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嗜碱芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶基因启动子的克隆及应用 被引量:2
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作者 陈坤 黎明 +3 位作者 成堃 杜连祥 张同存 路福平 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1513-1520,共8页
利用TAIL-PCR方法从嗜碱芽孢杆菌PB92基因组中扩增出碱性蛋白酶基因上游启动子活性片段,测序分析后登录GenBank(EU130686)。此序列具有多个启动子特征区域,且在-538~-370 bp和-275~-128 bp两个区域存在反向读码框。对启动子片段进行... 利用TAIL-PCR方法从嗜碱芽孢杆菌PB92基因组中扩增出碱性蛋白酶基因上游启动子活性片段,测序分析后登录GenBank(EU130686)。此序列具有多个启动子特征区域,且在-538~-370 bp和-275~-128 bp两个区域存在反向读码框。对启动子片段进行功能缺失的分析结果表明,TSS上游105 bp片段具有明显启动子活性,但以长为414 bp~619 bp时活性更为显著。此外,对PB92碱性蛋白酶的信号肽分析结果表明,此信号肽具有典型分泌型(Sec-type)信号肽结构。将PB92碱性蛋白酶基因启动子和信号肽序列克隆入pBE2,构建成表达载体pBEAC,并以其为载体实现了植物甜蛋白monellin基因在枯草芽孢杆菌1A751中的高效表达。 展开更多
关键词 嗜碱芽孢杆菌PB92 TAIL-PCR 碱性蛋白酶启动子 信号肽
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