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矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)通过靶向TOPK抑制结直肠癌细胞的增殖 被引量:6
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作者 王丽 刘锋瑞 +2 位作者 刘亚娟 高红艳 董明清 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1101-1108,共8页
目的研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对结直肠癌增殖的影响及机制。方法采用体外结合及体外激酶实验检测C3G与T细胞淋巴因子活化杀伤细胞来源的蛋白激酶(TOPK)的结合能力及对其活性的影响;采用软琼脂试验检测C3G对结肠癌细胞克隆形成能... 目的研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对结直肠癌增殖的影响及机制。方法采用体外结合及体外激酶实验检测C3G与T细胞淋巴因子活化杀伤细胞来源的蛋白激酶(TOPK)的结合能力及对其活性的影响;采用软琼脂试验检测C3G对结肠癌细胞克隆形成能力的影响;采用MTS法测定C3G的细胞毒性;采用大肠杆菌BL21表达GST-组蛋白H3融合蛋白;采用慢病毒感染的方法,检测C3G对沉默TOPK的结肠癌细胞克隆形成能力的影响;Western blot法检测HCT116细胞中C3G对TOPK下游分子组蛋白H3的磷酸化的水平;建立结肠癌患者癌组织异种移植小鼠模型,免疫组织化学染色法检测组蛋白H3的磷酸化水平。结果C3G在体外直接与TOPK结合并抑制TOPK活性;C3G以浓度依赖的方式抑制结肠癌细胞的增殖及克隆形成;沉默TOPK降低结肠癌细胞对C3G的敏感性;C3G以时间和浓度依赖的方式抑制TOPK下游分子组蛋白H3的磷酸化水平;另外,C3G抑制患者来源的结肠癌组织异种移植瘤小鼠体内肿瘤的生长。结论C3G通过靶向TOPK抑制结直肠癌的生长。 展开更多
关键词 矢车菊-3-O-葡萄糖苷(c3g) T细胞淋巴因子活化杀伤细胞来源的蛋白激酶(TOPK) 结直肠癌
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矢车菊素-3-葡萄糖苷与四种乳蛋白相互作用的研究 被引量:2
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作者 王鑫 赵磊 +3 位作者 郝帅 刘国荣 王成涛 朱金锦 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第17期1-8,15,共9页
采用荧光光谱法、傅里叶红外光谱法和圆二色谱法,研究矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin 3-O-glucoside,C3G)与α-酪蛋白、β-酪蛋白、乳清蛋白和β-乳球蛋白的相互作用。结果表明,C3G对上述四种乳蛋白都产生了荧光静态猝灭作用,在溶液中C3... 采用荧光光谱法、傅里叶红外光谱法和圆二色谱法,研究矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin 3-O-glucoside,C3G)与α-酪蛋白、β-酪蛋白、乳清蛋白和β-乳球蛋白的相互作用。结果表明,C3G对上述四种乳蛋白都产生了荧光静态猝灭作用,在溶液中C3G与乳蛋白相互结合摩尔比约为1∶1,且由热力学参数判定C3G与α-酪蛋白结合的分子间作用力为氢键与范德华力,而与β-酪蛋白、乳清蛋白和β-乳球蛋白结合主要靠静电引力。通过比较C3G与α-酪蛋白、β-酪蛋白、乳清蛋白和β-乳球蛋白相互作用的荧光猝灭率(84%、74%、77%、75%);温度分别为298、318、338 K时的结合常数(423.448、362.994、28.655×10~4L/mol;9.524、8.056、8.308×10~4L/mol;9.262、6.940、7.889×10~4L/mol;30.440、11.830、17.262×10~4L/mol);结合距离(2.17、2.66、2.18、2.19 nm),由此得出α-酪蛋白与C3G结合最紧密。傅里叶红外光谱和圆二色谱分析显示,C3G的加入使得α-酪蛋白的α-螺旋增加,β-折叠和转角降低;β-酪蛋白的α-螺旋、β-折叠和转角均增加;乳清蛋白的α-螺旋、β-折叠和转角均无明显变化;β-乳球蛋白的α-螺旋降低,β-折叠和转角增加。C3G对四种乳蛋白均有较强的结合能力,可以使其构象发生变化。 展开更多
关键词 矢车菊-3-葡萄糖苷(c3g) 乳蛋白 荧光光谱 红外光谱 圆二色谱
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矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对H_2O_2诱导细胞氧化损伤的保护作用 被引量:6
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作者 刘迪 孙宏宇 +3 位作者 时文艳 陈为 马爱新 冯宪敏 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第6期273-278,共6页
目的:研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对人胚肾HEK-293细胞氧化损伤的保护作用。方法:通过检测细胞活力、活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)水平考察C3G对氧化损伤细胞的影响,并采用Western blot法和q RTPCR检测Nrf2和Keap1的蛋白表达量和m ... 目的:研究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对人胚肾HEK-293细胞氧化损伤的保护作用。方法:通过检测细胞活力、活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)水平考察C3G对氧化损伤细胞的影响,并采用Western blot法和q RTPCR检测Nrf2和Keap1的蛋白表达量和m RNA表达量变化。结果表明:C3G预处理氧化应激细胞后,细胞活力显著高于H_2O_2损伤组(p <0.05),并呈浓度依赖性提高; H_2O_2损伤组的DCF荧光强于对照组,ROS相对含量增加到近2倍,1.25、5、20μmol/L C3G预处理后细胞荧光强度逐渐减弱,ROS相对量呈浓度依赖性降低; C3G预处理后细胞MDA水平呈浓度依赖性降低; 1.25、5、20μmol/L C3G处理后,Nrf2的m RNA表达和蛋白表达量均呈浓度依赖性上调,Keap1蛋白表达量显著低于H_2O_2损伤组(p <0.05),5和20μmol/L C3G对Keap1的m RNA下调作用明显。结论:矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对HEK-293细胞有保护作用,可降低细胞ROS和MDA水平,其作用机制可能是通过激活Nrf2/Keap1信号通路以抵抗H_2O_2导致的细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 矢车菊-3-O-葡萄糖苷(c3g) 氧化应激 NRF2 信号通路
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桑椹成熟期间1-脱氧野尻霉素和主要花青素含量及相关基因表达的变化规律研究 被引量:1
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作者 金勤生 朱俭勋 +5 位作者 钟石 孙雨晴 李有贵 霍进喜 吕志强 计东风 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期799-804,共6页
桑椹具有较高的营养价值和保健功能,其主要生物活性成分包括生物碱1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)以及矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)和矢车菊素-3-芸香糖苷(cyanidin-3-O-rutinoside,C3R)等花青素。利用高... 桑椹具有较高的营养价值和保健功能,其主要生物活性成分包括生物碱1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)以及矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)和矢车菊素-3-芸香糖苷(cyanidin-3-O-rutinoside,C3R)等花青素。利用高效液相色谱法检测桑椹成熟期间DNJ、C3G、C3R含量,用实时荧光定量PCR法检测相关基因表达水平的变化情况。结果显示,在桑椹变红前,DNJ含量较高,质量分数最高达到0.246%,但C3G和C3R未能被检测到;随着桑椹的成熟,DNJ含量迅速下降,到完全成熟后质量分数仅有0.006%,而C3G和C3R含量逐渐升高并趋于稳定,最终C3G质量分数稳定在1%左右,C3R质量分数稳定在0.6%左右。DNJ合成路径上相关的赖氨酸脱羧酶(lysine decarboxylase,LDC)和铜胺氧化酶(copper amine oxidase,CAO)编码基因LDC、CAO1、CAO2、CAO4的表达量在桑椹未变红前为逐渐升高,后迅速下降,而CAO3表达量一直逐渐降低;花青素合成关键酶基因4CL和CHI表达量在桑椹变红前逐渐升高,后迅速降低,而CHS表达量在桑椹变红前较低,后迅速升高并持续维持较高水平。研究结果不仅为药用桑椹的采收提供了指导,也为果桑分子育种提供了理论依据。 展开更多
关键词 桑椹 1-脱氧野尻霉 矢车菊-3-葡萄糖苷 矢车菊-3-芸香糖苷 含量 基因表达
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桑葚花色苷对PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量:4
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作者 朱晓晗 铁芳芳 +2 位作者 欧阳健 王洪伦 殷军港 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期105-113,共9页
通过建立大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)氧化应激损伤模型,探讨桑葚花青素中2个矢车菊素类化合物即矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)和矢车菊素-3-O-芸香糖苷(cyanidin-3-O-rutinoside,C3R)对过氧化氢(H_(2)O_(... 通过建立大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)氧化应激损伤模型,探讨桑葚花青素中2个矢车菊素类化合物即矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)和矢车菊素-3-O-芸香糖苷(cyanidin-3-O-rutinoside,C3R)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的细胞氧化损伤的保护作用及相关作用机制。采用噻唑蓝法检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,试剂盒测定细胞中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)以及过氧化氢酶(catalase,CAT)的水平。Western Blot检测抗氧化以及细胞凋亡蛋白的表达水平。结果表明,650μmol/L H_(2)O_(2)处理PC12细胞12 h后,细胞存活率显著降低(P<0.01),50、100μmol/L的C3G、C3R能显著升高细胞活力(P<0.05)及GSH、SOD和CAT等抗氧化酶的活性(P<0.05),降低细胞内ROS以及MDA的含量。此外50、100μmol/L的C3G、C3R处理后显著抑制PC12细胞内c-Jun氨基末端激酶和细胞外调节蛋白激酶蛋白磷酸化水平,抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3以及Bcl-2相关X蛋白等凋亡蛋白的表达(P<0.05),促进核因子E-2-相关因子和血红素加氧酶1抗氧化蛋白的表达水平。综上,C3G、C3R对H_(2)O_(2)所致的PC12细胞氧化损伤具有保护作用,可能与抑制细胞凋亡通路相关蛋白的表达,提高胞内抗氧化酶活性,清除胞内过量ROS,降低细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 桑葚花色苷 矢车菊-3-O-葡萄糖苷 矢车菊-3-O-芸香糖苷 Pc12细胞 氧化应激 细胞凋亡
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