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Piezo1通过Cx43半通道调控衰老骨细胞力学响应的作用机制
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作者 赵德志 付嘉悦 +1 位作者 乌佳伟 续惠云 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期311-311,共1页
目的老龄化骨质疏松症与骨细胞感知力学刺激能力的降低密切相关。Piezo1离子通道在骨细胞代谢调控中发挥关键作用,但在老龄骨细胞力学响应中尚未报道。已有研究显示,骨细胞Piezo1的激活介导用于调控骨合成代谢的重要通道Cx43半通道的开... 目的老龄化骨质疏松症与骨细胞感知力学刺激能力的降低密切相关。Piezo1离子通道在骨细胞代谢调控中发挥关键作用,但在老龄骨细胞力学响应中尚未报道。已有研究显示,骨细胞Piezo1的激活介导用于调控骨合成代谢的重要通道Cx43半通道的开放。然而,其相互作用在衰老骨细胞力学响应中的调控机制仍有待研究。方法依托泊苷处理MLO-Y4骨样细胞建立衰老骨细胞模型;通过Yoda1激活骨细胞Piezo1和GAP19抑制骨细胞Cx43半通道功能相结合,研究在16dyn/cm^(2)流体剪切应力刺激下Piezo1与Cx43相互作用对衰老骨细胞力学响应的调控。染料摄取检测Cx43半通道开放能力;碱性磷酸酶染色检测骨细胞条件培养基对MC3T3-E1成骨分化能力的影响;q PCR检测骨代谢基因和成骨细胞分化标志基因表达。结果衰老降低了骨细胞的力学敏感性,Yoda1激活Piezo1没有改变衰老骨细胞半通道功能和骨代谢基因表达。然后,Piezo1的激活可以增强流体剪切力刺激下衰老骨细胞半通道的开放和骨合成代谢基因的表达,并通过条件培养基调节MC3T3-E1的成骨分化。而通过GAP19阻断Cx43半通道抑制了Yoda1引起的骨细胞力学响应。结论Piezo1在调控Cx43半通道功能改善衰老骨细胞力学响应中发挥着重要作用,本研究为老龄化骨质疏松症的治疗与机制探索提供了新的思路。 展开更多
关键词 碱性磷酸酶染色 依托泊苷 骨质疏松症 力学刺激 力学响应 骨细胞 条件培养基 流体剪切力
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低载荷机械振动通过PINK1/Parkin信号通路改善高脂环境下骨质疏松
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作者 杨启帆 朱东 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期248-248,共1页
目的线粒体是细胞供能的主要细胞器,在细胞分化和凋亡中起到重要作用。高脂环境下骨质疏松是一种慢性代谢失衡疾病。本研究主要探究低载荷机械振动(Low magnitude high frequency vibration,LMHFV)能否通过影响线粒体融合与裂变、生物... 目的线粒体是细胞供能的主要细胞器,在细胞分化和凋亡中起到重要作用。高脂环境下骨质疏松是一种慢性代谢失衡疾病。本研究主要探究低载荷机械振动(Low magnitude high frequency vibration,LMHFV)能否通过影响线粒体融合与裂变、生物合成和自噬改善高脂环境下骨质疏松。方法在体外通过棕榈酸模拟体内的高脂环境,振动组施加低载荷机械振动模拟体内骨细胞感受振动的环境。通过WB、免疫荧光、流式细胞仪检测等方法探究高脂环境下及线粒体的形态及功能变化;采用WB、茜素红染色、碱性磷酸酶染色,探究施加低载荷机械振动后,高脂环境下的成骨细胞的成骨分化及增殖能力。结果(1)高脂环境会引起线粒体过度裂变,降低生物合成,抑制成骨细胞增殖和分化;(2)高脂环境下,线粒体自噬被抑制,线粒体与溶酶体过度结合形成自噬小体;(3)LMHFV可以增加线粒体自噬,改善成骨细胞稳态,促进成骨细胞增殖和分化;(4)LMHFV通过激活高脂环境下成骨细胞内抑制的PINK1/Parkin信号通路,促进线粒体稳态,改善骨代谢。结论LMHFV通过PINK1/Parkin信号通路改善高脂环境下骨质疏松。本研究支持LMHFV为改善高脂环境下骨质疏松的有效治疗方式。 展开更多
关键词 线粒体自噬 碱性磷酸酶染色 骨质疏松 成骨细胞 机械振动 信号通路 细胞分化 成骨分化
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黄芪与当归对骨髓干细胞移植治疗糖尿病缺血下肢血管再生的影响 被引量:1
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作者 金可可 陈雷 沈斌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2058-2058,共1页
关键词 下肢血管 糖尿病大鼠 骨髓干细胞 体外培养 血流灌注量 血管密度 碱性磷酸酶染色 缺血肢体 协同作用
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高压液相纯化小鼠单克隆抗体及其在免疫学中应用 被引量:1
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作者 金伯泉 刘雪松 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期37-39,共3页
本文采用Deschamps方法加以修改,40%饱和硫酸铵沉淀小鼠腹水中免疫球蛋白,然后用TSK-DEAE 5PW高压液相离子交换层析柱,应用线性梯度洗脱条件,纯化TLiSAl IgG1单克隆抗体,回收率为50~60%、纯度>90%。纯化后的单克隆抗体在荧光细... 本文采用Deschamps方法加以修改,40%饱和硫酸铵沉淀小鼠腹水中免疫球蛋白,然后用TSK-DEAE 5PW高压液相离子交换层析柱,应用线性梯度洗脱条件,纯化TLiSAl IgG1单克隆抗体,回收率为50~60%、纯度>90%。纯化后的单克隆抗体在荧光细胞激活分类仪分析、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶染色、^(125)I标记单抗进行竞争结合试验、功能性实验以及制备Sephorose CL-4B亲和层析柱纯化相应抗原进行氨基酸列序分析中均显示良好的生物学活性。 展开更多
关键词 高压液相 鼠单克隆抗体 免疫学 碱性磷酸酶染色 免疫球蛋白 生物学活性 离子交换 洗脱条件 IGG1 细胞激活 结合试验 标记单抗 回收率 功能性 氨基酸 柱纯化
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富血小板血浆联合钙化诱导方法对骨髓间充质干细胞增殖和诱导成骨的影响
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作者 孙晓雷 马信龙 +5 位作者 马剑雄 张弢 王志刚 张园 张华峰 王涛 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第S1期90-91,共2页
关键词 诱导成骨 诱导方法 富血小板血浆 碱性磷酸酶染色 钙化 骨髓间充质干细胞 地塞米松 细胞增殖 甘油磷酸 诱导培养
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中性脂肪沉积症伴肌病患者的外周血细胞形态特点并文献复习
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作者 邢莹 普程伟 +1 位作者 尚柯 屈晨雪 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2022年第24期3065-3069,共5页
背景中性脂肪沉积症伴肌病(NLSDM)起病隐匿、症状缺乏特异性,由于患者临床表现不同,可能就诊于神经科、心血管疾病科等多个科室,容易导致漏诊和误诊。其明确诊断有赖于基因检测,但多数患者由于不能及时明确诊断而延误治疗。此类患者外... 背景中性脂肪沉积症伴肌病(NLSDM)起病隐匿、症状缺乏特异性,由于患者临床表现不同,可能就诊于神经科、心血管疾病科等多个科室,容易导致漏诊和误诊。其明确诊断有赖于基因检测,但多数患者由于不能及时明确诊断而延误治疗。此类患者外周血白细胞具有典型的形态学特征,可提示临床医生及时完善基因检测以明确诊断。目的探讨NLSDM患者的外周血细胞形态特点。方法选取2021年6—8月北京大学第一医院收治的3例NLSDM患者为研究对象,收集患者外周血并制备血涂片,分别采用瑞-姬氏染色、中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)、髓过氧化物酶染色(MPO)和糖原染色(PAS)观察血细胞形态特点。结果瑞-姬氏染色:中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞及单核细胞胞质中均可见数个大小不一的圆形空泡。NAP染色:NLSDM患者的中性粒细胞胞质中呈阴性反应,与正常人和感染患者差异明显,感染患者阳性率和积分值均明显增高;MPO染色:NLSDM患者的中性粒细胞胞质中呈阳性反应,与正常人的中性粒细胞阳性程度接近,但弱于感染患者(阳性颗粒粗大并覆盖在细胞核上,导致细胞核结构不清);PAS:NLSDM患者、正常人及感染患者的中性粒细胞阳性反应程度均未见明显差异。结论NLSDM患者外周血多种白细胞胞质中均可见大小不等的空泡,而中性粒细胞空泡与感染时的中毒性改变不同,通过NAP可对其初步鉴别,这种形态学异常是NLSDM的特征性改变。 展开更多
关键词 脂质贮积病 中性脂肪沉积症伴肌病 中性粒细胞中毒性改变 中性粒细胞碱性磷酸酶染色
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内毒素性休克早期猕猴肾脏超微结构的改变及酶细胞化学观察
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作者 季红 朱晓云 殷国庆 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期655-659,F0005,共6页
目的:探讨内毒素休克早期猕猴肾脏的损伤。方法:11只猕猴随机分成2组:对照组5只,静脉注射生理盐水;内毒素组6只,静脉注射LPS,剂量为2.8mg/kg。内毒素攻击后120min,处死动物,取肾脏标本采用光镜、电镜铅离子捕获法做超微结构碱性磷酸酶(A... 目的:探讨内毒素休克早期猕猴肾脏的损伤。方法:11只猕猴随机分成2组:对照组5只,静脉注射生理盐水;内毒素组6只,静脉注射LPS,剂量为2.8mg/kg。内毒素攻击后120min,处死动物,取肾脏标本采用光镜、电镜铅离子捕获法做超微结构碱性磷酸酶(ALPase)及酸性磷酸酶(ACPase)细胞化学检查。结果:组织学观察显示肾髓质、皮质结构完整,肾小球结构完好;透射电镜可见模型组肾小球血管内皮和足突细胞损伤、血液成分渗出;肾小管上皮细胞损伤。肾实质细胞内溶酶体破坏;电镜酶细胞化学可见:模型组酸性磷酸酶活性增强,溶酶体颗粒增多。肾小管上皮细胞碱性磷酸酶活性急剧增强,在细胞器内弥散分布。对照组无明显病变。结论:在猕猴内毒素性休克早期,溶酶体增多和损伤引起了肾小球和肾小管损伤。在此同时,肾脏实质细胞内中和内毒素的作用也增强。 展开更多
关键词 内毒素性休克 猕猴 肾脏 超微结构 酸性磷酸酶染色 碱性磷酸酶染色
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17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物家族的作用
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作者 黄秋霞 周后德 +1 位作者 廖二元 杜巍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期140-145,共6页
目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van ... 目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van Gieson行Ⅰ型胶原染色、钙钴法行碱性磷酸酶染色、茜素红行钙化结节染色进行成骨细胞鉴定。用半定量RT-PCR检测细胞IRS-1、- 2、-3 mRNA表达量。结果分离和培养的细胞具有正常人成骨细胞的形态,能分泌Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶并形成钙化结节。17β-雌二醇和/或孕酮均不影响人成骨细胞和MG-63细胞IRS-1mRNA 的表达(P>0.05),可诱导人成骨细胞和MG-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调(P<0.05),IRS- 3 mRNA的表达下调(P<0.05)。二者联合干预时作用明显加强(P<0.01)。结论 17β-雌二醇和孕酮均不影响IRS-1 mRNA的表达,但可使人成骨细胞和MC-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调, IRS-3mRNA的表达下调,二者联合干预具有正性协同效应。不同的IRS家族成员对同一细胞具有效应的多样性。 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 胰岛素受体底物 人成骨细胞 孕酮 MG-63细胞 receptor IRS-1 碱性磷酸酶染色 mRNA表达量 IRS-2 钙化结节 表达上调 表达下调 人成骨肉瘤 PCR检测 培养的细胞 作用机制 骨折病人 胶原染色 细胞鉴定 Ⅰ型胶原
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不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质功能区的微血管形态计量学分析
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作者 郭民 郭永昌 +3 位作者 张瑞虎 张引红 王海龙 陈朝阳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期1-6,共6页
目的 观察不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区的微血管构筑,并进行定量分析。方法 采用改良碱性磷酸酶染色法染色C57BL/6小鼠大脑皮质运动皮质区(初级运动皮层、次级运动皮层)、感觉皮质区(初级体感皮层、次级体感皮层)、视觉皮质区... 目的 观察不同月龄C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区的微血管构筑,并进行定量分析。方法 采用改良碱性磷酸酶染色法染色C57BL/6小鼠大脑皮质运动皮质区(初级运动皮层、次级运动皮层)、感觉皮质区(初级体感皮层、次级体感皮层)、视觉皮质区(初级视觉皮层、次级视觉皮层)、听觉皮质区(初级听觉皮层、次级听觉皮层)、嗅觉皮质区(外嗅皮层、内嗅皮层)的微血管形态,OLMPUS BX51显微镜结合Image-Pro Plus 5.1进行图像捕获,采用Image-Pro Plus 5.1软件进行微血管长度密度(mlcrovascular length density, Lv)、微血管表面积密度(microvascular surface area density, Sv)、微血管体积密度(microvascular volume density, Vv)的定量分析。结果 碱性磷酸酶在成年组和老年组的大脑皮质微血管内表达丰富,在幼年组略有表达,而在乳鼠组无表达;软脑膜血管进入皮质的方式分T字形、Y字形、大弧形和小弧形四种;相同年龄不同部位的Lv、Sv和Vv显示运动皮质区、感觉皮质区、视觉皮质区、听觉皮质区、嗅觉皮质区呈现下降趋势,且运动皮质区和感觉皮质区与嗅觉皮质区比较Lv、Sv、Vv微血管密度有统计学意义(P<0.05)。老年组的各功能区血管密度均较成年组降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论 C57BL/6小鼠大脑皮质不同功能区微血管内碱性磷酸酶的表达随年龄增长而增多,成年时达到峰值,其脑内微血管构筑为脑血管疾病及模型制备提供形态学参数。 展开更多
关键词 碱性磷酸酶染色 C57BL/6小鼠 大脑皮质 微血管构筑
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牙髓淋巴管微细构筑的研究进展
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作者 张壁 东耀峻 《国外医学(口腔医学分册)》 2001年第5期290-292,共3页
器官组织内淋巴管的构筑和分布特点,与多种微循环障碍、感染性疾病及癌症的发生、发展具有重要的关联,牙髓中淋巴管的存在与否曾有过争议。本文综述了牙髓淋巴管微细结构研究的现状,并着重介绍了酶组织化学双重染色法(5′-Nase-APlase)... 器官组织内淋巴管的构筑和分布特点,与多种微循环障碍、感染性疾病及癌症的发生、发展具有重要的关联,牙髓中淋巴管的存在与否曾有过争议。本文综述了牙髓淋巴管微细结构研究的现状,并着重介绍了酶组织化学双重染色法(5′-Nase-APlase),对牙髓淋巴管构筑和微细分布的研究。 展开更多
关键词 牙髓 淋巴管 酶组织化学法 5'-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色 微细结构
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