禾谷炭疽菌磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C生物信息学分析 被引量：3

1

作者 韩长志 《科学技术与工程》 北大核心 2016年第2期18-23,共6页

磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)作为植物病原菌G蛋白信号转导过程中的重要调节因子,在对植物侵染、定殖、扩展等致病过程中发挥着重要作用。禾谷炭疽菌侵染玉米、小麦等农作物引起炭疽病,给各国农业生产造成了巨大经济损失。基于酿酒... 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)作为植物病原菌G蛋白信号转导过程中的重要调节因子,在对植物侵染、定殖、扩展等致病过程中发挥着重要作用。禾谷炭疽菌侵染玉米、小麦等农作物引起炭疽病,给各国农业生产造成了巨大经济损失。基于酿酒酵母典型PI-PLC序列,利用Blastp以及关键词对禾谷炭疽菌蛋白质数据库进行比对、搜索,以及通过SMART保守结构域分析,明确该菌存在7个典型的PI-PLC;同时,通过对上述氨基酸序列进行细胞信号肽、跨膜结构域以及二级结构等生物信息学分析,明确上述PI-PLC在蛋白质二级结构组成、信号肽等方面均具有一定差异,除Cg PLC1具有信号肽外,其他均不含有;7个PI-PLC中4个定位在细胞质中,其他则定位在细胞核、高尔基体上。此外,通过对禾谷炭疽菌中的7个PI-PLC与其他物种中的30个同源序列进行遗传关系比较分析,发现禾谷炭疽菌中的PI-PLC与C.higginsianum、C.fioriniae等炭疽菌属中的病菌具有较高的同源序列,较近的亲缘关系。该研究为深入开展禾谷炭疽菌PI-PLC定位、功能研究打下坚实的理论基础,同时,也为进一步开展其他炭疽菌的研究提供重要的理论指导。 展开更多

关键词 禾谷炭疽菌 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶c 信号肽 二级结构 炭疽菌属

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希金斯炭疽菌磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C生物信息学分析 被引量：1

2

作者 韩长志 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第10期177-177,178,179,180,共4页

希金斯炭疽菌侵染菜心、萝卜等十字花科植物引起炭疽病,给各国农业生产造成了巨大的经济损失。基于酿酒酵母典型的磷酸肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)序列,利用Blastp以及关键词对该菌蛋白质数据库进行比对、搜索,以及通过SMART分析,明确该... 希金斯炭疽菌侵染菜心、萝卜等十字花科植物引起炭疽病,给各国农业生产造成了巨大的经济损失。基于酿酒酵母典型的磷酸肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)序列,利用Blastp以及关键词对该菌蛋白质数据库进行比对、搜索,以及通过SMART分析,明确该菌存在8个典型的PI-PLC序列;通过生物信息学分析,明确上述PI-PLC序列在蛋白质二级结构组成、信号肽等方面均具有一定差异。遗传关系比较分析明确该菌中的PI-PLC序列与禾谷炭疽菌(Colletorichum graminicola)、松针炭疽菌(C.fioriniae)等炭疽菌属中的病菌具有较近的亲缘关系。 展开更多

关键词 希金斯炭疽菌 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶c 亚细胞定位 二级结构 炭疽菌属

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磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C的异源表达和应用 被引量：2

3

作者 林美璇 周小满 +1 位作者 关锋 崔文璟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期81-87,共7页

旨在研究大肠杆菌产磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)的发酵表达和分离纯化,探究PI-PLC酶切GPI锚定蛋白的效果。依据NCBI数据库中蜡样芽孢杆菌的PI-PLC的基因序列,按照大肠杆菌的密码子偏好性进行密码子优化,合成相应基因序列并构建基... 旨在研究大肠杆菌产磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)的发酵表达和分离纯化,探究PI-PLC酶切GPI锚定蛋白的效果。依据NCBI数据库中蜡样芽孢杆菌的PI-PLC的基因序列,按照大肠杆菌的密码子偏好性进行密码子优化,合成相应基因序列并构建基因表达载体pGEX-6P-1-PI-PLC。将重组质粒转入受体菌E.coli BL21(DE3)中,通过加入异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导目的基因PI-PLC表达。经检测,含有GST标签的PI-PLC融合蛋白以可溶蛋白形式存在于菌体破碎上清,分子量约为61 kDa,与预期相符。初步优化诱导表达条件后,发现最佳诱导表达条件为:以接种量5%接种体积分数接种,待菌体生长至OD600nm达到0.5,在16℃条件下以0.3 mmol/L浓度IPTG诱导24 h。利用GST标签对蛋白进行纯化,纯化后的PI-PLC质量浓度为0.52 mg/mL,比酶活为1322.5 U/mg。利用PI-PLC酶液对哺乳动物细胞表面的模式GPI锚定蛋白CD59进行酶切,酶切作用显著。因此,下一步可以将PI-PLC融合蛋白应用于细胞生物学中对GPI-APs的研究和鉴定。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶c 蜡样芽孢杆菌 密码子优化 酶切

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磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C基因在乳酸乳球菌中的异源表达

4

作者 汤先泽 刘伟 +3 位作者 皮雄娥 尹业师 王欣 刘新利 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第4期640-646,共7页

根据乳酸乳球菌密码子的偏好性,在不改变编码蛋白的基础上,优化设计并合成枯草芽孢杆菌磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C基因,将其与大肠埃希菌-乳酸乳球菌穿梭质粒p AMJ399连接,构建重组质粒p AMJ399-PIPLC,并电转化至乳酸乳球菌中进行诱导表达... 根据乳酸乳球菌密码子的偏好性,在不改变编码蛋白的基础上,优化设计并合成枯草芽孢杆菌磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C基因,将其与大肠埃希菌-乳酸乳球菌穿梭质粒p AMJ399连接,构建重组质粒p AMJ399-PIPLC,并电转化至乳酸乳球菌中进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示:重组蛋白以可溶性蛋白的形式分泌于胞外,分子质量约35 ku,与预期蛋白大小一致。重组蛋白在PI-李斯特氏菌显色平板上显现明显的乳白色晕圈,证明重组蛋白具有酶活性,磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)在重组乳酸乳球菌中成功获得表达。通过优化培养条件,以2%转接量,在含有1%红霉素抗性的GM17液体培养基中,于32℃静止培养24 h,测得培养基上清液中PI-PLC的浓度为1.092μg·m L-1。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶c 克隆表达 乳酸乳球菌 GPI锚定蛋白

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人骨髓基质细胞中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶DcDNA的克隆 被引量：6

5

作者 顾善兰 唐建华 张晓杰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期172-178,共7页

为探讨人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI PLD)cDNA的结构及功能 ,应用RT PCR从人骨髓基质细胞中克隆了长约 2 6kb的GPI PLDcDNA ,包含完整阅读框架 ,编码 2 3个氨基酸的信号肽及 817个氨基酸的成熟肽 .该cDNA与人胰腺GPI PLDcDNA... 为探讨人糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI PLD)cDNA的结构及功能 ,应用RT PCR从人骨髓基质细胞中克隆了长约 2 6kb的GPI PLDcDNA ,包含完整阅读框架 ,编码 2 3个氨基酸的信号肽及 817个氨基酸的成熟肽 .该cDNA与人胰腺GPI PLDcDNA几乎百分之百同源 ,与人肝脏GPI PLDcDNA同源性为 95 %,氨基酸同源性为 94 %,3者对应的结构基因只有 1个 ,位于人类第 6号染色体上 ,基因组序列长约 80kb ,包括 2 5个外显子 .构建克隆的GPI PLDcDNA的真核表达载体 ,通过脂质体转染能表达GPI锚定的胎盘型碱性磷酸酶 (PLAP)而无GPI PLD活性的G9细胞 ,同时设立对照组检测GPI PLDcDNA的功能 .结果显示 ,对照组细胞几乎检测不到GPI PLD活性 ,其表达的PLAP主要位于细胞膜上 ;而转染GPI PLDcDNA的G9细胞能检测到较高水平的GPI PLD活性 ,而且大部分酶活性存在于培养液中 ,其表达的PLAP也主要被释放入培养液 .结果证实 ,从人骨髓基质细胞中克隆的GPI PLDcDNA有生物学功能 ,它能释放细胞膜上GPI锚定蛋白质 . 展开更多

关键词 人骨髓基质细胞 糖基化磷脂酰肌醇 特异性磷脂酶D cDNA克隆

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竞争性RT-PCR法定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D基因的表达 被引量：4

6

作者 张晓杰 鲁纯平 +2 位作者 唐建华 顾善兰 禹虹 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第4期322-326,共5页

目的 :建立一种定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI PLD)基因表达水平的竞争性RT PCR方法 ,以研究GPI PLD与白血病等疾病的关系。方法 :首先用PCR定点诱变法构建GPI PLD的竞争性cDNA模板 ,该模板与靶cDNA具有相同的引物结合区 ... 目的 :建立一种定量检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI PLD)基因表达水平的竞争性RT PCR方法 ,以研究GPI PLD与白血病等疾病的关系。方法 :首先用PCR定点诱变法构建GPI PLD的竞争性cDNA模板 ,该模板与靶cDNA具有相同的引物结合区 ,但在长度上要比靶cDNA少 2 0个碱基。把该竞争性cD NA模板在体外转录出的竞争性RNA作为RT PCR的内标准 ,与白血病细胞株K5 6 2细胞的总RNA在同一体系内进行逆转录和PCR扩增 ,二者的PCR产物因长度不同可经电泳区分开 ,然后对电泳图像进行光密度扫描 ,根据已知的竞争性RNA模板的量计算出GPI PLDmRNA的量 ,从而得到GPI PLD基因的绝对表达量。结果 :构建和制备了长度为 198bp的GPI PLD竞争性RNA模板 ,该模板与靶模板呈明显的竞争性RT PCR反应 ;测得K5 6 2细胞GPI PLD基因的表达水平为每纳克 (44 0± 2 0 )拷贝。结论 :成功地建立了一种定量检测GPI PLD基因表达水平的竞争性RT PCR方法 ,该方法具有灵敏、准确等优点。 展开更多

关键词 竞争性RT-PcR法 定量检测 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D基因 表达 白血病

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杨树磷酸肌醇特异性磷脂酶C基因家族鉴定与分析 被引量：5

7

作者 张杰伟 丁莉萍 +2 位作者 陈亚娟 王宏芝 魏建华 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2016年第11期1181-1186,共6页

为了对已测序杨树Populus trichocarpa Torr.＆Gray中磷酸肌醇特异性磷脂酶C（phosphoinositidespecific phospholipase C,PI-PLC）家族基因进行系统分析,利用杨树基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定杨树PI-PLC家族基因的基因结构、... 为了对已测序杨树Populus trichocarpa Torr.＆Gray中磷酸肌醇特异性磷脂酶C（phosphoinositidespecific phospholipase C,PI-PLC）家族基因进行系统分析,利用杨树基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定杨树PI-PLC家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过蛋白序列比对进行进化和分类分析。结果表明,杨树中含有7个PI-PLC家族基因,含有8-10个外显子,分布于杨树的4条染色体上。MEME和Pfam保守结构域分析显示,杨树PI-PLC蛋白均含有4个保守的EF、X、Y和C2结构域。蛋白质进化树分析结果表明PI-PLC可分为2个亚家族。 展开更多

关键词 磷酸肌醇特异性磷脂酶c 杨树 进化分析 基因家族

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桃磷酸肌醇特异性磷脂酶C基因家族鉴定与分析 被引量：4

8

作者 张杰伟 任飞 +2 位作者 张中保 谢华 魏建华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期185-190,共6页

为了对桃(Prunus persica var.Lovell)中PI-PLC家族基因进行系统分析,利用桃基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定桃PI-PLC家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过序列比对进行进化和分类分析。结果表明,桃中含有5个PI-PLC家... 为了对桃(Prunus persica var.Lovell)中PI-PLC家族基因进行系统分析,利用桃基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定桃PI-PLC家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过序列比对进行进化和分类分析。结果表明,桃中含有5个PI-PLC家族基因,预测他们均含有9个外显子,分布于桃的2条染色体上。保守结构域分析结果显示,桃中PI-PLC蛋白均含有4个保守的EF、X、Y和C2结构域。进化树分析结果表明桃PI-PLC家族基因可分为4个亚家族。 展开更多

关键词 磷酸肌醇特异性磷脂酶c 桃 进化分析 基因家族

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肝细胞内两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性 被引量：3

9

作者 卢虹 陈迎风 吴兴中 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期198-201,共4页

目的　观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法　采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果　 (1)钙离子依赖性PC PLC活性在诱癌过程中逐步升高 ;(2 )鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变 ;(3)PC PL... 目的　观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法　采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果　 (1)钙离子依赖性PC PLC活性在诱癌过程中逐步升高 ;(2 )鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变 ;(3)PC PLC抗体对钙非依赖性PC PLC活性具有显著抑制 ;(4 )肝细胞中存在着与PC PLC抗体相结合的蛋白质 ;(5 )钙依赖性和钙非依赖性PC PLC的蛋白峰有部分重叠 ;(6 )亲和层析柱提纯的酶蛋白只有钙非依赖性PC PLC活性。 展开更多

关键词 磷脂酰胆碱特异性磷脂酶c 肝癌 中性鞘磷脂酶

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巴西蜂胶对磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C活性的影响

10

作者 玄红专 李振 +2 位作者 张丽 宋玉冬 胡福良 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期128-130,76,共4页

去除血清和生长因子条件下研究巴西蜂胶对磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(PC-PLC)活性的影响。去除血清和生长因子诱导内皮细胞(VECs)凋亡,经12.5、25和50μg/mL的巴西蜂胶处理VECs 24 h,MTT法检测细胞的存活率;以L-α-卵磷脂为底物测定PC-PL... 去除血清和生长因子条件下研究巴西蜂胶对磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(PC-PLC)活性的影响。去除血清和生长因子诱导内皮细胞(VECs)凋亡,经12.5、25和50μg/mL的巴西蜂胶处理VECs 24 h,MTT法检测细胞的存活率;以L-α-卵磷脂为底物测定PC-PLC的活性;免疫细胞化学法检测PC-PLC的表达。结果表明高浓度的巴西蜂胶降低VECs存活率,抑制PC-PLC的活性及表达。巴西蜂胶对VECs的影响具有剂量依赖性,今后巴西蜂胶应用中应考虑剂量对内皮细胞的影响。 展开更多

关键词 巴西蜂胶 磷脂酰胆碱特异性磷脂酶c 存活率

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糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的表达在肺癌诊断中的意义

11

作者 石新云 黄明清 +1 位作者 黄洁 金法祥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期1431-1433,共3页

目的:探讨肺癌患者糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)的活性变化,为肺癌患者预后判断提供依据。方法:利用具有糖基化磷脂酰肌醇(GPI)结构的胎盘碱性磷酸酶(PLAP)做底物,通过TX-114分相,定量检测外周血单个核细胞和血浆中GPI-PLD活... 目的:探讨肺癌患者糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)的活性变化,为肺癌患者预后判断提供依据。方法:利用具有糖基化磷脂酰肌醇(GPI)结构的胎盘碱性磷酸酶(PLAP)做底物,通过TX-114分相,定量检测外周血单个核细胞和血浆中GPI-PLD活性,并采用荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中GPI-PLDmRNA水平,分析其表达量与肺癌之间的关系。结果:肺癌患者外周血单个核细胞和血浆中GPI-PLD酶活性分别为(24.15±2.33)%和(29.71±1.32)%,明显低于正常人(P<0.001),且肺癌患者单个核细胞GPI-PLD活性仅为其血浆中酶活性水平的81.29%,两者之间差异有显著性(P<0.05);肺癌患者外周血单个核细胞中GPI-PLD mRNA表达平均值为0.44±0.11,明显低于正常人(P<0.001)。结论:GPI-PLD在肺癌患者中的活性及表达明显降低,有可能作为肺癌预后判断的指标之一。 展开更多

关键词 肺肿瘤 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D 荧光定量PcR

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兰花磷酸肌醇特异性磷脂酶C基因家族生物信息学分析 被引量：4

12

作者 胡广隆 陈亚娟 +2 位作者 魏建华 王宏芝 张杰伟 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期2218-2223,共6页

【目的】为研究兰花(Phalaenopsis equestris)中PI-PLC基因家族各成员在兰花中的生理功能。【方法】利用兰花基因组数据库,经过生物信息学分析,获得兰花PI-PLC基因家族成员的基因结构、染色体定位和编码蛋白,经过多重序列比对进行进化... 【目的】为研究兰花(Phalaenopsis equestris)中PI-PLC基因家族各成员在兰花中的生理功能。【方法】利用兰花基因组数据库,经过生物信息学分析,获得兰花PI-PLC基因家族成员的基因结构、染色体定位和编码蛋白,经过多重序列比对进行进化和分类分析。【结果】结果表明:兰花基因组中含有3个PI-PLC家族基因成员,分别含有9~13个外显子。TMHMM跨膜区结构分析显示,兰花PI-PLC蛋白均不含有跨膜区;MEME保守结构域分析显示,兰花PI-PLC蛋白均含有4个保守的EF、X、Y和C2结构域。【结论】以上结果对解析兰花PI-PLC蛋白的生物学功能提供重要的线索。 展开更多

关键词 磷酸肌醇特异性磷脂酶c 兰花 基因家族 进化分析

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拟南芥非特异性磷脂酶C2的磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C活性研究 被引量：2

13

作者 孙建 裴慧娟 +4 位作者 路小铎 王晓云 赵明国 范云六 张春义 《山东农业科学》 2008年第8期6-10,共5页

在拟南芥中有6个非特异性磷脂酶C（NPC1-NPC6）。GUS染色显示NPC2在根中主要是在根尖分生区和伸长区表达，在成熟区主要是在维管组织中表达；在叶中，NPC2主要在发育的叶片中表达，随着叶片成熟进程，NPC2基因的表达量逐渐降低。npc2—... 在拟南芥中有6个非特异性磷脂酶C（NPC1-NPC6）。GUS染色显示NPC2在根中主要是在根尖分生区和伸长区表达，在成熟区主要是在维管组织中表达；在叶中，NPC2主要在发育的叶片中表达，随着叶片成熟进程，NPC2基因的表达量逐渐降低。npc2—1突变体的PC—PLC活性比野生型降低47．7％，互补的植物能不同程度地恢复突变体的PC—PLC酶活性。这说明NPC2具有PC—PLC酶活性。NPC2基因在侧根形成位点的表达虽然与IAA诱导的侧根形成紧密相关，但外源IAA处理野生型和突变体之间的侧根密度、主根长度和侧根总长无明显区别。 展开更多

关键词 非特异性磷脂酶c 磷脂酰胆碱特异性磷脂酶c活性 启动子 侧根形成 GUS染色

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毛白杨(BJHR01)磷酸肌醇特异性磷脂酶C(PLC2)基因生物信息学分析

14

作者 李墨野 赵慧 +3 位作者 姜洋 刘笑平 林永红 李开隆 《安徽农业科学》 CAS 2014年第31期10867-10872,共6页

[目的]用生物信息学手段分析、预测毛白杨PLC2基因/蛋白质的结构与特征,为该基因的克隆及功能研究提供理论参考。[方法]以PLC2基因及对应蛋白质为研究对象,利用各种网上数据库及生物信息学分析软件对其进行相关分析、预测。[结果]PLC2... [目的]用生物信息学手段分析、预测毛白杨PLC2基因/蛋白质的结构与特征,为该基因的克隆及功能研究提供理论参考。[方法]以PLC2基因及对应蛋白质为研究对象,利用各种网上数据库及生物信息学分析软件对其进行相关分析、预测。[结果]PLC2基因的GenBank登录号为JX424764.1,ORF长957bp,编码318个氨基酸,对应蛋白质PLC2的分子量35 999.1D,理论等电点7.07;PLC2与毛果杨(XP_002313726.1)的同源性较高;PLC2属于PI-PLCc_GDPD_SF超家族,无O-糖基化位点,无二硫键,无跨膜区和信号肽,有16个磷酸化位点。[结论]对PLC2基因/蛋白的各级结构及功能进行预测,为下一步试验奠定基础。 展开更多

关键词 毛白杨 磷酸肌醇特异性磷脂酶c 生物信息学

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磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在肝细胞癌中的特异性和敏感性以及表达 被引量：2

15

作者 张世杰 郎振为 +1 位作者 王欣欣 吕福东 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期545-548,共4页

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC3)在高、中/低分化的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组中的表达强度、特异性和敏感性。方法挑选首都医科大学附属北京佑安医院2009年12月至2010年9月收治的肝细胞癌病例70例,经过... 目的探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC3)在高、中/低分化的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组中的表达强度、特异性和敏感性。方法挑选首都医科大学附属北京佑安医院2009年12月至2010年9月收治的肝细胞癌病例70例,经过免疫组化染色,观察GPC3在肝细胞癌内以及其周围非肝细胞癌的着色情况和GPC3在所有肝细胞癌病例中的检出率。将70个病例根据癌分化程度分为高、中/低两组。观察GPC3在两组中的着色强度与Ki67在两组中的表达强度是否有相关性。结果①所有肝细胞癌病例的GPC3染色只在肝细胞癌中,肝细胞癌周围非癌组织中均不着色;GPC3在高、中/低两组中总检出率为85%,高分化组中阳性率73.0%,中/低分化组阳性检出率90.2%。②GPC3中强着色度(++、+++)在高分化组中只有2例,占10.5%;在中/低分化组中38例,占74.8%。GPC3在高,中/低分化的肝细胞癌中的表达强度差异有统计学意义(P<0.01)。③Ki67在高分化组中(++、+++)中强度表达是0例,占0%;在中/低分化组中中强度表达是37例,占72.5%,Ki67在高、中/低分化组肝细胞癌中的表达差异有统计学意义(P<0.01)。GPC3在这两组中的着色强度和Ki67在这2组中的的表达强度具有相关性(P<0.01)。结论 GPC3在肝细胞癌中的表达具有高度特异性和敏感性,对肝细胞癌诊断有重要价值。 展开更多

关键词 肝细胞癌 分化程度 特异性 敏感性 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3 KI67

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蛋白激酶C和磷脂酰肌醇4,5二磷酸之间相互调节作用的研究进展 被引量：7

16

作者 陈兴娟 张熙东 +2 位作者 张璇 杲海霞 张海林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1497-1499,共3页

蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是一个多基因家族,包含多种同工酶,分布广泛且功能复杂,在许多信号转导通路发挥重要作用。磷脂酰肌醇(4,5)二磷酸(PIP2)是分布在细胞膜中的磷脂类信号分子,在细胞中的分布和含量处于动态变化中。PIP2的... 蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是一个多基因家族,包含多种同工酶,分布广泛且功能复杂,在许多信号转导通路发挥重要作用。磷脂酰肌醇(4,5)二磷酸(PIP2)是分布在细胞膜中的磷脂类信号分子,在细胞中的分布和含量处于动态变化中。PIP2的水解后生成DAG和IP3。DAG可以直接激活PKC,而IP3通过调节细胞内钙离子的浓度从而改变钙依赖型PKCs的活性。同时,PKC通过激活PI4K或PIP5K可以调节细胞膜PIP2水平。PKCs使离子通道蛋白发生磷酸化,改变通道蛋白与PIP2的亲和力,从而影响PIP2对离子通道的调节。该文对PKCs和PIP2在细胞信号转导过程中相互调节的相关研究进展进行综述。 展开更多

关键词 蛋白激酶c 磷脂酰肌醇(4 5)二磷酸(PIP2) 钙离子 磷脂酶c(PLc) 信号转导 调节

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林鸿宣院士研究组揭示磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸调控水稻生长发育的分子机制

17

《湖北农业科学》 2019年第24期F0004-F0004,共1页

2019年12月27日,Plant Physiology在线发表了中科院分子植物卓越创新中心/植物生理生态研究所林鸿宣研究组题为A SAC phosphoinositide phosphatase controls rice development via hydrolyzing PI4P and PI(4,5)P2的研究论文。该研究... 2019年12月27日,Plant Physiology在线发表了中科院分子植物卓越创新中心/植物生理生态研究所林鸿宣研究组题为A SAC phosphoinositide phosphatase controls rice development via hydrolyzing PI4P and PI(4,5)P2的研究论文。该研究首次报道了水稻SAC磷酸酶特异性水解磷脂酰肌醇-4-磷酸(PI4P)和磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸[PI(4,5)P2],以及磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸通过特异性抑制Arp2/3复合体介导的肌动蛋白微丝聚合过程影响细胞骨架重排. 展开更多

关键词 二磷酸 水稻生长发育 磷脂酰肌醇 肌动蛋白微丝 聚合过程 特异性抑制 首次报道

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动态观察不同的药理性阻断剂对膜磷脂PtdIns(4,5)P_2的代谢过程的影响特征 被引量：1

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作者 王川 贾庆忠 +1 位作者 杜肖娜 张海林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期27-32,共6页

目的　时空观察PtdIns(4, 5)P2 在细胞内水解及再合成的动态变化过程,并比较渥曼青霉素 (wortmannin)、氯化锂(LiCl)、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4, 5)P2 代谢过程的影响。方法　利用绿色荧光蛋白 (GFP)与磷脂酶Cδ1 (PLCδ1 )P... 目的　时空观察PtdIns(4, 5)P2 在细胞内水解及再合成的动态变化过程,并比较渥曼青霉素 (wortmannin)、氯化锂(LiCl)、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4, 5)P2 代谢过程的影响。方法　利用绿色荧光蛋白 (GFP)与磷脂酶Cδ1 (PLCδ1 )PH区 (PLCδ1PH)的融合体 (PLCδ1PH GFP)作为标记PtdIns(4, 5)P2 的特异性荧光探针,使用激光扫描共聚焦显微镜技术动态观察及测量PtdIns( 4, 5 )P2 位置的变化。结果　在CHO细胞,用ATP刺激内源性表达的P2Y受体,可引起PLCδ1PH GFP荧光转位可恢复性的变化;渥曼青霉素和LiCl不影响PLC激活所介导的PLCδ1PH GFP荧光由胞膜到胞浆的转位变化,但可阻断此转位的恢复;U73122可以阻断PLC激活所介导的PLCδ1PH GFP荧光由胞膜到胞浆的转位变化; 新霉素对PLCδ1PH GFP的转位无影响,但可抑制未表达PLCδ1PH GFP的细胞中PLC激活后水解PtdIns(4,5)P2 的作用。结论　PLCδ1PH GFP可作为一种有价值的荧光探针来标记PtdIns( 4, 5 )P2 的动态变化;渥曼青霉素、LiCl、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4, 5)P2 代谢过程有不同的影响;PLCδ1PH GFP可阻断新霉素发挥其抑制PLC水解PtdIns(4, 5)P2 的作用。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇4 5二磷酸 绿色荧光蛋白 磷脂酶c PH区结构域 新霉素 受体 激光扫描共聚焦显微镜

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重组人磷脂酶D2在体内能明显抑制慢性哮喘豚鼠血清中GPI-PLD的表达(英文)

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作者 朱玲 余传星 +2 位作者 邹伟斌 何小丽 林俊锦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期116-121,共6页

通过建立慢性豚鼠哮喘模型,研究重组人磷脂酶D2(rhPLD2)干预慢性哮喘豚鼠血清中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)含量的变化,探寻可能的机制.以rhPLD2干预慢性哮喘豚鼠,用TX-114分相法检测豚鼠血清中GPI-PLD酶活性.与正常状态豚... 通过建立慢性豚鼠哮喘模型,研究重组人磷脂酶D2(rhPLD2)干预慢性哮喘豚鼠血清中糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)含量的变化,探寻可能的机制.以rhPLD2干预慢性哮喘豚鼠,用TX-114分相法检测豚鼠血清中GPI-PLD酶活性.与正常状态豚鼠相比较,慢性哮喘状态豚鼠其血清中GPI-PLD酶活性显著升高.但以rhPLD2及地塞米松干预慢性哮喘豚鼠后,该指标显著下降.rhPLD2可通过抑制其血清中GPI-PLD酶活性表达,来抑制哮喘发生过程中的炎症反应. 展开更多

关键词 重组人磷脂酶D2 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D 慢性哮喘 豚鼠

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bFGF激活tyrosine kinase／PI3K／PLCγ增加血管内皮细胞[Mg^2＋]i的研究 被引量：3

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作者 洪炳哲 王丽萍 +5 位作者 高立建 谢同杰 朴海南 李婉秋 刘学田 李胜范 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期50-53,共4页

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)对人脐带静脉内皮细胞(human umbilicalvein endothelial cells,HUVECs)内游离镁离子浓度([Mg2+]i)的调节机制研究。方法我们采用荧光指示剂mag-fura-2,运用PTi阳... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)对人脐带静脉内皮细胞(human umbilicalvein endothelial cells,HUVECs)内游离镁离子浓度([Mg2+]i)的调节机制研究。方法我们采用荧光指示剂mag-fura-2,运用PTi阳离子测定系统动态测HUVECs的[Mg2+]i。结果经酪氨酸激酶阻断剂(tyrphostin A23和genistein)、3-磷脂酰肌醇激酶阻断剂(wortmannin和LY294002)、磷脂酶Cγ阻断剂(U73122)预处理,能阻断bF-GF诱导的[Mg2+]i增加。但经磷脂酶Cγ阻断剂无活性的类似物(U73343)和丝裂原活化蛋白激酶阻断剂(SB202190和PD98059)预处理,不能阻断bFGF诱导的[Mg2+]i增加。结论bFGF通过酪氨酸激酶/3-磷脂酰肌醇激酶/磷脂酶Cγ信号传递途径使细胞内的Mg2+库释放Mg2+,从而增加HUVECs的[Mg2+]i。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 镁 酪氨酸激酶 3-磷脂酰肌醇激酶 磷脂酶cγ

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