K_(88)抗原纯化中硫酸铵沉淀法的改进 被引量：5

1

作者 汪建华 唱韶红 熊凌霜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期310-311,共2页

硫酸铵沉淀法是一种用于蛋白质提纯的盐析方法 ,具有成本低、操作简单、对被分离物可保存其生物活性等优点而被广泛使用。我们在大肠杆菌菌毛蛋白K88纯化中采用硫酸铵沉淀法进行蛋白质粗提。

关键词 纯化 硫酸铵沉淀法 K88抗原 仔猪黄痢 蛋白质

在线阅读 下载PDF 职称材料

过硫酸铵氧化沉淀法富集净化钴渣中钴的试验研究 被引量：5

2

作者 刘玉芹 《中国有色冶金》 CAS 北大核心 2021年第1期24-27,共4页

某公司生产初期采用α-亚硝基-β-萘酚除钴工艺回收湿法炼锌净化钴渣中的钴,存在药剂消耗量大、钴渣含钴低、生产亏损的问题,后采用过硫酸铵氧化沉淀法富集钴,形成了一种钴的富集倍数高,成本低、流程短、易操作、环保的净化渣回收钴的... 某公司生产初期采用α-亚硝基-β-萘酚除钴工艺回收湿法炼锌净化钴渣中的钴,存在药剂消耗量大、钴渣含钴低、生产亏损的问题,后采用过硫酸铵氧化沉淀法富集钴,形成了一种钴的富集倍数高,成本低、流程短、易操作、环保的净化渣回收钴的实用方法。该方法分三个阶段:酸浸阶段包括稀酸选择性浸出和逆流酸性浸出,在较优工艺参数下,钴的浸出率达到95.8%;氧化除铁阶段在较优工艺参数下,滤液Fe含量小于80 mg/L;氧化沉钴阶段可得到含钴20%,锌18%~20%的沉钴渣,将沉钴渣用酸性水洗涤后,可得到含锌小于10%、含钴大于30%的富钴渣,可作为钴精矿销售。该工艺可为从湿法炼锌净化渣综合回收有价金属、富集钴提供参考。 展开更多

关键词 湿法炼锌 净化钴渣 富集钴 过硫酸铵氧化沉淀法 酸浸 氧化除铁 氧化沉钴

在线阅读 下载PDF 职称材料

蘑菇中多酚氧化酶的酶学特性研究 被引量：40

3

作者 赵东海 张建平 侯菊花 《食品与机械》 CSCD 2004年第5期12-13,17,共3页

采用二次丙酮法与 75 %硫酸铵沉淀法从蘑菇 (Agaricusbisporus)中提取多酚氧化酶 ;用分光光度法对蘑菇中多酚氧化酶酶学特性进行了较为系统的研究。结果表明 :二次丙酮法优于 75 %硫酸铵沉淀法 ;以邻苯二酚为底物 ,多酚氧化酶的最适pH为... 采用二次丙酮法与 75 %硫酸铵沉淀法从蘑菇 (Agaricusbisporus)中提取多酚氧化酶 ;用分光光度法对蘑菇中多酚氧化酶酶学特性进行了较为系统的研究。结果表明 :二次丙酮法优于 75 %硫酸铵沉淀法 ;以邻苯二酚为底物 ,多酚氧化酶的最适pH为 7.0 ,最适温度为 30℃ ;亚硫酸钠、半胱氨酸、抗坏血酸为强抑制剂。 展开更多

关键词 蘑菇 多酚氧化酶 酶学特性 最适温度 最适PH 亚硫酸钠 抗坏血酸 硫酸铵沉淀法 底物 半胱氨酸

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛乳清蛋白中β-乳球蛋白的分离纯化 被引量：8

4

作者 吴凤 王志耕 +1 位作者 王子龙 董娟娟 《包装与食品机械》 CAS 2008年第4期32-33,40,共3页

结合硫酸铵分段盐析和凝胶层析两种方法,从牛乳乳清蛋白中分离、提纯出β-乳球蛋白。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白成分,结果显示:①在20%～30%、70%～80%盐析段只有两条带,分别是β-乳球蛋白和α-乳清白蛋白带,得到较纯的蛋白;... 结合硫酸铵分段盐析和凝胶层析两种方法,从牛乳乳清蛋白中分离、提纯出β-乳球蛋白。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白成分,结果显示:①在20%～30%、70%～80%盐析段只有两条带,分别是β-乳球蛋白和α-乳清白蛋白带,得到较纯的蛋白;②再用SephadexG-50凝胶过滤层析,电泳结果显示只有一条带,并与标准β-乳球蛋白带一致,得到较纯的β-乳球蛋白。 展开更多

关键词 Β-乳球蛋白 提纯 硫酸铵沉淀法 凝胶过滤层析

在线阅读 下载PDF 职称材料

DEN2重组E蛋白单克隆抗体的制备及其生物学活性 被引量：2

5

作者 曾祥凤 江丽芳 +3 位作者 方丹云 汤云霞 魏惠永 晏辉钧 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期56-60,共5页

[目的]研制登革病毒E蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其各种生物学特性.[方法]用纯化的Pichia pastoris酵母表达的DEN2重组E蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,采用传统的细胞融合、有限稀释法克隆化杂交瘤细胞,制备稳定分泌McAbs的细胞株.采用硫... [目的]研制登革病毒E蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其各种生物学特性.[方法]用纯化的Pichia pastoris酵母表达的DEN2重组E蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,采用传统的细胞融合、有限稀释法克隆化杂交瘤细胞,制备稳定分泌McAbs的细胞株.采用硫酸铵沉淀法纯化腹水中的McAbs,用ELISA、IFA、Western Blot和空斑减数中和实验等鉴定McAbs的各种生物学活性.[结果]用ELISA、IFA检测证实5株杂交瘤细胞产生的McAbs与DEN2重组E蛋白和DEN全病毒均有较高的亲和力;Western Blot分析发现其中3株杂交瘤细胞(3G3,6G11,4E3)分泌的McAbs能与其相对分子质量Mr=(66～69)×103的DEN2重组E蛋白结合.空斑减数中和实验证实所获得的单克隆抗体具有中和登革病毒感染C6/36细胞的作用.[结论]成功地制备了5株抗登革病毒E蛋白特异性的McAbs,为进一步研究E蛋白的结构和功能及临床诊断试剂盒研发打下了基础. 展开更多

关键词 E蛋白 DEN 单克隆抗体 生物学活性 登革病毒 ELISA 分泌 杂交瘤细胞 硫酸铵沉淀法 纯化

在线阅读 下载PDF 职称材料

苍白杆菌SY286抑菌活性蛋白稳定性分析 被引量：4

6

作者 安福涛 谢瑾卉 +3 位作者 林英 于舒怡 臧超群 梁春浩 《湖北农业科学》 2021年第8期94-97,共4页

利用饱和硫酸铵沉淀法从苍白杆菌(Ochrobactrum sp.)SY286发酵滤液中提取抑菌活性蛋白,通过温度、酸碱度、紫外线以及蛋白酶对活性物质的影响,测定活性物质的稳定性。结果表明,经60%饱和硫酸铵溶液盐析出的活性蛋白对葡萄霜霉病菌的抑... 利用饱和硫酸铵沉淀法从苍白杆菌(Ochrobactrum sp.)SY286发酵滤液中提取抑菌活性蛋白,通过温度、酸碱度、紫外线以及蛋白酶对活性物质的影响,测定活性物质的稳定性。结果表明,经60%饱和硫酸铵溶液盐析出的活性蛋白对葡萄霜霉病菌的抑菌活性最强,抑制率达81.98%。温度、酸碱度以及紫外线对抑菌粗提蛋白的活性均有一定影响。抑菌粗提蛋白在50℃以下和pH 4~10条件下抑菌活性相对稳定。抑菌粗提蛋白的抑菌活性受蛋白酶的影响较大,蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶均对其活性具有较大影响。 展开更多

关键词 苍白杆菌 抑菌活性蛋白 饱和硫酸铵沉淀法 稳定性分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸭血清转铁蛋白的分离纯化 被引量：1

7

作者 秦晓蓉 易德莲 +3 位作者 张铭金 伍林 熊丹 王立立 《膜科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期31-34,39,共5页

用硫酸铵沉淀、火棉胶透析去盐，再经固定化金属螯合亲和色谱柱层析，经洗脱液（0．1mol／L氯化钠和20mmol／L咪唑）洗脱，火棉胶透析去盐得纯化的鸭血清转铁蛋白．鸭血清转铁蛋白在固定化铜离子亲和膜层析柱上的吸附率达到80％以上．... 用硫酸铵沉淀、火棉胶透析去盐，再经固定化金属螯合亲和色谱柱层析，经洗脱液（0．1mol／L氯化钠和20mmol／L咪唑）洗脱，火棉胶透析去盐得纯化的鸭血清转铁蛋白．鸭血清转铁蛋白在固定化铜离子亲和膜层析柱上的吸附率达到80％以上．考察了上样速度、pH值、温度对鸭血清转铁蛋白吸附率的影响．最佳操作条件为：上样速度为0．5～0．8mL／min、pH值控制在7～8、操作温度为室温，用硫酸铵沉淀法及固定化金属螯合亲和色谱法，能获得光谱纯的鸭血清转铁蛋白． 展开更多

关键词 鸭血清 转铁蛋白 固定化铜离子亲和膜色谱 硫酸铵沉淀法

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪血清免疫球蛋白IgG的分离纯化及抗大肠杆菌作用 被引量：3

8

作者 孟腾飞 韩愈杰 +2 位作者 王敬 魏萌 吴国江 《饲料工业》 北大核心 2015年第7期34-37,共4页

试验旨在从猪血清中分离纯化得到纯度较高的免疫球蛋白Ig G。试验采用硫酸铵分步沉淀法从猪血清中粗提猪血清免疫球蛋白,经DEAE52凝胶柱进行纯化,将纯化得到的免疫球蛋白进行SDS-PAGE电泳检测,并通过紫外分光光度计法测定其含量。试验... 试验旨在从猪血清中分离纯化得到纯度较高的免疫球蛋白Ig G。试验采用硫酸铵分步沉淀法从猪血清中粗提猪血清免疫球蛋白,经DEAE52凝胶柱进行纯化,将纯化得到的免疫球蛋白进行SDS-PAGE电泳检测,并通过紫外分光光度计法测定其含量。试验结果显示,粗提可以得到免疫球蛋白Ig G,纯化后的lg G经SDS-PAGE电泳检测,检测出两条带,分别为Ig G的重链和轻链,分子量分别为56.72 k D和26.58 k D,通过紫外分光光度计法测得的Ig G浓度为2.577 mg/ml。结果提示,从猪血清中能分离纯化到免疫球蛋白Ig G,为实际工艺化生产提供理论依据。 展开更多

关键词 免疫球蛋白 硫酸铵沉淀法 DEAE52凝胶柱 SDS-PAGE电泳

在线阅读 下载PDF 职称材料

脱盐牛乳乳清粉中β-乳球蛋白的分离纯化 被引量：1

9

作者 杨章昀 冯郑珂 潘家荣 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期10-12,20,共4页

结合硫酸铵分级盐析、阴离子交换层析和葡聚糖凝胶层析三种方法,从牛乳乳清蛋白中分离、提纯出β-乳球蛋白。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白成分,结果显示:1在质量分数为75%盐析段与其他成分相比含有较多的β-乳球蛋白;2用阴离子... 结合硫酸铵分级盐析、阴离子交换层析和葡聚糖凝胶层析三种方法,从牛乳乳清蛋白中分离、提纯出β-乳球蛋白。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白成分,结果显示:1在质量分数为75%盐析段与其他成分相比含有较多的β-乳球蛋白;2用阴离子交换层析进行进一步的分离,经过两次的阴离子交换层析可得到较高纯度的β-乳球蛋白;3再用Sephadex G-10凝胶层析,电泳结果显示只有一条带,并与β-乳球蛋白标准品(纯度95%)带一致,得到高纯度的β-乳球蛋白。 展开更多

关键词 Β-乳球蛋白 提纯 硫酸铵沉淀法 阴离子交换 凝胶过滤层析

在线阅读 下载PDF 职称材料

一步法提取鸭血清转铁蛋白 被引量：3

10

作者 秦晓蓉 伍林 +3 位作者 易德莲 张铭金 魏飞 王立立 《武汉科技大学学报》 CAS 2006年第6期614-617,共4页

一步法提取鸭血清转铁蛋白是利用热变性沉淀去除鸭血清中的杂蛋白,在微碱性(pH值为8.0)条件下,75℃保温25 m in,转铁蛋白的纯化倍数为1.11,收率为96%,而硫酸铵分级沉淀法的纯化倍数为1.03,收率为51%。一步法与硫酸铵分级沉淀法相比,方... 一步法提取鸭血清转铁蛋白是利用热变性沉淀去除鸭血清中的杂蛋白,在微碱性(pH值为8.0)条件下,75℃保温25 m in,转铁蛋白的纯化倍数为1.11,收率为96%,而硫酸铵分级沉淀法的纯化倍数为1.03,收率为51%。一步法与硫酸铵分级沉淀法相比,方法简单,成本低廉,适宜工业化生产。 展开更多

关键词 鸭血清 转铁蛋白 热变性沉淀法 硫酸铵分级沉淀法

在线阅读 下载PDF 职称材料

茶多酚氧化酶酶学性质研究

11

《中国茶叶》 2008年第6期42-42,共1页

采用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH=5．6）匀浆浸提法和硫酸铵沉淀法，从茶鲜叶中提取多酚氧化酶，并通过分光光度法研究pH、温度、抑制剂对酶活性的影响。结果表明，提取条件为以邻苯二酚为底物，茶多酚氧化酶PPO的最适pH为5．6，最适... 采用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH=5．6）匀浆浸提法和硫酸铵沉淀法，从茶鲜叶中提取多酚氧化酶，并通过分光光度法研究pH、温度、抑制剂对酶活性的影响。结果表明，提取条件为以邻苯二酚为底物，茶多酚氧化酶PPO的最适pH为5．6，最适温度为50℃,亚硫酸钠、半胱氨酸和Vc为PPO的抑制剂。 展开更多

关键词 茶多酚氧化酶 酶学性质 硫酸铵沉淀法 提取条件 最适PH 最适温度 磷酸氢二钠 分光光度法

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗猪流行性腹泻病毒变异株卵黄抗体的制备、纯化及其活性影响因素的研究 被引量：7

12

作者 雷丹 李安琪 +3 位作者 罗素贤 叶昱 宋德平 唐玉新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第8期2293-2302,共10页

为制备抗猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异株卵黄抗体并探索卵黄抗体的纯化方法,本试验采用灭活的PEDV变异株CH/JX01全病毒免疫蛋鸡,收集免疫后所产的鸡蛋,分别用水稀释法、PEG-6000法和水稀释-硫酸铵二次... 为制备抗猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异株卵黄抗体并探索卵黄抗体的纯化方法,本试验采用灭活的PEDV变异株CH/JX01全病毒免疫蛋鸡,收集免疫后所产的鸡蛋,分别用水稀释法、PEG-6000法和水稀释-硫酸铵二次沉淀法对鸡蛋中IgY进行提纯,然后运用间接ELISA和Western blotting方法鉴定和比较3种方法的提纯效果,获得可用于规模化生产的提纯方法;同时研究不同温度、pH条件下抗体活性,寻找对提纯IgY活性具有保护作用的物质。结果显示,本试验成功制备了抗PEDV变异株的卵黄抗体。浓度检测结果表明,水稀释法提取的IgY浓度最高,为6.204mg/mL;PEG-6000方法提纯的IgY浓度次之,为4.673mg/mL;水稀释-硫酸铵二次沉淀法IgY浓度最低,为3.359mg/mL。间接ELISA检测结果表明,水稀释-硫酸铵二次沉淀法提纯的IgY效价最高,为1∶12 800;其次是PEG-6000,为1∶6 400;而水稀释法最低,为1∶1 600。综合3种方法所提纯的卵黄抗体浓度与效价,发现水稀释-硫酸铵二次沉淀法的提纯效果优于其他两种方法。活性影响因素试验结果表明,提纯的IgY在37~60℃活性稳定;pH为4.0~11.0时具有良好的活性;在酸性条件下,20%硫糖铝对IgY活性具有较好的保护作用。本试验结果将为卵黄抗体的大规模生产运用与储存提供了有效的参考依据。 展开更多

关键词 卵黄抗体 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 水稀释法 PEG-6000法 水稀释-硫酸铵二次沉淀法 活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

产碱假单胞菌精氨酸脱亚胺酶的纯化

13

作者 操凤 刘雪冰 曹献英 《热带生物学报》 2015年第4期491-496,共6页

提取精氨酸脱亚胺酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀法初步分离精氨酸脱亚胺酶,然后通过DEAESephadex A 50柱色谱层析和Sephadex G-100柱色谱层析进一步分离纯化精氨酸脱亚胺酶,并利用SDS-PAGE电泳法来鉴定其纯度,最终达到纯化产碱假单胞菌... 提取精氨酸脱亚胺酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀法初步分离精氨酸脱亚胺酶,然后通过DEAESephadex A 50柱色谱层析和Sephadex G-100柱色谱层析进一步分离纯化精氨酸脱亚胺酶,并利用SDS-PAGE电泳法来鉴定其纯度,最终达到纯化产碱假单胞菌来源的精氨酸脱亚胺酶(ADI)的目的。结果表明:分离纯化过程中,粗酶液的总酶活为424.43 U,比酶活为0.42 U·mg^(-1);盐析透析酶液的总酶活是222.10 U,比酶活为2.05 U·mg^(-1);离子交换分析活性部位的总酶活为105.83 U,比酶活是5.61 U·mg^(-1);凝胶渗透分析活性部位的总酶活为17.94 U,比酶活为11.80 U·mg^(-1)。纯化得到了电泳纯级别的ADI,其相对纯度为96%。因此,本研究方法可以得到较高纯度和酶活的精氨酸脱亚胺酶。 展开更多

关键词 精氨酸脱亚胺酶 分离纯化 硫酸铵分级沉淀法 柱色谱层析

在线阅读 下载PDF 职称材料