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稳定靶向干扰长链非编码RNA BC002811胃癌SGC-7901细胞株的构建
被引量:
4
1
作者
林小聪
陈小谊
+2 位作者
余华军
兰柳波
符伟玉
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2019年第4期364-368,共5页
目的 BC002811在胃癌中的生物学功能及其作用机制尚不明确。文中旨在构建长链非编码RNA (lncRNA BC002811的短发夹结构RNA (shRNA)重组慢病毒载体,建立稳定干扰BC002811表达的胃癌SGC-7901细胞株。方法实验根据不同BC002811 siRNA转染...
目的 BC002811在胃癌中的生物学功能及其作用机制尚不明确。文中旨在构建长链非编码RNA (lncRNA BC002811的短发夹结构RNA (shRNA)重组慢病毒载体,建立稳定干扰BC002811表达的胃癌SGC-7901细胞株。方法实验根据不同BC002811 siRNA转染人胃癌SGC-7901细胞分为:siRNA-1组(siRNA-1正义链及反义链)、siRNA-2组(siRNA-2正义链及反义链)、siRNA-3组(siRNA-3正义链及反义链)、对照组(siRNA-NC正义链及反义链)。取SGC-7901细胞内对BC002811表达抑制效果最明显的siRNA序列构建shRNA慢病毒载体,定义为shRNA组。包装重组慢病毒及测定滴度,建立稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株,MTS法检测细胞增殖能力。结果 siRNA-1组SGC-7901细胞内BC002811的RNA干扰效率较其他组升高。因此,后续实验选择siRNA-1设计BC002811 shRNA。对照组、shRNA组的病毒滴度分别为4.5×108、3.7×10~8TU/mL,提示病毒已包装成功。shRNA组BC002811表达水平[(10%±1%)]较对照组明显降低[(100%±4%)],差异有统计学意义(P<0.01),提示稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株构建成功。与对照组比较,shRNA组的SGC-7901细胞生长速度明显减慢(P<0.05),提示下调BC002811表达可抑制SGC-7901细胞增殖。结论成功建立了稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株,为BC002811在胃癌中的功能及其作用机制研究奠定了基础。
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关键词
胃癌
长链非编码
rna
慢病毒
短发夹结构rna
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题名
稳定靶向干扰长链非编码RNA BC002811胃癌SGC-7901细胞株的构建
被引量:
4
1
作者
林小聪
陈小谊
余华军
兰柳波
符伟玉
机构
广东医科大学生物化学与分子生物学研究所
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2019年第4期364-368,共5页
基金
广东省自然科学基金(2016A030313677)
广东医科大学博士学位人员和人才引进人员科研启动项目(B2017002)
文摘
目的 BC002811在胃癌中的生物学功能及其作用机制尚不明确。文中旨在构建长链非编码RNA (lncRNA BC002811的短发夹结构RNA (shRNA)重组慢病毒载体,建立稳定干扰BC002811表达的胃癌SGC-7901细胞株。方法实验根据不同BC002811 siRNA转染人胃癌SGC-7901细胞分为:siRNA-1组(siRNA-1正义链及反义链)、siRNA-2组(siRNA-2正义链及反义链)、siRNA-3组(siRNA-3正义链及反义链)、对照组(siRNA-NC正义链及反义链)。取SGC-7901细胞内对BC002811表达抑制效果最明显的siRNA序列构建shRNA慢病毒载体,定义为shRNA组。包装重组慢病毒及测定滴度,建立稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株,MTS法检测细胞增殖能力。结果 siRNA-1组SGC-7901细胞内BC002811的RNA干扰效率较其他组升高。因此,后续实验选择siRNA-1设计BC002811 shRNA。对照组、shRNA组的病毒滴度分别为4.5×108、3.7×10~8TU/mL,提示病毒已包装成功。shRNA组BC002811表达水平[(10%±1%)]较对照组明显降低[(100%±4%)],差异有统计学意义(P<0.01),提示稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株构建成功。与对照组比较,shRNA组的SGC-7901细胞生长速度明显减慢(P<0.05),提示下调BC002811表达可抑制SGC-7901细胞增殖。结论成功建立了稳定靶向干扰BC002811表达的SGC-7901胃癌细胞株,为BC002811在胃癌中的功能及其作用机制研究奠定了基础。
关键词
胃癌
长链非编码
rna
慢病毒
短发夹结构rna
Keywords
gastric cancer
long non-coding
rna
lentivirus
short hairpin
rna
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
稳定靶向干扰长链非编码RNA BC002811胃癌SGC-7901细胞株的构建
林小聪
陈小谊
余华军
兰柳波
符伟玉
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2019
4
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