薄荷醇通过激活瞬时受体电位M8(TRPM8)促进BEAS-2B人支气管上皮细胞的细胞因子分泌 被引量：4

1

作者 胡艺馨 李敏超 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期577-584,共8页

目的探讨瞬时受体电位M8(TRPM8)在薄荷醇诱导BEAS-2B人支气管上皮细胞表达气道上皮源性细胞因子白细胞介素25(IL-25)、IL-33和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)中的作用及其相关信号转导机制。方法用2 mmol/L薄荷醇处理BEAS-2B细胞1、2、3... 目的探讨瞬时受体电位M8(TRPM8)在薄荷醇诱导BEAS-2B人支气管上皮细胞表达气道上皮源性细胞因子白细胞介素25(IL-25)、IL-33和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)中的作用及其相关信号转导机制。方法用2 mmol/L薄荷醇处理BEAS-2B细胞1、2、3、4 h,选择IL-25、IL-33、TSLP或Ca^(2+)表达较高的时间组,通过小干涉RNA(siRNA)特异性敲低TRPM8(si-TRPM8),采用细胞内钙离子螯合剂1,2-二(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N′,N′-四乙酸四乙酰氧甲基酯(BAPTA-AM)及核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)处理。CCK-8法检测细胞活力;实时荧光定量PCR检测IL-25、IL-33和TSLP mRNA表达;ELISA检测培养上清液IL-25、IL-33和TSLP蛋白水平;Fluo-4 AM负载结合流式细胞术检测胞内Ca^(2+)荧光强度;Western blot法检测si-TRPM8对BEAS-2B细胞合成TRPM8蛋白的干扰效率及NF-κB p65蛋白表达的影响。结果与空白对照组比,薄荷醇组IL-25、IL-33、TSLP mRNA及蛋白、胞内Ca^(2+)水平和NF-κB p65蛋白表达均增加;敲低TRPM8后,抑制薄荷醇诱导的Ca^(2+)、IL-25、IL-33、TSLP和NF-κB p65表达增加,BAPTA-AM和PDTC均可抑制薄荷醇诱导的IL-25、IL-33和TSLP的高表达。结论薄荷醇通过激活TRPM8引起Ca^(2+)浓度升高、激活NF-κB通路诱导BEAS-2B支气管上皮细胞IL-25、IL-33和TSLP的分泌。 展开更多

关键词 瞬时受体电位m8(trpm8) BEAS-2B细胞 钙离子 人支气管上皮细胞 白细胞介素25(IL-25) IL-33 胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)

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瞬时受体电位通道家族M8型受体转基因小鼠模型的建立 被引量：2

2

作者 马双陶 曹廷兵 +5 位作者 马丽群 罗志丹 郝新忠 王利娟 刘道燕 祝之明 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期251-254,共4页

目的建立瞬时受体电位通道家族M8型受体(TRPM8)转基因小鼠模型。方法通过显微注射法将pcDNA3.1-h Trpm8导入C57BL/6J×CBA F1小鼠的受精卵中,并将其移植到假孕母鼠输卵管中获得子代小鼠。采用PCR方法鉴定子代基因型,通过RT-PCR和免... 目的建立瞬时受体电位通道家族M8型受体(TRPM8)转基因小鼠模型。方法通过显微注射法将pcDNA3.1-h Trpm8导入C57BL/6J×CBA F1小鼠的受精卵中,并将其移植到假孕母鼠输卵管中获得子代小鼠。采用PCR方法鉴定子代基因型,通过RT-PCR和免疫印迹法检测Trpm8基因及蛋白在组织中的表达。结果将405枚注射受精卵移植给15只假孕鼠,其中13只顺利妊娠并产下95只子鼠,经PCR鉴定得到5只转基因阳性首建鼠,其中4只小鼠可稳定传代,经与C57BL/6J小鼠回交7代后互交数代建系。子代转基因小鼠经RT-PCR检测发现Trpm8基因在心脏、肝脏、肾脏、脂肪和骨骼肌中均有表达,且TRPM8蛋白表达在转基因小鼠中显著增加。结论通过显微注射法成功建立了Trpm8转基因小鼠模型。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道家族m8型受体 显微注射法 转基因小鼠

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瞬时受体电位M8离子通道功能及其翻译后修饰调节机制 被引量：3

3

作者 赵纬纬 黄渊 唐景峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1458-1466,共9页

瞬时受体电位M8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)又称冷及薄荷醇感受器,位于细胞膜或细胞器膜上,是瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道超家族中的一员。TRPM8通道分布广泛,是一个非选择性阳离子通道... 瞬时受体电位M8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)又称冷及薄荷醇感受器,位于细胞膜或细胞器膜上,是瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道超家族中的一员。TRPM8通道分布广泛,是一个非选择性阳离子通道,可作为冷热传感器和冷痛传感器进行信号传导,参与众多生物过程的调节,在维持细胞内外稳态、控制离子进出细胞方面具有重要作用。研究发现,蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM)通过调控TRPM8通道的功能,进而影响多种疾病的发生和发展。因此,探究TRPM8的翻译后修饰的过程,对深入了解TRPM8的功能及调控机制是十分必要的。目前,已报道的TRPM8翻译后修饰包括磷酸化、泛素化和糖基化等,它们能够调控蛋白质的相互作用和改变TRPM8离子通道的活性,从而调控细胞增殖、迁移和凋亡。值得注意的是,TRPM8的表达与前列腺癌、膀胱癌和乳腺癌等多种癌症密切相关。本文将从TRPM8离子通道的结构出发,系统地阐述TRPM8蛋白翻译后修饰和激动剂、拮抗剂以及一些蛋白质对TRPM8通道活性的调节,同时总结TRPM8在前列腺癌、膀胱癌和乳腺癌中的新进展,为癌症治疗提供新方向和新思路。 展开更多

关键词 瞬时受体电位m8 通道结构 蛋白质修饰 激活剂 拮抗剂

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瞬时受体电位通道M8调控NCR1/NKP46通路抑制胶质瘤细胞免疫逃逸的作用研究

4

作者 徐华 张海萍 +3 位作者 王虹伊 杨苗 赵钦 马蕾 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1834-1840,共7页

目的:探讨瞬时受体电位通道M8(TRPM8)对胶质瘤细胞免疫逃逸的影响,并初步探究可能的作用机制。方法:通过实时荧光定量PCR法检测人正常胶质细胞株(SVGp12)与3种胶质瘤细胞株(U251、U373、T98G)中TRPM8基因表达;将U251细胞随机分为空白对... 目的:探讨瞬时受体电位通道M8(TRPM8)对胶质瘤细胞免疫逃逸的影响,并初步探究可能的作用机制。方法:通过实时荧光定量PCR法检测人正常胶质细胞株(SVGp12)与3种胶质瘤细胞株(U251、U373、T98G)中TRPM8基因表达;将U251细胞随机分为空白对照组、TRPM8-siRNA组、NC-siRNA组、pcDNA3.1-TRPM8组和pcDNA3.1-NC组,利用脂质体分别将TRPM8-siRNA、NC-siRNA、pcDNA3.1-TRPM8和pcDNA3.1-NC转染至U251细胞中,采用实时荧光定量PCR法和Western blot检测细胞中TRPM8基因和蛋白表达,CCK-8法、集落形成实验和流式细胞术检测细胞增殖、克隆形成及凋亡情况,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK92细胞对U251细胞的杀伤作用,ELISA法检测TNF-α、IL-2、IL-6、IFN-γ水平,流式细胞术、Western blot检测细胞调节区域因子1(NCR1)与自然杀伤因子蛋白46(NKP46)的表达。结果:3种胶质瘤细胞株U251、U373、T98G中TRPM8 mRNA表达水平均显著高于正常胶质细胞株SVGp12,其中U251细胞最高;与空白对照组相比,TRPM8-siRNA组TRPM8 mRNA和蛋白的相对表达量均下调(P<0.01),细胞活性下降(P<0.05),细胞克隆形成数目减少(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01),NK92细胞对U251细胞的杀伤率提高(P<0.01),细胞上清液中TNF-α、IL-2、IL-6及IFN-γ水平均下降(P<0.01),同时,NCR1、NKP46表达也明显增加(P<0.01);与空白对照组相比,pcDNA3.1-TRPM8组TRPM8 mRNA和蛋白的相对表达量均上调(P<0.01),细胞活性升高(P<0.05),细胞克隆形成数目增加而凋亡率下降(P<0.01),NK92细胞对U251细胞的杀伤率下降(P<0.01),细胞上清液中TNF-α、IL-2、IL-6及IFN-γ水平均升高(P<0.01),NCR1、NKP46表达减少(P<0.01)。结论:抑制TRPM8表达能够调控胶质瘤微环境中免疫抑制状态,增强NK92细胞杀伤U251细胞的能力,削弱肿瘤细胞的免疫逃逸能力,这可能与调控NCR1/NKP46通路相关。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道m8 胶质瘤 杀伤 免疫逃逸 肿瘤微环境

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冰片通过TRPM8减轻小鼠心肌梗死后炎症反应并抑制心脏重构 被引量：6

5

作者 何滢蓉 胡陶 +4 位作者 王武帅 杨曦 段清华 杜萱 王强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期456-464,共9页

目的:研究冰片(borneol)对小鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)后炎症反应和心脏重构的作用及可能机制。方法:8周龄野生型(wild-type,WT)C57BL/6小鼠和瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员8(transient receptor potential cation cha... 目的:研究冰片(borneol)对小鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)后炎症反应和心脏重构的作用及可能机制。方法:8周龄野生型(wild-type,WT)C57BL/6小鼠和瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员8(transient receptor potential cation channel subfamily M member 8,TRPM8)基因敲除(TRPM8 gene knockout,TRPM8−/−)小鼠随机分为假手术组和MI组,再分别用生理盐水(对照组)或冰片(冰片组)灌胃。绘制小鼠MI后生存曲线,28 d后超声心动图检测心脏功能,多导生理记录仪测量血流动力学参数,病理染色观察MI面积、心肌肥大和间质纤维化,并检测梗死交界区心肌中炎症反应情况。结果:在WT小鼠中,梗死交界区心肌组织中TRPM8表达显著增加(P<0.05),冰片对心脏中TRPM8表达无影响(P>0.05),但可提高小鼠生存率,缩小MI面积,抑制MI后心脏重构,改善心脏功能(P<0.05或P<0.01);在TRPM8−/−小鼠中,冰片对小鼠生存率、MI面积、心肌肥大、心肌纤维化和心脏功能未见明显影响(P>0.05)。在WT小鼠中,冰片可减少中性粒细胞和巨噬细胞的浸润(P<0.01),抑制炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)过度表达(P<0.05或P<0.01);而在TRPM8−/−小鼠中,冰片对炎症细胞数量和炎症因子表达未见明显影响(P>0.05)。结论:TRPM8可能是冰片在心脏的作用靶点;冰片可能通过TRPM8减轻MI后炎症反应和抑制心脏重构,改善小鼠MI后的心脏功能。 展开更多

关键词 心肌梗死 心脏重构 冰片 瞬时受体电位阳离子通道m亚家族成员8 炎症

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鞘内注射PDTC对神经病理性痛大鼠TRPM8受体表达的影响 被引量：3

6

作者 李周睿 曹欣娅 +2 位作者 秦榜勇 李清梅 刘晓红 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1102-1106,共5页

目的探讨NF-κB参与TRPM8受体在大鼠神经病理性痛觉调制中的作用。方法鞘内置管成功的SPF级健康雄性SD大鼠36只,4～6周龄,体重180～200g,采用随机数字表法分为三组:假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和NF-κB阻滞剂PDTC组(PDTC组),每... 目的探讨NF-κB参与TRPM8受体在大鼠神经病理性痛觉调制中的作用。方法鞘内置管成功的SPF级健康雄性SD大鼠36只,4～6周龄,体重180～200g,采用随机数字表法分为三组:假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和NF-κB阻滞剂PDTC组(PDTC组),每组12只。鞘内置管成功后第3天,NP组和PDTC组采用坐骨神经缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)法制备大鼠神经病理性痛模型;S组只游离坐骨神经不做损伤处理。三组大鼠术后1d开始连续鞘内注射,连续14d(2次/天),PDTC组鞘内注射PDTC 20μg/10μl(20μg PDTC溶于10μl生理盐水),注射完成后10μl生理盐水冲管,S组和NP组分别鞘内注射等容量生理盐水,三组大鼠分别于术前1d、术后1、3、7、10和14d鞘内给药后30min测定冷痛阈、热痛阈和机械痛阈。分别在术后7、14d处死大鼠,采用Western blot法检测背根神经节(DRG)中TRPM8受体和NF-κB p65蛋白含量。结果与S组比较,术后1～14dNP组冷痛阈明显降低、热痛阈明显缩短、机械痛阈明显降低(P<0.05);与NP组比较,术后3～14dPDTC组冷痛阈明显增多、热痛阈明显延长、机械痛阈明显升高(P<0.05)。与S组比较,术后7、14dNP组TRPM8受体和NF-κB p65蛋白含量明显升高(P<0.05);与NP组比较,术后7、14dPDTC组TRPM8受体和NF-κB p65蛋白含量明显降低(P<0.05)。结论大鼠DRG中TRPM8和NF-κB p65表达上调参与神经病理性痛的发生发展,抑制NF-κB活化可以减少TRPM8受体的表达上调并且改善大鼠痛觉过敏的症状。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道 trpm8 神经痛 神经节 脊 NF-κB

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郭江涛/杨帆研究员团队解析哺乳动物低温受体TRPM8的结构

7

《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期333-333,共1页

2022年6月3日,浙江大学基础医学院郭江涛/杨帆研究员团队在《自然·通讯》(Nature Communications)在线发表了题为“Structures of a mammalian TRPM8 in closed state”的研究论文(DOI:10.1038/s41467-022-30919-y)。研究人员首先... 2022年6月3日,浙江大学基础医学院郭江涛/杨帆研究员团队在《自然·通讯》(Nature Communications)在线发表了题为“Structures of a mammalian TRPM8 in closed state”的研究论文(DOI:10.1038/s41467-022-30919-y)。研究人员首先解析了小鼠瞬时受体电位(TRP)M8(MmTRPM8)在apo状态下的冷冻电镜结构,揭示了apo状态下完整的TRPM8通道孔区结构域,为解释TRPM8对钙离子的通透性提供了结构基础。 展开更多

关键词 trpm8 基础医学院 冷冻电镜 瞬时受体电位 APO 通透性 钙离子

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肺腺癌表达TRPM8蛋白的意义 被引量：1

8

作者 马洪明 黄远顺 +7 位作者 黄妙灵 张苗 陈洋 黄志宏 崔淼 梁婉玲 刘升明 蔡兴东 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1680-1689,共10页

目的:探讨肺腺癌表达瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员8(TRPM8)蛋白的意义。方法:收集112例肺腺癌患者的肿瘤组织标本,对其进行4~5年临床随访。免疫组织化学染色检测肿瘤组织中TRPM8蛋白的表达,分析TRPM8蛋白表达与肺腺癌患者临床特... 目的:探讨肺腺癌表达瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员8(TRPM8)蛋白的意义。方法:收集112例肺腺癌患者的肿瘤组织标本,对其进行4~5年临床随访。免疫组织化学染色检测肿瘤组织中TRPM8蛋白的表达,分析TRPM8蛋白表达与肺腺癌患者临床特征及预后的关系。培养A549肺腺癌细胞,通过感染慢病毒上调细胞中TRPM8蛋白的表达,CCK-8法及集落形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,划痕实验及Transwell实验观察细胞迁移和侵袭。培养H1299肺腺癌细胞,通过感染慢病毒上调细胞中TRPM8表达后,分别在免疫缺陷小鼠左右臀部皮下注射对应空载体细胞及上调TRPM8的细胞,分析TRPM8对移植瘤生长的影响。结果:肺腺癌组织存在TRPM8表达。TRPM8蛋白高表达的肺腺癌患者,其4~5年累积生存率高于TRPM8蛋白低表达的患者(P=0.017),且其肿瘤最大径小于低表达的患者(P=0.028)。上调A549细胞中TRPM8的表达后,细胞活力较空载体组和亲本细胞组显著减弱,形成的集落数显著减少,处于S期的细胞比例显著升高,迁移和侵袭能力显著下降(P<0.01)。与空载体对照细胞株比较,上调H1299细胞中TRPM8的表达后,其在免疫缺陷小鼠皮下的移植瘤生长速率显著下降,肿瘤重量显著降低(P<0.01)。结论:TPRM8在肺腺癌中具有抑癌作用,低表达TRPM8蛋白的肺腺癌患者预后不良。 展开更多

关键词 肺腺癌 瞬时受体电位阳离子通道m亚家族成员8 细胞增殖 细胞侵袭

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人气道上皮细胞感知冷刺激的受体机制 被引量：2

9

作者 李敏超 何叶 +2 位作者 Juliy M.Perelman Victor P.Kolosov 周向东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期2071-2076,共6页

目的探讨温度感受器瞬时受体电位蛋白-8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)在人气道上皮细胞感受冷刺激过程中发挥的作用及其机制。方法用薄荷醇及冷空气(18℃)刺激人气道上皮16HBE细胞:1以TRPM8通道特异性拮抗剂BCTC、... 目的探讨温度感受器瞬时受体电位蛋白-8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)在人气道上皮细胞感受冷刺激过程中发挥的作用及其机制。方法用薄荷醇及冷空气(18℃)刺激人气道上皮16HBE细胞:1以TRPM8通道特异性拮抗剂BCTC、TRPM8 shRNA为干预手段,动态观察在薄荷醇、冷刺激作用下细胞内Ca2+荧光强度变化来监测气道上皮细胞上TRPM8的功能;2以磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate,PIP2)荧光分子探针PLCδ1-PH-GFP转染细胞,通过动态观察各组细胞内PLCδ1-PH-GFP从细胞膜至细胞质的荧光转位变化来检测PIP2的动态变化来研究冷刺激作用下TRPM8的信号通路。结果 1细胞内相对钙离子浓度变化:薄荷醇组处理4 min后、冷刺激组处理6 min后分别为(5.80±0.34)、(5.02±0.36),明显高于对照组(1.04±0.12)、(1.03±0.08)(P<0.05),1 mmol/L薄荷醇组+BCTC组、1 mmol/L薄荷醇组+转染TRPM8 shRNA组最高值分别为(2.68±0.19)、(1.08±0.16),明显低于1 mmol/L薄荷醇组,18℃+BCTC组、18℃+转染TRPM8 shRNA组最高值分别为(1.77±0.22)、(1.02±0.18),明显低于18℃组(均P<0.05);2PLCδ1-PH-GFP从细胞膜至细胞质的转位变化(Fm/Fc值):1 mmol/L薄荷醇组、冷刺激组最高值分别为(0.90±0.01)、(0.90±0.01),明显高于对照组最高值(1.01±0.02)(P<0.05),细胞处理200 s时1 mmol/L薄荷醇+BCTC15μmol/L组、1 mmol/L薄荷醇组+转染TRPM8 shRNA组分别为(0.86±0.03)、(0.89±0.02),明显低于1 mmol/L薄荷醇组(0.36±0.06)(P<0.05),细胞处理220 s时18℃+BCTC15μmol/L组、18℃+转染TRPM8 shRNA组分别为(0.82±0.02)、(0.93±0.01),明显低于18℃组(0.40±0.06)(P<0.05)。结论TRPM8受体是人气道上皮细胞感受冷刺激的主要受体,并通过TRPM8→Ca2+→PLC→PIP2信号通路引起气道黏液高分泌等反应。 展开更多

关键词 气道上皮细胞 冷刺激 瞬时受体电位蛋白-8 CA^2+ PIP2

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薄荷醇通过mTOR活化促进人支气管上皮细胞气道炎症相关因子的表达 被引量：6

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作者 陈海博 李敏超 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1344-1349,共6页

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活化对薄荷醇诱导的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)气道炎症相关因子表达的影响及其机制。方法将细胞分为4组:正常对照组、薄荷醇组、雷帕霉素组、薄荷醇+雷帕霉素组。用CCK-8法检测细胞存活率,实时荧... 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活化对薄荷醇诱导的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)气道炎症相关因子表达的影响及其机制。方法将细胞分为4组:正常对照组、薄荷醇组、雷帕霉素组、薄荷醇+雷帕霉素组。用CCK-8法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测瞬时受体电位蛋白-8(TRPM8)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1βmRNA的表达,Western blot检测BEAS-2B中磷酸化的mTOR(p-mTOR)、TRPM8、TNF-α和IL-1β的蛋白表达。用流式细胞术检测胞内Ca2+荧光强度。结果与正常对照组相比,薄荷醇组中细胞TNF-α和IL-1βmRNA及蛋白表达升高,p-mTOR蛋白表达升高,胞内Ca2+浓度升高(P<0.05)。与正常对照组相比,雷帕霉素组中细胞TNF-α和IL-1βmRNA及蛋白表达均无差异(P>0.05),p-mTOR蛋白表达降低(P<0.05),胞内Ca2+浓度无差异(P>0.05)。与薄荷醇组相比,薄荷醇+雷帕霉素组中细胞TNF-α和IL-1βmRNA及蛋白表达降低,p-mTOR蛋白表达降低,胞内Ca2+浓度降低(P<0.05)。结论薄荷醇可能通过活化mTOR诱导胞内Ca2+浓度升高,进而促进气道炎症相关因子IL-1β和TNF-α的表达。 展开更多

关键词 人支气管上皮细胞 薄荷醇 瞬时受体电位蛋白-8 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 气道炎症

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薄荷醇对低压低氧诱导小鼠肺动脉高压的作用及机制研究 被引量：4

11

作者 王武帅 胡陶 +5 位作者 杨耀 何滢蓉 杨曦 段清华 杜萱 王强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期62-69,共8页

目的 探讨薄荷醇对低压低氧诱导小鼠肺动脉高压的作用和机制。方法 健康雄性10~12周C57小鼠、瞬时受体电位通道M8基因敲除(TRPM8-/-)小鼠各40只,分为对照组、薄荷醇组、低压低氧组、低压低氧+薄荷醇组,超声测量肺动脉加速时间(PAT)和肺... 目的 探讨薄荷醇对低压低氧诱导小鼠肺动脉高压的作用和机制。方法 健康雄性10~12周C57小鼠、瞬时受体电位通道M8基因敲除(TRPM8-/-)小鼠各40只,分为对照组、薄荷醇组、低压低氧组、低压低氧+薄荷醇组,超声测量肺动脉加速时间(PAT)和肺动脉射血时间(PET),右心导管测量右心室收缩压(RVSP),计算右心室肥厚指数(RVHI),观察肺小动脉重构(<100μm)情况,Western blot检测Krüppel样因子4(KLF-4)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)经低氧(3%氧浓度)、低氧+薄荷醇(100μmol·L^(-1))处理,测定增殖和迁移能力。结果 薄荷醇处理野生型小鼠后,PAT和PAT/PET比值增加(P<0.05),RVSP和RVHI降低(P<0.05),同时肺小动脉增厚和管腔狭窄程度减轻(P<0.05),KLF4表达增加(P<0.05)、PCNA表达降低(P<0.05);薄荷醇处理TRPM8-/-小鼠后,PAT、PAT/PET、RVSP、RVHI、KLF4、PCNA表达和肺血管重构均未见明显改变(P>0.05)。薄荷醇干预PASMCs后增殖、迁移能力下降(P<0.01、P<0.05)。结论薄荷醇可能通过TRPM8抑制PASMCs增殖、迁移,改善低压低氧诱导的小鼠肺血管重构和肺动脉高压,其机制可能与上调KLF4表达有关。 展开更多

关键词 薄荷醇 瞬时受体电位通道m8 Krüppel样因子4 低压低氧性肺动脉高压 肺血管重构 肺动脉平滑肌细胞

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薄荷醇增强白介素-13诱导的人支气管上皮细胞粘液蛋白5AC的合成与分泌 被引量：5

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作者 张明洋 王静 李敏超 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1432-1438,共7页

目的研究白细胞介素-13(IL-13)联合薄荷醇对人支气管上皮细胞(16HBE)黏液蛋白(MUC)5AC合成及分泌的影响,并探索瞬时受体电位通道(TRP)melastatin 8(TRPM8)和抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)在此环节中所起的作用。方法将16HBE细胞分为:... 目的研究白细胞介素-13(IL-13)联合薄荷醇对人支气管上皮细胞(16HBE)黏液蛋白(MUC)5AC合成及分泌的影响,并探索瞬时受体电位通道(TRP)melastatin 8(TRPM8)和抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)在此环节中所起的作用。方法将16HBE细胞分为:对照组、IL-13组(培养基加入终浓度10 ng/mL的IL-13连续刺激)、薄荷醇组(于第6天加入1 mmol/L薄荷醇刺激)、IL-13+薄荷醇组(IL-13连续刺激6 d后加入1 mmol/L薄荷醇刺激),观察各组MUC5AC表达量、胞内Ca2+浓度和Bcl-2表达;予以Bcl-2抑制剂ABT-263、TRPM8离子通道特异性抑制剂BCTC干预,观察两者对各组MUC5AC的影响及BCTC对胞内Ca2+浓度、Bcl-2表达的影响。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测各组细胞内Ca2+荧光强度,实时荧光定量PCR检测MUC5AC及Bcl-2mRNA水平,酶联免疫吸附法检测培养液中MUC5AC含量。结果IL-13组、薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组MUC5AC mRNA和蛋白的表达均明显高于对照组(P<0.05),且IL-13+薄荷醇组最高并于24 h达到最高峰(P<0.01);薄荷醇组、IL-13组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2mRNA表达均明显高于对照组(P<0.05),且IL-13+薄荷醇组最高(P<0.01);予以BCTC干预后,薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2mRNA、MUC5AC mRNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组(P<0.05),而IL-13组未发生明显变化(P>0.05);予以ABT-263干预后,各ABT-263干预组MUC5ACmRNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组(P<0.05)。结论IL-13联合薄荷醇对于16HBE细胞MUC5AC的合成及分泌产生协同效应,其机制可能与TRPM8受体诱导的Bcl-2协同性增强有关。 展开更多

关键词 支气管哮喘 白细胞介素-13 薄荷醇 黏液蛋白5AC 抗凋亡蛋白 瞬时受体电位melastatin 8

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温度敏感TRP通道与重大慢病的防控 被引量：1

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作者 祝之明 刘道燕 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期40-49,共10页

美国科学家David Julius和Ardem Patapoutian因辣椒素受体TRPV1和薄荷醇感受器TRPM8的突破性发现,揭示了温度感知的奥秘,由此获得了2021年诺贝尔生理学或医学奖。温度敏感性热通道TRPV1和冷通道TRPM8不仅在神经系统有丰富的表达,也存在... 美国科学家David Julius和Ardem Patapoutian因辣椒素受体TRPV1和薄荷醇感受器TRPM8的突破性发现,揭示了温度感知的奥秘,由此获得了2021年诺贝尔生理学或医学奖。温度敏感性热通道TRPV1和冷通道TRPM8不仅在神经系统有丰富的表达,也存在于心血管、脂肪、肝脏和肌肉等组织器官,但其生物学意义并不清楚。近30年来,研究发现TRPV1和TRPM8除感知环境温度的变化外,还有丰富的生物学效应,如痛觉,炎症反应等,有关瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道在机体稳态调控中的作用及其与疾病关联的研究在持续增长与不断深入。我们团队自2004年较早地将TRP通道引入心血管及代谢领域,并揭示其在心血管和代谢疾病中的作用与机制。预期今年的诺奖颁发将进一步推动温度敏感通道蛋白的研究在心血管及代谢领域的发展。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道 TRPV1 trpm8 代谢性心血管病

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