β磷酸甘油和氯化钙培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞诱导钙化。实验随机分为4组:对照组、钙化组、Ripk3^(-/-)组、钙化+Ripk3^(-/-)组(联合组)。使用茜素红S染色检测血管平滑肌细胞钙化情况,同时测定细胞内Ca^(2+)含量和碱性磷酸酶活性。Western blot法测定Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达。结果血管平滑肌细胞钙化3、7 d的Ripk3表达较钙化前明显增加,14 d的Ripk3表达较7 d明显增加,并达到最高值,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组和Ripk3^(-/-)组比较,钙化组Ca^(2+)、碱性磷酸酶活性、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、细胞凋亡率和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与钙化组比较,联合组Ca^(2+)和碱性磷酸酶活性明显降低[(102.8±12.8)nmol/mg vs(457.1±51.2)nmol/mg,(136.1±15.4)U/mg vs(412.2±46.7)U/mg,P<0.05],Runt相关转录因子2和骨形态发生蛋白2表达明显降低(1.07±0.15 vs 1.84±0.23,1.27±0.14 vs 3.01±0.25,P<0.05)。与钙化组比较,联合组细胞凋亡率和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达明显降低,差异有统计学意义[(15.8±3.9)%vs(31.1±4.2)%,1.19±0.14 vs 2.21±0.23,P<0.05]。结论Ripk3通过促进钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡起到加重血管钙化的作用。展开更多
目的探讨阿霉素诱导胃癌细胞磷脂酰肌醇3’-激酶(P I3’K)/A k t/FKHRL 1通路的激活对胃癌细胞SGC-7901化疗效果的影响及二者的关系。方法阿霉素及P I3’K/A k t抑制剂W ortm ann in分别作用于胃癌细胞SGC-7901,M TT比色法检测胃癌细胞...目的探讨阿霉素诱导胃癌细胞磷脂酰肌醇3’-激酶(P I3’K)/A k t/FKHRL 1通路的激活对胃癌细胞SGC-7901化疗效果的影响及二者的关系。方法阿霉素及P I3’K/A k t抑制剂W ortm ann in分别作用于胃癌细胞SGC-7901,M TT比色法检测胃癌细胞的生存率,W estern印迹法检测FKHRL 1磷酸化表达水平。结果阿霉素抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,呈时间依赖性诱导FKHRL 1磷酸化。W ortm ann in可明显增强阿霉素的细胞生长抑制作用,同时下调阿霉素诱导的磷酸化FKHRL 1表达。结论阿霉素可能通过激活SGC-7901细胞的P I3’K/A k t通路诱导FKHRL 1磷酸化,从而影响胃癌细胞的化疗耐药性。W ortm ann in可以阻断P I3’K/A k t/FKHRL 1通路而提高胃癌的化疗敏感性。展开更多
文摘目的研究血管平滑肌细胞钙化中受体相互作用蛋白激酶3(Ripk3)调控钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡的作用。方法采用β磷酸甘油和氯化钙培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞诱导钙化。实验随机分为4组:对照组、钙化组、Ripk3^(-/-)组、钙化+Ripk3^(-/-)组(联合组)。使用茜素红S染色检测血管平滑肌细胞钙化情况,同时测定细胞内Ca^(2+)含量和碱性磷酸酶活性。Western blot法测定Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达。结果血管平滑肌细胞钙化3、7 d的Ripk3表达较钙化前明显增加,14 d的Ripk3表达较7 d明显增加,并达到最高值,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组和Ripk3^(-/-)组比较,钙化组Ca^(2+)、碱性磷酸酶活性、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、细胞凋亡率和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与钙化组比较,联合组Ca^(2+)和碱性磷酸酶活性明显降低[(102.8±12.8)nmol/mg vs(457.1±51.2)nmol/mg,(136.1±15.4)U/mg vs(412.2±46.7)U/mg,P<0.05],Runt相关转录因子2和骨形态发生蛋白2表达明显降低(1.07±0.15 vs 1.84±0.23,1.27±0.14 vs 3.01±0.25,P<0.05)。与钙化组比较,联合组细胞凋亡率和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达明显降低,差异有统计学意义[(15.8±3.9)%vs(31.1±4.2)%,1.19±0.14 vs 2.21±0.23,P<0.05]。结论Ripk3通过促进钙磷沉积、细胞骨分化和细胞凋亡起到加重血管钙化的作用。
文摘目的探讨阿霉素诱导胃癌细胞磷脂酰肌醇3’-激酶(P I3’K)/A k t/FKHRL 1通路的激活对胃癌细胞SGC-7901化疗效果的影响及二者的关系。方法阿霉素及P I3’K/A k t抑制剂W ortm ann in分别作用于胃癌细胞SGC-7901,M TT比色法检测胃癌细胞的生存率,W estern印迹法检测FKHRL 1磷酸化表达水平。结果阿霉素抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,呈时间依赖性诱导FKHRL 1磷酸化。W ortm ann in可明显增强阿霉素的细胞生长抑制作用,同时下调阿霉素诱导的磷酸化FKHRL 1表达。结论阿霉素可能通过激活SGC-7901细胞的P I3’K/A k t通路诱导FKHRL 1磷酸化,从而影响胃癌细胞的化疗耐药性。W ortm ann in可以阻断P I3’K/A k t/FKHRL 1通路而提高胃癌的化疗敏感性。
