转Bt抗虫基因植物中杀虫蛋白的酶联免疫检测技术研究 Ⅲ.酶联免疫(ELISA)间接法检测Bt杀虫蛋白研究 被引量：9

1

作者 严吉明 叶华智 +1 位作者 伍光庆 张敏 《四川农业大学学报》 CSCD 2005年第3期280-284,共5页

采用ELISA间接检测法,研究了2种酶标羊抗兔抗体(辣根过氧化物酶与碱性磷酸酶)和2种检测载体(聚苯乙烯多孔板和硝酸纤维膜)对检测灵敏度和样本检测效果的影响.结果表明,在采用纯的杀虫晶体蛋白进行灵敏度检测时,2种酶标抗体的测定结果非... 采用ELISA间接检测法,研究了2种酶标羊抗兔抗体(辣根过氧化物酶与碱性磷酸酶)和2种检测载体(聚苯乙烯多孔板和硝酸纤维膜)对检测灵敏度和样本检测效果的影响.结果表明,在采用纯的杀虫晶体蛋白进行灵敏度检测时,2种酶标抗体的测定结果非常相近,无明显差别,灵敏度可达7.8～15.6 ng.但在检测植物样本时,不同酶标抗体则存在差异.表现为碱性磷酸酶标记的抗体优于辣根过氧化物酶标记的抗体.这主要是由于植物样本中有内源过氧化物酶所致.用硝酸纤维素膜和聚苯乙烯多孔板作载体进行检测纯的Bt杀虫蛋白的效果二者相当.但检测植物样本时,植物中的叶绿素对Dot-ELISA的干扰很大,准确性差.本研究所制备的Bt杀虫蛋白抗体具有高的特异性. 展开更多

关键词 间接酶联免疫吸附法 斑点免疫法 碱性磷酸酶 辣根过氧化物酶 聚苯乙烯板 硝酸纤维膜

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硫代葡萄糖甙测定方法的新进展 被引量：6

2

作者 陈精明 包宗宏 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期44-47,共4页

对近来新开发的硫代葡萄糖甙分析方法进行了介绍,包括膜在测定硫甙方面的应用、对硫甙酶解产物的测定、酶联免疫吸附测定硫甙、使用硫甙的碱降解产物测定硫甙、色质联用分离鉴定硫甙、离子对液相色谱和亲水作用液相色谱的应用等,并对各... 对近来新开发的硫代葡萄糖甙分析方法进行了介绍,包括膜在测定硫甙方面的应用、对硫甙酶解产物的测定、酶联免疫吸附测定硫甙、使用硫甙的碱降解产物测定硫甙、色质联用分离鉴定硫甙、离子对液相色谱和亲水作用液相色谱的应用等,并对各种测定方法进行了比较与总结。 展开更多

关键词 硫代葡萄糖甙 测定方法 油菜籽 菜籽粕 硫甙 酶联免疫吸附 膜测定

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猪瘟快速监控技术在猪瘟免疫中的应用

3

作者 徐建平 《畜牧兽医科技信息》 2015年第4期21-21,共1页

1猪口蹄疫快速检测卡简介 1.1监测卡的原理 检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加... 1猪口蹄疫快速检测卡简介 1.1监测卡的原理 检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。 展开更多

关键词 检测卡 金标法 试纸条 酶联免疫吸附法 免疫测定 胶体金 猪口蹄疫 微孔滤膜 毛细管作用 齐鲁动物保健

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烟粉虱中甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)的快速检测技术 被引量：2

4

作者 张盼 宋国华 +5 位作者 乔奇 秦艳红 张德胜 田雨婷 郑文明 张振臣 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期84-87,104,共5页

建立了利用NCM-ELISA、RT-PCR和半巢式RT-PCR检测烟粉虱中SPCSV的方法,比较了3种检测方法的灵敏性。结果表明,NCM-ELISA最低能从16头带毒烟粉虱中检测出SPCSV;RT-PCR能稳定地从3头以上带毒烟粉虱中检测出SPCSV;半巢式RT-PCR能稳定地从... 建立了利用NCM-ELISA、RT-PCR和半巢式RT-PCR检测烟粉虱中SPCSV的方法,比较了3种检测方法的灵敏性。结果表明,NCM-ELISA最低能从16头带毒烟粉虱中检测出SPCSV;RT-PCR能稳定地从3头以上带毒烟粉虱中检测出SPCSV;半巢式RT-PCR能稳定地从单头烟粉虱中检测出SPCSV。检测灵敏性研究表明,用体外转录的RNA作为核酸模板,RT-PCR可检测的最低浓度为5.69×104拷贝/μL,半巢式RT-PCR为5.69×101拷贝/μL,说明半巢式RT-PCR检测方法的灵敏性比RT-PCR高1 000倍。 展开更多

关键词 甘薯褪绿矮化病毒 烟粉虱 硝酸纤维素膜酶联免疫吸附测定 半巢式RT-PCR

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乳腺癌患者血液中PGRMC1浓度与临床相关性 被引量：12

5

作者 赵越 阮祥燕 +5 位作者 张泉东 王虎生 李雪 蔡桂举 谷牧青 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期486-493,共8页

目的本研究通过检测乳腺癌患者血液中孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)表达浓度来评价其在乳腺癌诊断中的临床价值。方法选取2016年9月至2018年1月期间因乳腺疾病就诊于首都医科大学附属北京妇产... 目的本研究通过检测乳腺癌患者血液中孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)表达浓度来评价其在乳腺癌诊断中的临床价值。方法选取2016年9月至2018年1月期间因乳腺疾病就诊于首都医科大学附属北京妇产医院乳腺外科、中国医学科学院肿瘤医院乳腺外科以及解放军263医院乳腺外科的患者140例,检测其血清及全血标本,其中乳腺癌组90例。根据临床分期早期50例:Ⅰ期(n=24)、Ⅱ期(n=26),晚期40例:Ⅲ期(n=20)、Ⅳ期(n=20)。乳腺良性肿瘤组50例。采用数字表法随机抽取同期门诊健康体检者30例作为对照组。全血样本处理后采用酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组PGRMC1浓度,化学发光免疫分析法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)测定各组血清CA125、CA153和CEA表达浓度。ROC曲线评价PGRMC1在乳腺癌诊断中的应用价值。结果 PGRMC1浓度在乳腺癌、乳腺良性疾病患者及正常对照人群中差异有统计学意义(P=0.000)。乳腺癌患者中PGRMC1浓度随临床分期增加而逐渐升高,明显高于乳腺良性疾病组及对照组浓度[Ⅱ期(60.89±16.86)ng/L,Ⅲ期(95.54±16.79)ng/L,Ⅳ期(113.78±41.20)ng/L vs良性肿瘤组(42.77±29.81)ng/L,对照组(39.36±25.10)ng/L],组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与乳腺良性疾病组与正常对照组相比,乳腺癌晚期组3种肿瘤标志物明显升高(Ⅲ期:CA125:χ2=12.26,P=0.000;CA153:χ2=28.19,P=0.000;CEA:χ2=6.52,P=0.011;Ⅳ期:CA125:χ2=16.46,P=0.000;χ2=42.19,P=0.000;CEA:χ2=14.29,P=0.000)。与乳腺癌早期组比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺良性疾病组与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析显示晚期组PGRMC1的曲线下面积(area under the ROC,AUC)为82.7%(P<0.05),CA125、CA153、CEA的AUC分别为78.3%(P<0.05)、86.8%(P<0.05)、77.3%(P<0.05)。早期组中,CA125、CA153和CEA的AUC均小于60%(P>0.05)。而PGRMC1的AUC为86.6%(P<0.05),敏感度为94.0%,特异度为50.0%。结论乳腺癌患者全血中PGRMC1表达含量高,且表达程度随乳腺癌期别的增加而增高;PGRMC1对早晚期乳腺癌诊断均有一定的临床参考价值,有望成为激素治疗前乳腺癌风险常规筛查的血液学标志物。 展开更多

关键词 绝经激素治疗 孕激素受体膜组分1 乳腺癌 酶联免疫吸附测定 血液生物学标志物 受试者工作特征曲线

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应用GAR-HRP进行甘薯病毒NCM-ELISA检测试验 被引量：3

6

作者 王秀丽 李广存 +4 位作者 王绛辉 杨煜 毕玉平 王毅 Luis Salazar 《山东农业科学》 2002年第1期36-37,共2页

分别采用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体 (GAR -HRP)和碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔抗体(GAR -AP) ,对甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV)、甘薯潜隐病毒 (SPLV)、甘薯轻斑驳病毒 (SPMMV)及甘薯褪绿病毒(SPCFV)进行NCM -ELISA检测 ,结果表明 ,采用G... 分别采用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体 (GAR -HRP)和碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔抗体(GAR -AP) ,对甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV)、甘薯潜隐病毒 (SPLV)、甘薯轻斑驳病毒 (SPMMV)及甘薯褪绿病毒(SPCFV)进行NCM -ELISA检测 ,结果表明 ,采用GAR -HRP进行NCM -ELISA检测对于SPFMV、SPLV、SPM MV、SPCFV同样有效 ,且特异性高 ,重现性好 ,在某些方面优于GAR -AP。对于国内危害甘薯的SPFMV、SPLV等主要病毒 ,采用GAR -HRP进行ELISA检测更加经济有效 。 展开更多

关键词 GAR-HRP 甘薯 NCM-ELISA 硝酸纤维素膜酶联免疫吸附法 病毒检测 羊抗兔抗体 辣根过氧化物酶

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NCM-ELISA检测马铃薯Y病毒(PVY)技术的研究及应用 被引量：3

7

作者 吕典秋 李学湛 +2 位作者 吕文河 于德才 李辉 《中国马铃薯》 2006年第6期339-342,共4页

血清学方法是病毒检测的主要手段。本试验通过对马铃薯Y病毒(PVY)的提纯,免疫家兔制备PVY抗血清,并提取PYV免疫球蛋白IgG作为NCM-ELISA反应为一抗,以市售羊抗兔抗血清为二抗,在硝酸纤维素膜(NCM)上进行NCM-ELISA反应检测PVY,建立PVY NCM... 血清学方法是病毒检测的主要手段。本试验通过对马铃薯Y病毒(PVY)的提纯,免疫家兔制备PVY抗血清,并提取PYV免疫球蛋白IgG作为NCM-ELISA反应为一抗,以市售羊抗兔抗血清为二抗,在硝酸纤维素膜(NCM)上进行NCM-ELISA反应检测PVY,建立PVY NCM-ELISA检测反应体系。试验结果显示,NCM-ELISA具有反应特异性强,灵敏度高的优点,检测植物叶片样品的最高稀释度可达到1:250。通过对田间40份样品的NCM-ELISA和DAS-ELISA检测比较,其检测结果吻合率达到100%。由于NCM-ELISA方法可以将样品点在硝酸纤维素膜上,并且可贮存几个星期或将膜送到其他实验室进行检测,因此具有操作简单,使用方便,检测成本低等优点。 展开更多

关键词 硝酸纤维素膜-酶联免疫分析 马铃薯Y病毒 检测

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应用ABC—ELISA进行人血痕种属鉴识的研究 被引量：1

8

作者 程大霖 刘祖伯 《法医学杂志》 CAS CSCD 1993年第3期103-104,121,共3页

本文报道了用生物素亲和素复合物—酶联免疫吸附测定(ABC—ELISA)点斑法对不同种动物血痕及人血痕进行人种属鉴识的实验结果。反应在硝酸纤维素薄膜上进行,结果可直接用肉眼判别,也可经透明处理后由酶标比色计判读。作者认为,本法可提... 本文报道了用生物素亲和素复合物—酶联免疫吸附测定(ABC—ELISA)点斑法对不同种动物血痕及人血痕进行人种属鉴识的实验结果。反应在硝酸纤维素薄膜上进行,结果可直接用肉眼判别,也可经透明处理后由酶标比色计判读。作者认为,本法可提高人种属鉴识灵敏度。本法也可适用于法医物证检验中相似的免疫测定。 展开更多

关键词 ELISA 血痕种属 行人 ABC 酶联免疫吸附测定 硝酸纤维素 免疫测定 物证检验 复合物 亲和素 生物素 比色计 灵敏度

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猪蓝耳病检测卡与ELISA的对比分析 被引量：1

9

作者 徐建平 《中国畜禽种业》 2015年第6期126-127,共2页

1猪高致病型蓝耳病快速检测卡简介检测卡的原理：检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,... 1猪高致病型蓝耳病快速检测卡简介检测卡的原理：检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。 展开更多

关键词 检测卡 蓝耳病 金标法 酶联免疫吸附法 免疫测定 胶体金 致病型 毛细管作用 试纸条 微孔滤膜

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猪瘟金标检测卡在检疫及监督上的应用

10

作者 李霞 徐建平 《中国畜禽种业》 2015年第5期113-113,共1页

1监测卡的原理 检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作... 1监测卡的原理 检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式,即为金标试纸条。判定标准：猪瘟抗体阳性≥1：32（5log2）;猪瘟抗体阴性〈1：32（5log2）。 展开更多

关键词 金标检测卡 金标法 猪瘟抗体 试纸条 酶联免疫吸附法 免疫测定 胶体金 不合格数 毛细管作用 微孔滤膜

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猪蓝耳病检测卡在检疫及监督上的应用

11

作者 孙长贵 徐建平 《中国畜禽种业》 2015年第6期64-64,共1页

1监测卡的原理检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用... 1监测卡的原理检测卡利用抗体快速金标检测卡法（简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原相结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式,即为金标试纸条。判定标准：蓝耳抗体阳性≥1：40;蓝耳抗体阴性〈1：40。2特点使用简单、快捷、准确、易于操作。 展开更多

关键词 检测卡 金标法 蓝耳病 试纸条 酶联免疫吸附法 免疫测定 胶体金 不合格数 毛细管作用 微孔滤膜

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用Dot—ELISA检测NDV

12

作者 孙键 王志尧 《畜牧兽医科技信息》 1997年第21期7-7,共1页

作者用快速斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测新城疫病毒(NDV)效果明显,用该试验检测禽粪样123份,阳性57份(46.3％),检测76份禽的前胃或脾组织匀浆,阳性40份(52.6％)。为了与间接免疫荧光抗体试验(IFT)比较检测效果,用NDV的IFT抗体... 作者用快速斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测新城疫病毒(NDV)效果明显,用该试验检测禽粪样123份,阳性57份(46.3％),检测76份禽的前胃或脾组织匀浆,阳性40份(52.6％)。为了与间接免疫荧光抗体试验(IFT)比较检测效果,用NDV的IFT抗体试验检测禽粪样67份,阳性30份(44.7％),检测禽组织匀浆39份,阳性20份(51.3％)。证实两种试验的敏感性相似。新建立的Dot-ELISA的操作时间需要30分钟,不需要昂贵的设备,制备的硝酸纤维膜使用前可保存几个月。 展开更多

关键词 Dot—ELISA 检测NDV 新城疫病毒 DOT-ELISA 免疫吸附试验 试验检测 硝酸纤维膜 斑点酶联 荧光抗体试验 比较检测

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