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模式抗原破伤风毒素C蛋白的克隆、表达条件优化及免疫原性初步分析
被引量：
1
1
作者
王明永
张雅妮
+3 位作者
雷鸣
左大明
张丽芸
陈政良
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期731-735,共5页
目的获得高纯度、高免疫原性的破伤风毒素C片段(TTC)蛋白。方法以PCR从破伤风杆菌质粒DNA中扩增TTC基因片段,将其插入载体pET43.1a(+)并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白,经凝血酶酶切,再用Ni2+-NTA...
目的获得高纯度、高免疫原性的破伤风毒素C片段(TTC)蛋白。方法以PCR从破伤风杆菌质粒DNA中扩增TTC基因片段,将其插入载体pET43.1a(+)并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白,经凝血酶酶切,再用Ni2+-NTA琼脂糖柱分离目的蛋白。SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,动物免疫实验鉴定其免疫原性。结果获得1373bp的TTC基因片段,构建成重组表达载体pET43.1a(+)-TTC并在大肠杆菌中表达。TTC-Nus融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的22%,酶切后TTC蛋白可与载体蛋白有效分离,获得纯度为95.5%的TTC蛋白,该蛋白可被破伤风抗毒素识别;将TTC蛋白免疫小鼠后,免疫血清可与破伤风毒素特异性结合,三次免疫后其抗体效价可达1∶25600。结论所获TTC蛋白纯度高,免疫原性好,为研究体内外抗原提呈、免疫应答提供了良好的模式抗原。
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关键词
破伤风毒素c蛋白
基因克隆
重组表达
免疫原性
模式抗原
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职称材料
题名
模式抗原破伤风毒素C蛋白的克隆、表达条件优化及免疫原性初步分析
被引量：
1
1
作者
王明永
张雅妮
雷鸣
左大明
张丽芸
陈政良
机构
南方医科大学免疫学教研室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期731-735,共5页
基金
广东省自然科学基金研究团队项目(015003)~~
文摘
目的获得高纯度、高免疫原性的破伤风毒素C片段(TTC)蛋白。方法以PCR从破伤风杆菌质粒DNA中扩增TTC基因片段,将其插入载体pET43.1a(+)并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白,经凝血酶酶切,再用Ni2+-NTA琼脂糖柱分离目的蛋白。SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,动物免疫实验鉴定其免疫原性。结果获得1373bp的TTC基因片段,构建成重组表达载体pET43.1a(+)-TTC并在大肠杆菌中表达。TTC-Nus融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的22%,酶切后TTC蛋白可与载体蛋白有效分离,获得纯度为95.5%的TTC蛋白,该蛋白可被破伤风抗毒素识别;将TTC蛋白免疫小鼠后,免疫血清可与破伤风毒素特异性结合,三次免疫后其抗体效价可达1∶25600。结论所获TTC蛋白纯度高,免疫原性好,为研究体内外抗原提呈、免疫应答提供了良好的模式抗原。
关键词
破伤风毒素c蛋白
基因克隆
重组表达
免疫原性
模式抗原
Keywords
tetanus toxin fragment
c
gene
c
loning
re
c
ombinant expression
immunogeni
c
ity
model antigen
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
模式抗原破伤风毒素C蛋白的克隆、表达条件优化及免疫原性初步分析
王明永
张雅妮
雷鸣
左大明
张丽芸
陈政良
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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