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硫氧还蛋白-1高表达的幽门螺杆菌慢性感染蒙古沙土鼠模型的建立与评价
被引量:
5
1
作者
张贺军
刘琳娜
+2 位作者
张超
石岩岩
丁士刚
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期766-770,共5页
目的:建立硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因高表达的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)慢性感染蒙古沙土鼠模型,评价Trx1在Hp长期定植导致胃黏膜的病变及其致癌性中的作用。方法:健康雄性蒙古沙土鼠75只,随机分为3组:Trx1高表达H...
目的:建立硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因高表达的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)慢性感染蒙古沙土鼠模型,评价Trx1在Hp长期定植导致胃黏膜的病变及其致癌性中的作用。方法:健康雄性蒙古沙土鼠75只,随机分为3组:Trx1高表达Hp组(30只),Trx1低表达Hp组(30只)和对照组(15只)。分别采用Trx1高表达和低表达Hp菌株灌胃,建立Hp长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型。在接种Hp后第4、20、34、48、70和90周分批处死动物,行快速尿素酶实验和Warthin-Starry银染判定Hp定植情况,HE染色观察胃黏膜病理改变。结果:(1)成功建立了Trx1高表达和低表达Hp长期感染蒙古沙土鼠腺胃的动物模型。(2)Trx1高表达和低表达Hp组胃黏膜病变随时间延长而逐渐加重,Trx1高表达Hp组出现黏膜不平及结节性病变的时间分别为第20周和第34周,早于Trx1低表达Hp组(分别为第48周和第70周);Trx1高表达Hp组从第48周起观察到黏膜糜烂(3只),而Trx1低表达Hp组和对照组在整个实验过程中均未见明显的黏膜糜烂改变。Trx1高表达Hp组出现病变的时间和病变范围明显早于/重于Trx1低表达Hp组。(3)Trx1高表达Hp组在接种后第34周可观察到上皮细胞的轻度异型增生,明显早于Trx1低表达Hp组(第48周)。第90周,Trx1高表达Hp组有71.4%(5/7)、Trx1低表达Hp组有42.8%(3/7)检出管状腺癌(P=0.592),均为早期癌,且Trx1高表达Hp组有1例为黏膜下癌,此外,Trx1高表达Hp组还观察到2例上皮细胞重度异型增生(28.6%,2/7),而在Trx1低表达Hp组仅观察到3例上皮细胞中度异型增生(42.8%,3/7)。结论:Trx1高表达和低表达的Hp可稳定定植于蒙古沙土鼠腺胃,出现类似于人感染Hp后出现的各种病理变化,并诱发腺癌的发生;Trx1高表达Hp组胃黏膜病变明显重于Trx1低表达Hp组,Trx1可能是我国人群Hp致病及致癌的毒力因子。
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关键词
硫氧还蛋白质类
螺杆菌
幽门
胃肿瘤
模型
动物
沙鼠亚科
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职称材料
幽门螺杆菌硫氧还蛋白-1基因克隆及其重组蛋白表达与活性测定
被引量:
2
2
作者
石岩岩
丁士刚
+3 位作者
张婷
鲁凤民
张静
王晔
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期190-194,共5页
目的:克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因,构建含有该目的基因的原核细胞表达载体,表达纯化该蛋白,并检测该蛋白活性。方法:以Hp国际标准菌株26695的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引...
目的:克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因,构建含有该目的基因的原核细胞表达载体,表达纯化该蛋白,并检测该蛋白活性。方法:以Hp国际标准菌株26695的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引物,用逆转录PCR的方法扩增Hp Trx1的cDNA,连接至pEASY-T1载体构建成pEASY-T1-Hp Trx1。对pEASY-T1-Hp Trx1进行双酶切后将目的片段连接至pET-30a,形成pET-30a-Hp Trx1重组质粒,并在大肠杆菌BL21 plys S中进行表达。应用镍柱亲和层析纯化重组的Hp Trx1蛋白,并检测其二硫键还原酶的活性。结果:测序结果显示Hp Trx1 cDNA成功连入pET-30a质粒,且与GenBank(HP0824)完全一致。含质粒pET-30a-Hp Trx1的大肠杆菌BL21 plys S成功表达出Hp Trx1蛋白,活性检测显示重组Hp Trx1蛋白具有二硫键还原酶的活性。结论:成功构建原核表达载体pET-30a-Hp Trx1,并表达、纯化出有活性的Hp Trx1蛋白,为进一步研究Hp Trx1的生物学活性及其对肿瘤发生的作用机制奠定了基础。
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关键词
幽门螺杆菌
硫氧还蛋白质类
重组
蛋白质
类
遗传载体
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职称材料
自发性脑出血患者急性期的影响预后因素及临床评分
被引量:
12
3
作者
张运周
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2016年第6期561-563,共3页
自发性脑出血(spontaneous intracerebral hemorrhage,SICH)在脑卒中各亚型的发病率仅次于缺血性脑卒中。在西方国家中,脑出血约占所有脑卒中的15%,占所有住院脑卒中患者的10%~30%,我国的比例高达18.8%~47.6%[1]。2015年,
关键词
脑出血
高血糖症
低
蛋白
血症
硫氧还蛋白质类
预后
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职称材料
题名
硫氧还蛋白-1高表达的幽门螺杆菌慢性感染蒙古沙土鼠模型的建立与评价
被引量:
5
1
作者
张贺军
刘琳娜
张超
石岩岩
丁士刚
机构
北京大学第三医院消化科
华北理工大学附属医院消化内科
出处
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期766-770,共5页
基金
国家自然科学基金(30770980、81270475)资助~~
文摘
目的:建立硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因高表达的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)慢性感染蒙古沙土鼠模型,评价Trx1在Hp长期定植导致胃黏膜的病变及其致癌性中的作用。方法:健康雄性蒙古沙土鼠75只,随机分为3组:Trx1高表达Hp组(30只),Trx1低表达Hp组(30只)和对照组(15只)。分别采用Trx1高表达和低表达Hp菌株灌胃,建立Hp长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型。在接种Hp后第4、20、34、48、70和90周分批处死动物,行快速尿素酶实验和Warthin-Starry银染判定Hp定植情况,HE染色观察胃黏膜病理改变。结果:(1)成功建立了Trx1高表达和低表达Hp长期感染蒙古沙土鼠腺胃的动物模型。(2)Trx1高表达和低表达Hp组胃黏膜病变随时间延长而逐渐加重,Trx1高表达Hp组出现黏膜不平及结节性病变的时间分别为第20周和第34周,早于Trx1低表达Hp组(分别为第48周和第70周);Trx1高表达Hp组从第48周起观察到黏膜糜烂(3只),而Trx1低表达Hp组和对照组在整个实验过程中均未见明显的黏膜糜烂改变。Trx1高表达Hp组出现病变的时间和病变范围明显早于/重于Trx1低表达Hp组。(3)Trx1高表达Hp组在接种后第34周可观察到上皮细胞的轻度异型增生,明显早于Trx1低表达Hp组(第48周)。第90周,Trx1高表达Hp组有71.4%(5/7)、Trx1低表达Hp组有42.8%(3/7)检出管状腺癌(P=0.592),均为早期癌,且Trx1高表达Hp组有1例为黏膜下癌,此外,Trx1高表达Hp组还观察到2例上皮细胞重度异型增生(28.6%,2/7),而在Trx1低表达Hp组仅观察到3例上皮细胞中度异型增生(42.8%,3/7)。结论:Trx1高表达和低表达的Hp可稳定定植于蒙古沙土鼠腺胃,出现类似于人感染Hp后出现的各种病理变化,并诱发腺癌的发生;Trx1高表达Hp组胃黏膜病变明显重于Trx1低表达Hp组,Trx1可能是我国人群Hp致病及致癌的毒力因子。
关键词
硫氧还蛋白质类
螺杆菌
幽门
胃肿瘤
模型
动物
沙鼠亚科
Keywords
Thioredoxins
Helicobacter pylori
Stomach neoplasms
Models
animal
Gerbillinae
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
幽门螺杆菌硫氧还蛋白-1基因克隆及其重组蛋白表达与活性测定
被引量:
2
2
作者
石岩岩
丁士刚
张婷
鲁凤民
张静
王晔
机构
北京大学第三医院消化科
北京大学基础医学院病原生物学系
出处
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期190-194,共5页
基金
国家自然科学基金(81270475)资助~~
文摘
目的:克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因,构建含有该目的基因的原核细胞表达载体,表达纯化该蛋白,并检测该蛋白活性。方法:以Hp国际标准菌株26695的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引物,用逆转录PCR的方法扩增Hp Trx1的cDNA,连接至pEASY-T1载体构建成pEASY-T1-Hp Trx1。对pEASY-T1-Hp Trx1进行双酶切后将目的片段连接至pET-30a,形成pET-30a-Hp Trx1重组质粒,并在大肠杆菌BL21 plys S中进行表达。应用镍柱亲和层析纯化重组的Hp Trx1蛋白,并检测其二硫键还原酶的活性。结果:测序结果显示Hp Trx1 cDNA成功连入pET-30a质粒,且与GenBank(HP0824)完全一致。含质粒pET-30a-Hp Trx1的大肠杆菌BL21 plys S成功表达出Hp Trx1蛋白,活性检测显示重组Hp Trx1蛋白具有二硫键还原酶的活性。结论:成功构建原核表达载体pET-30a-Hp Trx1,并表达、纯化出有活性的Hp Trx1蛋白,为进一步研究Hp Trx1的生物学活性及其对肿瘤发生的作用机制奠定了基础。
关键词
幽门螺杆菌
硫氧还蛋白质类
重组
蛋白质
类
遗传载体
Keywords
Helicobacter pylori
Thioredoxins
Recombinant proteins
Genetic vectors
分类号
R318.14 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
自发性脑出血患者急性期的影响预后因素及临床评分
被引量:
12
3
作者
张运周
机构
首都医科大学宣武医院神经内科
出处
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2016年第6期561-563,共3页
文摘
自发性脑出血(spontaneous intracerebral hemorrhage,SICH)在脑卒中各亚型的发病率仅次于缺血性脑卒中。在西方国家中,脑出血约占所有脑卒中的15%,占所有住院脑卒中患者的10%~30%,我国的比例高达18.8%~47.6%[1]。2015年,
关键词
脑出血
高血糖症
低
蛋白
血症
硫氧还蛋白质类
预后
分类号
R743.34 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
硫氧还蛋白-1高表达的幽门螺杆菌慢性感染蒙古沙土鼠模型的建立与评价
张贺军
刘琳娜
张超
石岩岩
丁士刚
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
幽门螺杆菌硫氧还蛋白-1基因克隆及其重组蛋白表达与活性测定
石岩岩
丁士刚
张婷
鲁凤民
张静
王晔
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
自发性脑出血患者急性期的影响预后因素及临床评分
张运周
《中华老年心脑血管病杂志》
CAS
2016
12
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职称材料
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