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重组磷脂酰丝氨酸合成酶的分离纯化及酶学性质研究被引量：1: 1; 作者张业尼路福平 +1 位作者李玉王建玲《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期106-110,共5页; 利对重组枯草芽孢杆菌（pBES-pss）表达的磷脂酰丝氨酸合成酶进行分离纯化及酶学性质研究。pBES-pss发酵后的粗酶液经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、SP—SepharoseHP离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析。基本获得电泳纯的重组磷脂... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌磷脂酰丝氨酸合成酶纯化性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

基因工程手段提高磷脂酰丝氨酸合成酶活性的研究: 2; 作者陈梦雪卢欣睿 +5 位作者马玉孙明波罗维佳王培琪章朦玥张怡轩《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期44-48,共5页; 为了提高目的蛋白磷脂酰丝氨酸合成酶(PSS)的表达,使用rTaq酶从E coli K12总DNA中PCR扩增获得磷脂酰丝氨酸合成酶基因片段,将其重组于高效表达载体pET28b质粒,转入相应表达菌株进行表达,收集菌体超声破碎获得含PSS的粗酶液,使用两相反... 展开更多; 关键词磷脂酰丝氨酸合成酶基因重组同源模建突变; 在线阅读下载PDF 职称材料

磷脂酰丝氨酸制备的研究进展被引量：3: 3; 作者孙明波刘天薇 +1 位作者王继文张怡轩《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期80-85,共6页; 磷脂酰丝氨酸具有改善记忆和认知能力、防治老年痴呆症、抑郁症及缓解精神压力等作用,目前在国外被用作营养补充剂广泛应用于保健食品中。着重从提取法和酶转化法2个方面综述了磷脂酰丝氨酸的制备方法,同时通过对国内外磷脂酰丝氨酸消... 展开更多; 关键词磷脂酰丝氨酸制备提取磷脂酰丝氨酸合成酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

PSS定点突变及酶活研究被引量：2: 4; 作者卢欣睿崔亚顺 +3 位作者王培琪罗维佳陈梦雪张怡轩《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第6期94-97,共4页; 磷脂酰丝氨酸可在磷脂酰丝氨酸合成酶(PSS)催化下由磷脂酰胆碱和L-丝氨酸生成。通过生物信息学手段对磷脂酰丝氨酸合成酶蛋白质结构进行解析和研究分析,获得2个可突变位点F139和P272,通过Overlap PCR法进行定点突变,测定突变序列,并进... 展开更多; 关键词磷脂酰丝氨酸合成酶结构分析定点突变; 在线阅读下载PDF 职称材料

两种组成型启动子PermE*和PSau3A在变铅青链霉菌中的启动效果比较: 5; 作者张莹陶欣艺 +1 位作者王风清魏东芝《化学与生物工程》 CAS 2013年第11期47-50,54,共5页; 红霉素抗性启动子PermE*和来源于链霉菌核基因组片段的PSau3A启动子均属于链霉菌组成型强启动子,分别将它们插入大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pNW-S1的SD序列和转录起始位点之间,构建成两个稳定的组成型表达质粒:pNW-S3和pNW-S4。以磷脂酰丝... 展开更多; 关键词组成型启动子链霉菌磷脂酰丝氨酸合成酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组磷脂酰丝氨酸合成酶的分离纯化及酶学性质研究被引量：1: 1; 作者张业尼路福平李玉王建玲; 机构天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期106-110,共5页; 基金天津科技大学科学研究基金项目(20080202) 国家科技基础平台项目(2005DKA21204-10); 文摘利对重组枯草芽孢杆菌（pBES-pss）表达的磷脂酰丝氨酸合成酶进行分离纯化及酶学性质研究。pBES-pss发酵后的粗酶液经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、SP—SepharoseHP离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析。基本获得电泳纯的重组磷脂酰丝氨酸合成酶，比活力可达13．62U／mg，分子量约为53kD。酶学性质研究表明，该酶催化卵磷脂水解反应的最适pH8．0，最适温度为35℃。稳定性研究表明：该酶在pH6．5～9．5区间和低于45℃温度下稳定。表面活性剂及金属离子对该酶水解活性的影响结果表明，SDS、Tween20、Tween80对该酶有抑制作用，Triton X-100对该酶有增强作用；Mg^2＋、Zn^2＋、K^＋对该酶有抑制作用，Ca^2＋、Mn^2＋和EDTA对该酶有增强作用。; 关键词枯草芽孢杆菌磷脂酰丝氨酸合成酶纯化性质; Keywords Bacillus subtilis Phosphatidylserine synthase Purification Properties; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因工程手段提高磷脂酰丝氨酸合成酶活性的研究: 2; 作者陈梦雪卢欣睿马玉孙明波罗维佳王培琪章朦玥张怡轩; 机构沈阳药科大学生命科学与生物制药学院; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期44-48,共5页; 基金辽宁省大学生创新创业训练计划项目(201210163024); 文摘为了提高目的蛋白磷脂酰丝氨酸合成酶(PSS)的表达,使用rTaq酶从E coli K12总DNA中PCR扩增获得磷脂酰丝氨酸合成酶基因片段,将其重组于高效表达载体pET28b质粒,转入相应表达菌株进行表达,收集菌体超声破碎获得含PSS的粗酶液,使用两相反应体系进行生物转化,HPLC-ELSD手段进行酶活检测。结果显示,重组菌株中PSS的酶活力比对照有所提高,同时获得酶活力提高的突变基因pssE210G。将突变基因重组于更高效的表达载体pBAD-MCS,转入相应宿主菌株表达。结果显示E.coli TOP10(pBAD-MCS-pss)表达的酶活性明显优于E.coli BL21(pET28b-pss)中表达的酶活性。以上实验结果表明,将目的基因重组于高效表达质粒有助于提高酶活力;组合到不同的表达质粒,酶活提高程度不同;磷脂酰丝氨酸合成酶基因第73位氨基酸发生突变,对其酶结构和酶活力有直接的影响。; 关键词磷脂酰丝氨酸合成酶基因重组同源模建突变; Keywords phosphatidyl serine synthase gene recombination homogeneity modeling mutation; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] Q814 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名磷脂酰丝氨酸制备的研究进展被引量：3: 3; 作者孙明波刘天薇王继文张怡轩; 机构沈阳药科大学生物制药教研室沈阳天峰生物制药有限公司; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期80-85,共6页; 文摘磷脂酰丝氨酸具有改善记忆和认知能力、防治老年痴呆症、抑郁症及缓解精神压力等作用,目前在国外被用作营养补充剂广泛应用于保健食品中。着重从提取法和酶转化法2个方面综述了磷脂酰丝氨酸的制备方法,同时通过对国内外磷脂酰丝氨酸消费现状的调查,对其在食品、药品、保健品方面的应用前景进行了展望。; 关键词磷脂酰丝氨酸制备提取磷脂酰丝氨酸合成酶; Keywords phosphatidylserine （PS） preparation extraction PS synthetase; 分类号 Q939.97 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PSS定点突变及酶活研究被引量：2: 4; 作者卢欣睿崔亚顺王培琪罗维佳陈梦雪张怡轩; 机构沈阳药科大学生命科学与生物制药学院; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第6期94-97,共4页; 基金辽宁省大学生创新创业训练计划项目(201210163024); 文摘磷脂酰丝氨酸可在磷脂酰丝氨酸合成酶(PSS)催化下由磷脂酰胆碱和L-丝氨酸生成。通过生物信息学手段对磷脂酰丝氨酸合成酶蛋白质结构进行解析和研究分析,获得2个可突变位点F139和P272,通过Overlap PCR法进行定点突变,测定突变序列,并进行酶活测定。结果显示,PSS位点F139突变为L139、M139,位点P272突变为A272,能提高酶活力,说明蛋白质结构解析结合氨基酸定点突变技术,可以改善重组酶的活力。; 关键词磷脂酰丝氨酸合成酶结构分析定点突变; Keywords phosphatidylserine synthetase structure analysis designated mutation; 分类号 Q545 [生物学—生物化学] R979.9 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两种组成型启动子PermE*和PSau3A在变铅青链霉菌中的启动效果比较: 5; 作者张莹陶欣艺王风清魏东芝; 机构华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所; 出处《化学与生物工程》 CAS 2013年第11期47-50,54,共5页; 文摘红霉素抗性启动子PermE*和来源于链霉菌核基因组片段的PSau3A启动子均属于链霉菌组成型强启动子,分别将它们插入大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pNW-S1的SD序列和转录起始位点之间,构建成两个稳定的组成型表达质粒:pNW-S3和pNW-S4。以磷脂酰丝氨酸合成酶PSS基因为报道基因,以蛋白表达水平评价这两个启动子在变铅青链霉菌TK24中的表达效果。结果表明,在两株组成型表达重组菌中,PSS均得到了高效表达,具有在链霉菌系统中高效表达外源基因的功能,其中PermE*的启动效率略高于PSau3A。; 关键词组成型启动子链霉菌磷脂酰丝氨酸合成酶; Keywords constitutive promoter Streptomyces phosphatidylserine synthase; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组磷脂酰丝氨酸合成酶的分离纯化及酶学性质研究	张业尼路福平李玉王建玲	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基因工程手段提高磷脂酰丝氨酸合成酶活性的研究	陈梦雪卢欣睿马玉孙明波罗维佳王培琪章朦玥张怡轩	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	磷脂酰丝氨酸制备的研究进展	孙明波刘天薇王继文张怡轩	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	PSS定点突变及酶活研究	卢欣睿崔亚顺王培琪罗维佳陈梦雪张怡轩	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	两种组成型启动子PermE*和PSau3A在变铅青链霉菌中的启动效果比较	张莹陶欣艺王风清魏东芝	《化学与生物工程》 CAS	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料