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巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白对体外培养的绵羊肺炎支原体生长的影响被引量：6: 1; 作者张晓丽高宝德 +2 位作者刘海燕张彦兵孙延鸣《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期361-365,共5页; 为研究重组巴什拜羊短腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(rSPLUNC1)对体外培养的绵羊肺炎支原体(MO)生长的影响,本研究以不同浓度(10μg/mL、20μg/mL及40μg/mL)的rSPLUNC1添加于MO培养液中进行培养,并采用平板菌落计数和荧光定量PCR方法检测... 展开更多; 关键词巴什拜羊短腭、肺及鼻咽上皮克隆1 绵羊肺炎支原体平板菌落计数荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用研究被引量：2: 2; 作者刘海燕王继雪 +3 位作者赵宁杨义袁婷孙延鸣《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期426-430,共5页; 为研究重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊免疫调节作用,本研究将6只巴什拜羊分为A组,18只盘羊杂交羊随机分为B、C、D组,对实验羊人工感染MO后第5 d,C组气管注射巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白、D组气管注射盘羊杂交羊重... 展开更多; 关键词短腭、肺及鼻咽上皮克隆基因1 盘羊杂交羊绵羊肺炎支原体 ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

RACE法克隆湖羊SPLUNC1基因及序列分析被引量：1: 3; 作者陈凯丽孙延鸣 +2 位作者沈文陈冬梅郭海英《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期8-13,共6页; 通过克隆湖羊短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate,lung and nasal epithelium clone 1,SPLUNC1)基因的cDNA序列,为研究其蛋白的结构和功能奠定基础。参照GenBank上牛、山羊的SPLUNC1基因的cDNA序列,设计简并引物,分别扩增出5′和... 展开更多; 关键词湖羊短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1基因 CDNA末端快速扩增序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1基因克隆及序列分析: 4; 作者高宝德张晓丽 +1 位作者沈文孙延鸣《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第5期-,共6页; 为了克隆盘羊与巴什拜羊杂交后代短鄂、肺及鼻咽上皮细胞克隆1(SPLUNC1)基因cDNA全长序列,本研究根据GenBank上已公布的牛、山羊的SPLUNC1基因序列来设计简并引物,以盘羊与巴什拜羊杂交F1代为材料,克隆出盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1... 展开更多; 关键词短鄂、肺及鼻咽上皮细胞克隆1 盘羊杂交后代 CDNA末端快速扩增序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

盘羊杂交羊SPLUNC1融合蛋白的真核表达: 5; 作者高宝德张晓丽 +2 位作者刘海燕张彦兵孙延鸣《江苏农业科学》北大核心 2017年第14期130-133,共4页; 为构建盘羊杂交羊SPLUNC1基因的真核表达载体并在巴斯德毕赤酵母中表达,从盘羊杂交羊口腔上颚的上皮细胞中提取总RNA,并反转录成c DNA,以该c DNA为模板采用逆转录PCR(RT-PCR)法克隆盘羊杂交羊SPLUNC1基因开放阅读框,并克隆到p PIC9K载体... 展开更多; 关键词盘羊杂交羊短颚、肺及鼻咽上皮细胞克隆1 融合蛋白真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

天然免疫相关蛋白分子SPLUNC1载体构建及蛋白稳定表达被引量：1: 6; 作者薛君力周立娟 +3 位作者曾姣娥易玲王小珏张洪涛《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期500-503,共4页; 固有免疫应答在保护机体避免细菌感染中发挥着重要作用,如果固有免疫应答出现紊乱,则会加重感染和炎症反应。在呼吸道,黏膜分泌的多种蛋白如杀菌性/通透性增强蛋白（bactericidal/permeabilityincreasing protein,BPI）等能够通过参与... 展开更多; 关键词天然免疫短上腭、肺及鼻咽上皮克隆基因1(SPLUNC1) 蛋白表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组SPLUNC1抑菌及调节NE活性的研究被引量：1: 7; 作者张晓丽高宝德 +3 位作者刘海燕杜智慧王继雪孙延鸣《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期823-826,共4页; 为研究重组绵羊短腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(rSPLUNC1)的抑菌活性及对中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性的调节作用,本实验采用微量稀释法测定rSPLUNC1对巴氏杆菌、大肠杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌生长的抑制作用;采用显色底物检测... 展开更多; 关键词短腭、肺及鼻咽上皮克隆1 微量稀释法中性粒细胞弹性蛋白酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

湖羊SPLUNC1基因序列的生物信息学分析: 8; 作者陈凯丽孙延鸣 +2 位作者沈文陈冬梅郭海英《江苏农业科学》北大核心 2016年第2期48-51,共4页; 以湖羊SPLUNC1基因为研究对象,利用生物信息学方法对其编码的蛋白进行理化性质、信号肽、跨膜区域、亚细胞定位、二级结构、三级结构、保守区域分析,并构建系统发育树。结果表明,湖羊SPLUNC1蛋白的分子量为26.53 ku,理论等电点为5.07。S... 展开更多; 关键词湖羊短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1) 生物信息学分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白对体外培养的绵羊肺炎支原体生长的影响被引量：6: 1; 作者张晓丽高宝德刘海燕张彦兵孙延鸣; 机构石河子大学动物科技学院石河子大学生命科学学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期361-365,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31460686); 文摘为研究重组巴什拜羊短腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(rSPLUNC1)对体外培养的绵羊肺炎支原体(MO)生长的影响,本研究以不同浓度(10μg/mL、20μg/mL及40μg/mL)的rSPLUNC1添加于MO培养液中进行培养,并采用平板菌落计数和荧光定量PCR方法检测其对MO的增殖水平。结果显示:平板菌落计数中,3个rSPLUNC1浓度组菌落数分别比对照组减少37.25%(p<0.01)、48.74%(p<0.01)及67.23%(p<0.01);荧光定量PCR检测结果显示,2 h后实验组MO 16S rRNA拷贝数降低,4 h时拷贝数最低,3个rSPLUNC1浓度组的拷贝数比对照组降低2.96%(p>0.05)、92.57%(p<0.01)、93.75%(p<0.01)。研究表明,rSPLUNC1对体外培养的MO具有显著的抑制作用。; 关键词巴什拜羊短腭、肺及鼻咽上皮克隆1 绵羊肺炎支原体平板菌落计数荧光定量PCR; Keywords Bashiby sheep short palate, lung and nasal epithelium clone l Mycoplasma ovipneumoniae plata count real-time PCR; 分类号 S852.62 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用研究被引量：2: 2; 作者刘海燕王继雪赵宁杨义袁婷孙延鸣; 机构石河子大学动物科技学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期426-430,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31460686); 文摘为研究重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊免疫调节作用,本研究将6只巴什拜羊分为A组,18只盘羊杂交羊随机分为B、C、D组,对实验羊人工感染MO后第5 d,C组气管注射巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白、D组气管注射盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白,每天150μg/只;A、B组每天气管注射等量的生理盐水作为对照组。采用ELISA方法检测各组羊血清中MO抗体水平以及IL-8、IL-12、IL-13表达水平。结果显示,感染前所有实验羊MO抗体均为阴性,感染后第14 d所有实验羊MO抗体均为阳性;IL-8水平在感染后第14 d^21 d,A、C、D组极显著和显著地低于B组(p<0.01;p<0.05;p<0.01)。IL-12水平在感染后第14 d,A、C和D组极显著和显著地低于B组(p<0.01;p<0.05;p<0.01),第21 d时,A、C和D组极显著低于B组(p<0.01)。IL-13水平在感染后第5 d,A组显著低于B、C和D组(p<0.05),在第7 d^21 d,A、C、D组显著和极显著低于B组(p<0.05;p<0.01;p<0.01)。实验数据表明重组SPLUNC1蛋白对盘羊杂交羊具有明显的免疫调节作用。本研究为绵羊支原体肺炎的治疗提供了实验依据。; 关键词短腭、肺及鼻咽上皮克隆基因1 盘羊杂交羊绵羊肺炎支原体 ELISA; Keywords short palate lung and nasal epithelium clone 1 argali hybrid sheep Mycoplasma ovipneumoniae ELISA; 分类号 S852.4 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RACE法克隆湖羊SPLUNC1基因及序列分析被引量：1: 3; 作者陈凯丽孙延鸣沈文陈冬梅郭海英; 机构新疆石河子大学生命科学学院新疆石河子大学动物科技学院; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期8-13,共6页; 基金国家自然科学基金(31460686); 文摘通过克隆湖羊短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate,lung and nasal epithelium clone 1,SPLUNC1)基因的cDNA序列,为研究其蛋白的结构和功能奠定基础。参照GenBank上牛、山羊的SPLUNC1基因的cDNA序列,设计简并引物,分别扩增出5′和3′端目的片段,测序后进行拼接,获得湖羊SPLUNC1基因cDNA全长序列,并对序列进行分析。结果表明:克隆的湖羊SPLUNC1基因cDNA序列全长为1 091bp(GenBank登录号KJ749828),其中开放阅读框为768bp,共编码255个氨基酸。构建的氨基酸进化树结果显示湖羊SPLUNC1与预测绵羊的氨基酸同源性最高,山羊次之。; 关键词湖羊短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1基因 CDNA末端快速扩增序列分析; Keywords Hu Sheep Short palate lung and nasal epithelium clone 1（SPLUNC1） Rapid amplification cDNA ends（RACE） Sequence analysis; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1基因克隆及序列分析: 4; 作者高宝德张晓丽沈文孙延鸣; 机构石河子大学生命科学学院石河子大学动物科技学院; 出处《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第5期-,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31460686); 文摘为了克隆盘羊与巴什拜羊杂交后代短鄂、肺及鼻咽上皮细胞克隆1(SPLUNC1)基因cDNA全长序列,本研究根据GenBank上已公布的牛、山羊的SPLUNC1基因序列来设计简并引物,以盘羊与巴什拜羊杂交F1代为材料,克隆出盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1基因的片段序列,再利用RACE法克隆其SPLUNC1基因3′端和5′端,测序后拼接获得SPLUNC1基因全长cDNA序列。结果显示,盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1基因的cDNA全长为1117 bp,5′非编码区(UTR)为84 bp,3′UTR为265 bp,开放阅读框(ORF)为768 bp,编码255个氨基酸。预测该基因编码蛋白的等电点5.006,分子量26.57 kDa。系统进化分析表明,盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1氨基酸序列与绵羊的氨基酸序列同源性最高。本研究克隆了盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1基因全长cDNA序列,为后续深入研究该杂交后代SPLUNC1基因的功能奠定基础。; 关键词短鄂、肺及鼻咽上皮细胞克隆1 盘羊杂交后代 CDNA末端快速扩增序列分析; Keywords SPLUNC1 gene Argali hybrid offspring RACE sequence analysis; 分类号 S826 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名盘羊杂交羊SPLUNC1融合蛋白的真核表达: 5; 作者高宝德张晓丽刘海燕张彦兵孙延鸣; 机构石河子大学生命科学学院石河子大学动物科技学院; 出处《江苏农业科学》北大核心 2017年第14期130-133,共4页; 基金国家自然科学基金(编号:31460686); 文摘为构建盘羊杂交羊SPLUNC1基因的真核表达载体并在巴斯德毕赤酵母中表达,从盘羊杂交羊口腔上颚的上皮细胞中提取总RNA,并反转录成c DNA,以该c DNA为模板采用逆转录PCR(RT-PCR)法克隆盘羊杂交羊SPLUNC1基因开放阅读框,并克隆到p PIC9K载体中,构建真核表达载体p PIC9K-SPLUNC1,再将重组质粒电转至毕赤酵母GS115中进行表达,表达产物经Ni-NTA琼脂亲和层析纯化,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western Blot)方法检测。结果显示,目的基因大小758 bp,重组表达质粒p PIC9K-SPLUNC1经双酶切、PCR及测序鉴定构建成功;表达产物经SDS-PAGE分析,可见大小为25.96 ku的目的条带,且在72 h表达量最大;纯化后经SDS-PAGE和Western Blot分析,可见大小为25.96 ku的目的条带。研究结果表明,利用真核表达系统在体外成功表达并纯化了盘羊杂交羊r SPLUNC1蛋白,为深入研究盘羊杂交羊SPLUNC1蛋白的生物学功能奠定基础。; 关键词盘羊杂交羊短颚、肺及鼻咽上皮细胞克隆1 融合蛋白真核表达; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名天然免疫相关蛋白分子SPLUNC1载体构建及蛋白稳定表达被引量：1: 6; 作者薛君力周立娟曾姣娥易玲王小珏张洪涛; 机构荆州市中心医院内分泌科首都医科大学附属北京胸科医院病理科首都医科大学附属北京胸科医院中心实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期500-503,共4页; 基金北京市科技计划项目(z121107001012146); 文摘固有免疫应答在保护机体避免细菌感染中发挥着重要作用,如果固有免疫应答出现紊乱,则会加重感染和炎症反应。在呼吸道,黏膜分泌的多种蛋白如杀菌性/通透性增强蛋白（bactericidal/permeabilityincreasing protein,BPI）等能够通过参与固有免疫应答来清除呼吸道入侵的细菌,避免呼吸道感染[1]。; 关键词天然免疫短上腭、肺及鼻咽上皮克隆基因1(SPLUNC1) 蛋白表达; 分类号 R392.9 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组SPLUNC1抑菌及调节NE活性的研究被引量：1: 7; 作者张晓丽高宝德刘海燕杜智慧王继雪孙延鸣; 机构石河子大学动物科技学院石河子大学生命科学学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期823-826,共4页; 基金国家自然科学基金(31460686); 文摘为研究重组绵羊短腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(rSPLUNC1)的抑菌活性及对中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性的调节作用,本实验采用微量稀释法测定rSPLUNC1对巴氏杆菌、大肠杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌生长的抑制作用;采用显色底物检测法测定rSPLUNC1对NE活性的调节作用。抑菌检测结果表明10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL rSPLUNC1能够极显著地抑制巴氏杆菌、大肠杆菌的生长(p<0.01),并且呈剂量效应;显色底物检测结果表明10μg/mL和20μg/mL^40μg/mL rSPLUNC1可以显著和极显著地提高绵羊肺炎支原体(Mo)感染的外周中性粒细胞NE的活性(p<0.05,p<0.01)。表明rSPLUNC1能够抑制革兰氏阴性菌的生长并提高NE活性,可能有助于机体抵御呼吸道的感染。; 关键词短腭、肺及鼻咽上皮克隆1 微量稀释法中性粒细胞弹性蛋白酶; Keywords lung and nasal epithelium clone 1 microdilution method neutrophil elastase; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名湖羊SPLUNC1基因序列的生物信息学分析: 8; 作者陈凯丽孙延鸣沈文陈冬梅郭海英; 机构石河子大学生命科学学院石河子大学动物科技学院; 出处《江苏农业科学》北大核心 2016年第2期48-51,共4页; 基金国家自然科学基金(编号:31460686); 文摘以湖羊SPLUNC1基因为研究对象,利用生物信息学方法对其编码的蛋白进行理化性质、信号肽、跨膜区域、亚细胞定位、二级结构、三级结构、保守区域分析,并构建系统发育树。结果表明,湖羊SPLUNC1蛋白的分子量为26.53 ku,理论等电点为5.07。SPLUNC1蛋白N端存在信号肽,亚细胞定位在细胞外。SPLUNC1蛋白质的二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲。该蛋白由4股反平行的肽段形成的β折叠片和2个α螺旋组成的桶形结构域组成。系统发育树分析表明,湖羊的SPLUNC1蛋白在山羊、牛、猪、人、小鼠中,与山羊首先聚为一类,后与牛聚为一类,这与动物学分类结果一致。; 关键词湖羊短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1) 生物信息学分析; 分类号 S826 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白对体外培养的绵羊肺炎支原体生长的影响	张晓丽高宝德刘海燕张彦兵孙延鸣	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用研究	刘海燕王继雪赵宁杨义袁婷孙延鸣	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	RACE法克隆湖羊SPLUNC1基因及序列分析	陈凯丽孙延鸣沈文陈冬梅郭海英	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	盘羊与巴什拜羊杂交后代SPLUNC1基因克隆及序列分析	高宝德张晓丽沈文孙延鸣	《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	盘羊杂交羊SPLUNC1融合蛋白的真核表达	高宝德张晓丽刘海燕张彦兵孙延鸣	《江苏农业科学》北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	天然免疫相关蛋白分子SPLUNC1载体构建及蛋白稳定表达	薛君力周立娟曾姣娥易玲王小珏张洪涛	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	重组SPLUNC1抑菌及调节NE活性的研究	张晓丽高宝德刘海燕杜智慧王继雪孙延鸣	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
8	湖羊SPLUNC1基因序列的生物信息学分析	陈凯丽孙延鸣沈文陈冬梅郭海英	《江苏农业科学》北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料