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共表达分子伴侣蛋白提高III型普鲁兰水解酶在短小芽孢杆菌中的分泌表达及发酵优化 被引量:1
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作者 曾静 郭建军 +1 位作者 王通 袁林 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第10期149-157,共9页
本研究旨在通过共表达分子伴侣蛋白以及优化发酵条件来提高III型普鲁兰水解酶(TK-PUL)在短小芽孢杆菌中的分泌表达水平。通过构建共表达TK-PUL和分子伴侣蛋白的多种重组短小芽孢杆菌,并以胞外酶活为指标对其进行筛选,确定最有利于TK-PU... 本研究旨在通过共表达分子伴侣蛋白以及优化发酵条件来提高III型普鲁兰水解酶(TK-PUL)在短小芽孢杆菌中的分泌表达水平。通过构建共表达TK-PUL和分子伴侣蛋白的多种重组短小芽孢杆菌,并以胞外酶活为指标对其进行筛选,确定最有利于TK-PUL分泌表达的分子伴侣蛋白及对应的重组短小芽孢杆菌。在此基础上采用单因素实验和响应面法优化重组短小芽孢杆菌的发酵条件。结果表明,共表达分子伴侣蛋白PrsA^(Ba)的重组短小芽孢杆菌的胞外酶活达到98.79 U/mL,提高了0.31倍。该重组短小芽孢杆菌的最佳培养基包括19.65 g/L葡萄糖、21.46 g/L酵母提取物、12.01 g/L MgCl_(2)·6H_(2)O、9.02 g/L脯氨酸、0.01 g/L FeSO4·7H_(2)O、0.01 g/L MnSO4·4H_(2)O、0.001 g/L ZnSO4·7H_(2)O。在发酵温度为35℃、起始发酵pH为7.0的条件下,该重组短小芽孢杆菌于最佳培养基中培养66 h时,其胞外酶活达到192.68 U/mL,提高了1.56倍。本研究通过共表达分子伴侣蛋白和发酵优化实现了TK-PUL在短小芽孢杆菌的高效分泌表达,为TK-PUL的应用提供了基础。 展开更多
关键词 III型普鲁兰水解酶 短小芽孢杆菌 胞外分子伴侣蛋白 发酵优化 分泌表达
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短小芽孢杆菌SE5肽聚糖和脂磷壁酸联合添加对斜带石斑鱼免疫、抗氧化和肠道形态的影响 被引量:1
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作者 王奇桢 于海霞 +5 位作者 李杰 杨红玲 吴卫强 吴子烨 靳婷 孙云章 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第21期62-66,共5页
试验旨在探究短小芽孢杆菌SE5提取的肽聚糖、脂磷壁酸联合添加对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)免疫、抗氧化和肠道形态的影响。试验挑选初始体重(14.69±0.04)g的健康石斑鱼540尾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼。对照... 试验旨在探究短小芽孢杆菌SE5提取的肽聚糖、脂磷壁酸联合添加对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)免疫、抗氧化和肠道形态的影响。试验挑选初始体重(14.69±0.04)g的健康石斑鱼540尾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼。对照组(CG组)饲喂基础饲料,试验组在基础饲料中分别添加灭活短小芽孢杆菌SE5(1.0×10^(8) CFU/g,HIB组)、肽聚糖(52.86 mg/kg,PGN组)、脂磷壁酸(6.60 mg/kg,LTA组),联合添加肽聚糖和脂磷壁酸(26.43 mg/kg+3.30 mg/kg,PLA01组;52.86 mg/kg+6.60 mg/kg,PLA02组)。试验期8 w。结果显示,HIB组和PLA01组斜带石斑鱼肝脏的酸性磷酸酶(ACP)活性显著高于CG组和LTA组(P<0.05)。HIB组肠道的超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于CG组(P<0.05)。各试验组肠道丙二醛(MDA)含量均显著低于CG组(P<0.05)。除HIB组和LTA组外,各试验组肠道的绒毛高度均显著高于CG组(P<0.05),PLA01组最长;PLA02组肌层厚度最厚,PGN组和PLA02组的肌层厚度均显著高于CG组(P<0.05)。研究表明,联合添加短小芽孢杆菌SE5脂磷壁酸与肽聚糖对斜带石斑鱼免疫功能、肠道抗氧化能力及肠道形态的促进作用优于单独添加,且以PLA01组添加效果较好。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 短小芽孢杆菌SE5 肽聚糖 脂磷壁酸 免疫功能
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短小芽孢杆菌对羔羊肠道炎症和屏障功能的影响
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作者 焦帅 付域泽 +6 位作者 崔凯 张吉贤 王杰 毕研亮 刁其玉 张建新 张乃锋 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期344-352,共9页
【目的】本试验旨在研究短小芽孢杆菌对羔羊生长性能及腹泻、血清指标、结肠组织形态、炎性细胞因子和紧密连接蛋白含量的影响。【方法】选取36只初生重3 kg左右的1日龄萨能奶山羊公羔,随机分为4组(每组9个重复,每重复1只羔羊);每天分... 【目的】本试验旨在研究短小芽孢杆菌对羔羊生长性能及腹泻、血清指标、结肠组织形态、炎性细胞因子和紧密连接蛋白含量的影响。【方法】选取36只初生重3 kg左右的1日龄萨能奶山羊公羔,随机分为4组(每组9个重复,每重复1只羔羊);每天分别饲喂0(CON组)、1 mL(BP1组)、5 mL(BP5组)、10 mL(BP10组)短小芽孢杆菌菌液,其活菌数为1×10^(8) CFU/mL,试验期14 d。【结果】饲喂短小芽孢杆菌对羔羊末重、平均日增重、平均日采食和料重比均无显著影响(P> 0.05),但均降低了羔羊的粪便评分和腹泻频率(P <0.05);BP1组血清中谷草转氨酶含量低于对照组(P <0.05),二胺氧化酶含量低于对照组和BP5组(P <0.05),与对照组相比,其它三组均降低了D-乳酸含量(P <0.05);BP1组增加了结肠肌层厚度(P <0.05);与对照组相比,BP1组、BP5组和BP10组均降低了IL-1β、IL-6、TNF-α含量(P <0.05),增加了IL-10、TGF-β、IFN-γ、PPAR-γ的含量以及MUC2、Claudin-1、Claudin-4、Occludin和ZO-1的含量(P <0.05),而且减少了结肠组织中性粒细胞细胞浸润。【结论】在初生羔羊代乳粉中添加短小芽孢杆菌可以降低羔羊腹泻频率,改善结肠组织形态,缓解炎症反应,增强黏膜屏障功能,但对生长性能无显著影响。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 羔羊 生长性能 结肠炎症 紧密连接蛋白
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短小芽孢杆菌(GXUN613L)对银鲑生长、血清生化指标、抗氧化能力及肠道健康的影响 被引量:3
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作者 梁俊杰 杨秋月 +5 位作者 许剑 刘永强 童潼 王佳婧 徐粒潇 张琴 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第8期66-71,共6页
试验旨在探讨短小芽孢杆菌(GXUN613L)对银鲑生长性能、血清生化指标、抗氧化能力及肠道健康的影响。挑选240尾初始体质量为(130.2±10.1) g的银鲑,随机分为4组,每组3个重复,每个重复20尾鱼。CK组、LL组、LM组和LH组分别在基础饲料... 试验旨在探讨短小芽孢杆菌(GXUN613L)对银鲑生长性能、血清生化指标、抗氧化能力及肠道健康的影响。挑选240尾初始体质量为(130.2±10.1) g的银鲑,随机分为4组,每组3个重复,每个重复20尾鱼。CK组、LL组、LM组和LH组分别在基础饲料中添加0、2×10^(7)、4×10^(9)、8×10^(11) CFU/g的短小芽孢杆菌(GXUN613L)。试验期6 w。结果显示,LL组和LM组银鲑的增重率、特定生长率显著高于对照组(P<0.05);LM组银鲑的蛋白质效率显著高于对照组(P<0.05),饲料系数显著低于CK组(P<0.05)。LL组、LM组和LH组银鲑血清中的总蛋白、白蛋白和总胆固醇含量均显著高于CK组(P<0.05),LM组银鲑血清中葡萄糖含量和碱性磷酸酶活性显著高于CK组(P<0.05)。LM组银鲑肝脏的总抗氧化能力、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于CK组(P<0.05)。LM组银鲑前肠、后肠肌层厚度及绒毛高度显著高于CK组(P<0.05),肠道微生物多样性更好。研究表明,饲料中添加短小芽孢杆菌(GXUN613L)可以促进银鲑生长,改善银鲑血清生化指标及肠道健康,提高银鲑的抗氧化能力,其适宜添加量为4×109 CFU/g。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 银鲑 生长性能 血清生化指标 抗氧化能力 肠道健康
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稻瘟病拮抗菌短小芽孢杆菌NDY-10的功能特性与全基因组分析 被引量:1
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作者 魏浩卓 李宁 李静泉 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第12期277-284,共8页
短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NDY-10对植物病原菌具有广谱拮抗活性,其中对稻瘟病菌的抑菌率最高。从NDY-10菌株对稻瘟病菌的拮抗特性和全基因组分析2个方面进行研究,结果表明,NDY-10菌株对稻瘟病病菌具有非常强的抑制作用,其无菌发... 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NDY-10对植物病原菌具有广谱拮抗活性,其中对稻瘟病菌的抑菌率最高。从NDY-10菌株对稻瘟病菌的拮抗特性和全基因组分析2个方面进行研究,结果表明,NDY-10菌株对稻瘟病病菌具有非常强的抑制作用,其无菌发酵液对稻瘟病菌的抑制率可达100%,且与添加量呈正相关。NDY-10菌株无菌发酵液对温度、紫外线辐射不敏感,强酸或强碱会影响其拮抗活性。经3种蛋白酶处理后,NDY-10菌株对稻瘟病病菌的抑制率下降,说明短小芽孢杆菌NDY-10菌株对稻瘟病病菌的拮抗物质是一种蛋白。NDY-10菌株的完整基因组大小为3736781 bp(含41.63%的G+C),包括3893个编码序列(CDS)。从该基因组中鉴定出9条基因簇,其中大部分负责抑制代谢物的合成,并且发现了tasA拮抗基因(801对碱基)。根据之前的研究,推测其为稻瘟病接抗菌NDY-10菌株的关键功能基因。由本研究结果可知,NDY-10菌株可以作为潜在的优秀的生防制剂用于防治稻瘟病。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 稻瘟病菌 拮抗作用 生物防治 全基因组
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短小芽孢杆菌防治植物病害研究进展 被引量:1
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作者 常波 《现代农业科技》 2024年第12期65-70,共6页
过度使用化学农药导致植物抗耐药性加重、农产品污染、环境残毒等一系列化学农药综合症,利用生物农药替代化学农药防治植物病害是大势所趋。短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)具有抵抗环境胁迫能力强、分泌多种抗菌类物质以及广泛的生物... 过度使用化学农药导致植物抗耐药性加重、农产品污染、环境残毒等一系列化学农药综合症,利用生物农药替代化学农药防治植物病害是大势所趋。短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)具有抵抗环境胁迫能力强、分泌多种抗菌类物质以及广泛的生物防治特性,是芽孢杆菌属中最有价值的成员之一,具有作为生防微生物开发成绿色农药的商用潜力。目前,短小芽孢杆菌INR7、HR10、SE34、SE49、SE52、KUDC1732、MCB-7、PTB180、RST25等均已被广泛报道,可通过多种机制拮抗真菌植物病原菌。本文归纳了短小芽孢杆菌的主要次生代谢物及抑菌功能基因种类,阐述了相关菌株拮抗植物病菌的作用机制,综述了其在植物病害生物防治方面的研究成果,以期为短小芽孢杆菌作为生防制剂的研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 次生代谢物 功能基因 植物病害 作用机制
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短小芽孢杆菌拮抗植物病原真菌研究进展
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作者 何高阳 《中南农业科技》 2024年第9期231-236,258,共7页
为明确短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)防病新动态及研究进展,系统整理了1991—2024年国际三大数据库和国内三大数据库相关文献,梳理了B.pumilus对不同植物病原真菌的抑制效果,分析了其产生的挥发性有机物(mVOCs)、抗生素以及抗菌蛋白... 为明确短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)防病新动态及研究进展,系统整理了1991—2024年国际三大数据库和国内三大数据库相关文献,梳理了B.pumilus对不同植物病原真菌的抑制效果,分析了其产生的挥发性有机物(mVOCs)、抗生素以及抗菌蛋白等拮抗物质的组成与结构,探讨了其纯化成分对病原真菌的拮抗机制,论述了不同实验技术提高拮抗物质的表达以及抑菌效果,加速其商业化,为增强B.pumilus在农业生物防治中的广泛应用提供了理论参考。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) 挥发性有机物(mVOCs) 抗生素 抗菌蛋白 拮抗机制 病原真菌 生物防治
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短小芽孢杆菌AR03对烟草黑胫病菌的拮抗活性及其田间防效 被引量:36
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作者 王静 孔凡玉 +2 位作者 秦西云 张成省 张秀玉 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2010年第5期78-81,共4页
为测定短小芽孢杆菌AR03对烟草黑胫病菌的拮抗作用及其发酵菌剂的田间防效,通过对峙培养法、固态发酵及田间小区试验的方法发现,AR03菌体和发酵液对烟草黑胫病菌具有很强的拮抗活性,而其除菌上清无拮抗活性,初步说明AR03分泌的抗菌物为... 为测定短小芽孢杆菌AR03对烟草黑胫病菌的拮抗作用及其发酵菌剂的田间防效,通过对峙培养法、固态发酵及田间小区试验的方法发现,AR03菌体和发酵液对烟草黑胫病菌具有很强的拮抗活性,而其除菌上清无拮抗活性,初步说明AR03分泌的抗菌物为胞内物质。AR03经固态发酵后的活菌数为3.82×1011cfu/g。该菌剂的田间小区试验结果显示,对混合有青枯病发生的烟草黑胫病的防治效果明显好于对照药剂,且与72%甲霜灵.锰锌可湿性粉剂协同防治效果最好。因此,AR03对烟草黑胫病和青枯病具有可持续控病作用,是1株极具开发潜力的生防菌株。 展开更多
关键词 烟草黑胫病 短小芽孢杆菌 生物防治 固体发酵
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短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)脱毛蛋白酶基因的克隆与序列分析 被引量:12
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作者 黄庆 潘皎 +2 位作者 彭勇 李昕 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第2期31-35,共5页
短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-31-C-42菌株是从成都市生活垃圾中分离,并经多次诱变后得到的菌株。其发酵液具有很好的脱毛效果,且对皮革胶原没有损伤。通过对该菌株发酵液中的碱性蛋白酶DHAP的纯化与N′-末端氨基酸序列测定,以... 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-31-C-42菌株是从成都市生活垃圾中分离,并经多次诱变后得到的菌株。其发酵液具有很好的脱毛效果,且对皮革胶原没有损伤。通过对该菌株发酵液中的碱性蛋白酶DHAP的纯化与N′-末端氨基酸序列测定,以及对该序列的同源性分析后,设计出相应引物,用PCR方法扩增了该菌株的碱性蛋白酶基因AP。测序结果表明,该克隆基因全长1588bp,有一个全长1149bp的编码区序列,推测蛋白质序列长383个氨基酸残基,成熟肽分子量为27.8kD。推测的成熟蛋白酶N′-末端具有与DHAPN′-末端完全匹配的序列,说明克隆到的基因为脱毛蛋白酶基因。同源性分析表明,该基因序列与已报道的其他碱性蛋白酶基因有较高的同源性。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 碱性蛋白酶基因 PCR 基因克隆 序列分析 制革业 脱毛工艺
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利用短小芽孢杆菌发酵马铃薯渣生产单细胞蛋白饲料的研究 被引量:13
10
作者 张向东 杨谦 +2 位作者 余佳 赵磊 范金霞 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期26-30,共5页
研究以在马铃薯淀粉生产过程中产生的马铃薯渣与汁水为原料,以短小芽孢杆菌ZY05为发酵菌种,优化马铃薯薯渣液态发酵生产单细胞蛋白饲料的工艺。初步确定了马铃薯薯渣与汁水发酵的适宜条件,具体为除菌种外不添加任何外源物质,pH自然,发... 研究以在马铃薯淀粉生产过程中产生的马铃薯渣与汁水为原料,以短小芽孢杆菌ZY05为发酵菌种,优化马铃薯薯渣液态发酵生产单细胞蛋白饲料的工艺。初步确定了马铃薯薯渣与汁水发酵的适宜条件,具体为除菌种外不添加任何外源物质,pH自然,发酵温度为37℃,转数为180r·min-1,发酵时间为120h。通过本项工艺获得的马铃薯渣与汁水发酵产物中单细胞蛋白含量达到19.23%,氨基酸组成均衡,并且经大鼠急性毒理试验证明无毒,经小鼠采食量与增重试验证明均优于同等质量的豆粕。利用短小芽孢杆菌发酵马铃薯渣生产单细胞蛋白饲料具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 马铃薯薯渣 好氧发酵 单细胞蛋白
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短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究 被引量:7
11
作者 吕文平 许梓荣 +2 位作者 孙建义 李卫芬 杜文理 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期679-683,共5页
提取短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)基因组,通过PCR克隆了短小芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因全长序列.结果表明:该基因全长754bp,ORF为717bp,编码239个氨基酸,计算分子量为26.98kD,等电点为6.08.经Blast分析,该序列与地衣芽孢杆菌同源性最高(... 提取短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)基因组,通过PCR克隆了短小芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因全长序列.结果表明:该基因全长754bp,ORF为717bp,编码239个氨基酸,计算分子量为26.98kD,等电点为6.08.经Blast分析,该序列与地衣芽孢杆菌同源性最高(91%),该基因首次在GenBank上登录(登录号AY164456).在克隆载体上亚克隆基因全长,构建重组表达载体pET-pum,导入大肠杆菌BL21中表达.SDS-PAGE电泳表明:在27kD左右有表达带,酶活较低(7.24U/mL),仅为出发菌酶活的16%,其最适温度为50℃左右,最适pH在5左右. 展开更多
关键词 Β-葡聚糖酶 短小芽孢杆菌 克隆 表达
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一株短小芽孢杆菌B1的筛选鉴定及其抗菌特性研究 被引量:19
12
作者 韦露 陈偿 +2 位作者 龙云映 蔡奕明 黄晓纯 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期161-168,共8页
为筛选抗水产弧菌的益生菌株,自西沙海域采集的珊瑚和海水样品共分离到125株细菌,从中筛选出1株无溶血性且对多株病原菌具有拮抗作用的海洋细菌B1。基于生理生化及16SrDNA序列鉴定海洋细菌B1为短小芽孢杆菌。以副溶血弧菌13150为病原指... 为筛选抗水产弧菌的益生菌株,自西沙海域采集的珊瑚和海水样品共分离到125株细菌,从中筛选出1株无溶血性且对多株病原菌具有拮抗作用的海洋细菌B1。基于生理生化及16SrDNA序列鉴定海洋细菌B1为短小芽孢杆菌。以副溶血弧菌13150为病原指示菌,用琼脂扩散法测定发酵液抑菌活性,并通过卤虫浸泡方式和药敏试验方法检测短小芽孢杆菌B1的安全性,同时进行温度、酸碱度、盐度的发酵条件优化研究。试验结果显示,短小芽孢杆菌B1对副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈氏弧菌等有显著的拮抗作用;共培养试验显示,加入等量短小芽孢杆菌B1无菌上清液可显著抑制副溶血弧菌的生长;安全性试验发现,短小芽孢杆菌B1对卤虫的72h半致死密度为108cfu/mL,副溶血弧菌13150的72h半致死密度为105cfu/mL。此外,药敏试验表明,短小芽孢杆菌B1只对20种常规抗生素中的5种产生抗性;优化后的短小芽孢杆菌B1发酵条件为:温度30℃,pH 7.0,NaCl质量分数为2%。研究表明,短小芽孢杆菌B1具有防治水产养殖病原弧菌的应用潜力。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 筛选 鉴定 抗菌特性
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短小芽孢杆菌EN16诱导番茄对细菌性青枯病的抗性 被引量:12
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作者 连玲丽 谢荔岩 +1 位作者 郑璐平 林奇英 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第5期460-464,共5页
采用盆栽试验法研究了短小芽孢杆菌EN16对番茄青枯病的诱导抗病效应.结果表明,菌株EN16诱导番茄产生对青枯病的防病效果达到49.45%-68.89%;分别在挑战接种间隔期为7-10 d、菌株灌根接种2种处理条件下,菌株EN16表现出较好的诱导抗病效果... 采用盆栽试验法研究了短小芽孢杆菌EN16对番茄青枯病的诱导抗病效应.结果表明,菌株EN16诱导番茄产生对青枯病的防病效果达到49.45%-68.89%;分别在挑战接种间隔期为7-10 d、菌株灌根接种2种处理条件下,菌株EN16表现出较好的诱导抗病效果.测定EN16处理对番茄叶片中几种防御酶的影响,结果显示,在病菌挑战接种前后菌株EN16处理均能引起过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)等防御酶活性的显著增强. 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 防御酶 细菌性青枯病 诱导抗性
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一株藏绵羊源短小芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:13
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作者 郭政宏 周彪 严亨秀 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第6期1610-1617,共8页
为获得来源于藏绵羊的益生菌菌株,对健康母藏绵羊新鲜粪便进行90℃水浴处理5min以筛选具有抗逆性的芽孢杆菌,再综合形态学、生理生化特征及16SrDNA序列分析进行鉴定,通过抑菌试验、耐酸、耐胆盐试验及产水解酶试验等方法对其生物学特性... 为获得来源于藏绵羊的益生菌菌株,对健康母藏绵羊新鲜粪便进行90℃水浴处理5min以筛选具有抗逆性的芽孢杆菌,再综合形态学、生理生化特征及16SrDNA序列分析进行鉴定,通过抑菌试验、耐酸、耐胆盐试验及产水解酶试验等方法对其生物学特性进行研究。结果显示,从新鲜粪便样品中分离到的芽孢杆菌菌株SWUN-G43对大肠杆菌和沙门氏菌有明显的抑菌效果,通过分析鉴定其为短小芽孢杆菌,该菌株在pH 2.0的环境中存活率为50.43%,在0.3%胆盐环境中存活率为44.35%,可产生蛋白酶和纤维素酶,对12种常用的抗生素具有很高的敏感性。从试验结果可分析出该短小芽孢杆菌(SWUN-G43)有一定的抗逆性和潜在的益生能力,且该菌株不含耐药质粒,不会在动物肠道微生态系统中造成抗生素抗性的水平传递,具有作为微生态添加剂开发的潜力。 展开更多
关键词 藏绵羊 短小芽孢杆菌 分离 鉴定 特性
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短小芽孢杆菌BX-4抗生素标记及定殖效果研究 被引量:11
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作者 肖相政 刘可星 廖宗文 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1172-1176,共5页
为研究短小芽孢杆菌BX-4在作物根际的定殖及防病效果,通过浓度梯度法用氨苄青霉素对其进行了抗性标记,并通过番茄盆栽试验研究了其在根际土壤中的定殖规律。结果表明,筛选出的突变体菌株BX-4'能够耐受浓度为200 μg·mL^-1的氨... 为研究短小芽孢杆菌BX-4在作物根际的定殖及防病效果,通过浓度梯度法用氨苄青霉素对其进行了抗性标记,并通过番茄盆栽试验研究了其在根际土壤中的定殖规律。结果表明,筛选出的突变体菌株BX-4'能够耐受浓度为200 μg·mL^-1的氨苄青霉素,并且具有耐药和遗传双重稳定性;应用试验显示该突变体菌株能成功在番茄根际定殖,接种20 d后根际土壤中存活数量达到最高值1.34×10^8 cfu·g^-1干土,以后逐渐下降,到50 d时趋于稳定;筛选的突变体菌株对番茄青枯病具有明显的防治效果,防效达37.9%-50.9%。短小芽孢杆菌BX-4在作物根部的定殖规律为揭示其生防机理及应用该菌提供了科学根据。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 抗生素抗性 定殖效果
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短小芽孢杆菌D82对小麦根腐病原菌拮抗的研究 被引量:26
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作者 崔云龙 姬金红 衣海青 《中国生物防治》 CSCD 1995年第3期114-118,共5页
平板培养结果表明,短小芽孢杆菌D82对小麦根腐病有强抗生作用,共同培养至第4天,抑菌圈直径为4~5.5cm;发酵液稀释平板培养结果表明,稀释浓度100倍以下的抑菌效果为100%。1000倍、2000倍、4000倍稀释液的抑菌效果分别为64%、54%... 平板培养结果表明,短小芽孢杆菌D82对小麦根腐病有强抗生作用,共同培养至第4天,抑菌圈直径为4~5.5cm;发酵液稀释平板培养结果表明,稀释浓度100倍以下的抑菌效果为100%。1000倍、2000倍、4000倍稀释液的抑菌效果分别为64%、54%和34%。盆栽试验结果表明,菌液原液浸种对带毒种子的防病效果达100%,对人工接种病原菌的防病效果达95%。热稳定性试验结果表明,100℃以下温度热处理60分钟,抑菌活性基本不受影响,121C热处理30分钟,抑菌活性仅降低20%。显微镜观察结果表明,小麦根腐病原菌被D82抗生物质处理后,菌丝的原生质凝集、膨大、畸形,分生孢子不发芽或发芽异常。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 D82 小麦 根腐病 拮抗
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GFP标记短小芽孢杆菌LYMC-3在马尾松体内的定殖 被引量:7
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作者 李亮亮 谈家金 陈凤毛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期68-73,共6页
为研究松材线虫拮抗细菌短小芽孢杆菌LYMC-3的内生性及其在马尾松体内的定殖规律,采用扫描电子显微镜(SEM)观察菌株在马尾松组培苗体内的定殖,并采用高渗透法将质粒pGFP78转入菌株LYMC-3,对其进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,同时测定标记菌... 为研究松材线虫拮抗细菌短小芽孢杆菌LYMC-3的内生性及其在马尾松体内的定殖规律,采用扫描电子显微镜(SEM)观察菌株在马尾松组培苗体内的定殖,并采用高渗透法将质粒pGFP78转入菌株LYMC-3,对其进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,同时测定标记菌株的遗传稳定性。在此基础上,以GFP标记和抗性标记作为示踪手段,将标记菌株接种到2年生马尾松盆栽实生苗的根部,借助激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和稀释涂板的方法,对马尾松根部、茎部的标记菌株进行定期回收检测。结果显示,通过SEM成功观察到菌株LYMC-3在马尾松体内的定殖,并成功获得LYMC-3菌株荧光表达强烈且遗传稳定的转化子,经过连续8次的稀释培养,其遗传稳定性为96.8%。GFP标记菌株在接种马尾松根部后的第4天,根部、茎部都能回收到大量标记菌株的存在,随后呈持续下降的趋势,且根部的下降速度快于茎部。接种40d后,根部回收标记菌株数量为0.3×102cfu/g,茎部回收标记菌株数量为0.8×102cfu/g。以上结果表明短小芽孢杆菌LYMC-3具有内生性,能在马尾松体内良好地定殖和传导。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 马尾松 绿色荧光蛋白 遗传稳定性 定殖
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短小芽孢杆菌A-30耐碱性木聚糖酶的纯化及性质研究 被引量:21
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作者 陈士成 曲音波 +1 位作者 刘相梅 高培基 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第5期698-701,共4页
The extracellular xylanase from the crude culture filtration of Bacillus pumilus A 30 was purified by ammonium sulfate fractionation,CM Sephadex C 50,DEAE Sephadex A 50 and Bio gel P 30 chromatographies.SDS PAGE analy... The extracellular xylanase from the crude culture filtration of Bacillus pumilus A 30 was purified by ammonium sulfate fractionation,CM Sephadex C 50,DEAE Sephadex A 50 and Bio gel P 30 chromatographies.SDS PAGE analysis indicated that the xylanase had molecular weight 23 kD.Its isoelectric point p I 8.5 was determined by IEF PAGE.Its temperature optima for the activity and its optimum pH was 50℃ and 7.5 respectively.It was stable in a broad pH range and showed good stability below 50℃。Its activity was strongly inhibited by Ag +,Cu 2+ ,Fe 3+ ,Co 2+ ,Hg 2+ ,Zn 2+ ,Al 3+ and increased dramatically by Mg 2+ ,Ca 2+ .Its K m and V m were 7.42 mg·ml -1 and 654 μmol·min -1 ·mg -1 respectively. 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 耐碱性 木聚糖酶 纯化 酶学性质
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短小芽孢杆菌脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 被引量:4
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作者 苏二正 吴向萍 +1 位作者 高蓓 魏东芝 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期132-138,共7页
从土壤样品中通过筛菌过程获得一株产脂肪酶的菌株,经16S rRNA鉴定属于短小芽孢杆菌,根据已报道的来源于芽孢杆菌的脂肪酶基因设计引物,克隆获得其全长基因,命名为lipS6,大小为648 bp,编码215个氨基酸,经比对其与已报道的脂肪酶基因B26... 从土壤样品中通过筛菌过程获得一株产脂肪酶的菌株,经16S rRNA鉴定属于短小芽孢杆菌,根据已报道的来源于芽孢杆菌的脂肪酶基因设计引物,克隆获得其全长基因,命名为lipS6,大小为648 bp,编码215个氨基酸,经比对其与已报道的脂肪酶基因B26有96%的同源性。构建重组表达质粒pET32a-lipS6,在大肠杆菌中实现了可溶表达,酶活达到2 000 U/mL。重组脂肪酶LipS6的最适温度为30℃,最适pH为9,低浓度的Ca2+与Mn2+对其有很明显的激活作用,疏水性有机溶剂对其毒害作用小,在正己烷体系中可以催化酯化反应,最适酯化底物酸为十四酸,底物醇为正丁醇。 展开更多
关键词 脂肪酶 短小芽孢杆菌 基因克隆 重组表达 性质
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利用血红蛋白基因提高短小芽孢杆菌在低氧条件下的碱性蛋白酶产量 被引量:3
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作者 张风豪 王海燕 +4 位作者 何明雄 李羚锐 杨春晖 葛建 张义正 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期755-760,共6页
将透明颤菌血红蛋白基因vgb成熟肽编码区序列分别与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)P43双启动子和短小芽孢杆菌(B. pumilus)碱性蛋白酶基因启动子wBp连接,利用大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pSUGV4分别构建组成型表达质粒pSUP43Vgb... 将透明颤菌血红蛋白基因vgb成熟肽编码区序列分别与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)P43双启动子和短小芽孢杆菌(B. pumilus)碱性蛋白酶基因启动子wBp连接,利用大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pSUGV4分别构建组成型表达质粒pSUP43Vgb和pSUwBpVgb,将其分别转化短小芽孢杆菌UN-31-C-11.SDS-PAGE和CO差异光谱检测表明,融合基因在UN-31-C-11中均得到了表达,并且表达质粒使重组菌株在低氧条件下的生长量在对数生长后期超过对照菌株20%以上,同时促进了短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因的表达,其产量高于对照30%以上. 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因(vgb) 基因启动子 穿梭载体 短小芽孢杆菌 基因表达
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