-
题名石蒜同源基因沉默体系构建及鳞茎发生基因功能验证
被引量：1
- 1
-
-
作者
肖潇
夏宜平
崔柳
张佳平
洪震
任梓铭
-
机构
浙江大学农业与生物技术学院
浙江理工大学建筑工程学院风景园林系
华东药用植物园科研管理中心
-
出处
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
北大核心
2025年第1期89-101,共13页
-
基金
浙江省基础公益研究计划项目(ZCLTGN24C1601)
浙江省农业新品种重大专项花卉育种专项(2021C02071-6)
国家自然科学基金项目(32101571)。
-
文摘
本研究以浙江省野生资源丰富的海滨石蒜(Lycoris insularis)为材料,构建了以鳞茎为外植体的石蒜同源基因沉默体系,并通过该体系验证了海滨石蒜鳞茎发生基因的生物功能。通过设计特异性引物,从鳞茎中克隆获得LiCWIN基因片段,全长1 706 bp;经双酶切后与烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus, TRV)载体TRV2-GFP连接,从而构建病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)重组载体;转化根癌农杆菌后,用菌液侵染损伤刺激后的鳞茎块。侵染2 d后,观察到鳞茎维管组织中存在绿色荧光;实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorogenic quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测发现,沉默组LiCWIN基因表达量显著降低。侵染40 d后,相较于空载体对照组,LiCWIN基因沉默组小鳞茎发生数量下降且发育迟缓。上述结果表明,VIGS体系在海滨石蒜鳞茎组织中成功沉默了功能基因,且对小鳞茎后期发育的表型产生了持续影响。特别是LiCWIN基因沉默后,小鳞茎发生受阻。本研究为石蒜鳞茎发生发育关键基因的功能研究奠定了基础。
-
关键词
石蒜属
基因功能
瞬时验证
病毒诱导的基因沉默
体系构建
CWIN基因
小鳞茎发生
-
Keywords
Lycoris Herb.
gene function
instantaneous verification
virus-induced gene silencing(VIGS)
system construction
CWIN gene
bulblet formation
-
分类号
S682.29
[农业科学—观赏园艺]
-
