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瞬时受体电位家族香草醛1型受体转基因小鼠模型的建立 被引量:1
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作者 罗志丹 曹廷兵 +4 位作者 马丽群 梁琳琅 冯晓丽 王利娟 祝之明 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期181-183,共3页
目的建立瞬时受体电位家族香草醛1型受体(Trpv1)转基因小鼠模型。方法通过显微注射法把pcDNA3.1-rTrpv1导入C57BL/6J×CBAF1小鼠的受精卵雄原核中并移植到假孕母鼠输卵管内,用PCR方法鉴定子代基因型,用蛋白免疫印迹法检测TRPV1在组... 目的建立瞬时受体电位家族香草醛1型受体(Trpv1)转基因小鼠模型。方法通过显微注射法把pcDNA3.1-rTrpv1导入C57BL/6J×CBAF1小鼠的受精卵雄原核中并移植到假孕母鼠输卵管内,用PCR方法鉴定子代基因型,用蛋白免疫印迹法检测TRPV1在组织中的表达水平。结果将400枚注射卵移植到16只假孕母鼠的输卵管中,共出生小鼠120只,获得5只转基因阳性小鼠。其中2只阳性小鼠可稳定传代,经过与C57小鼠回交数次后各自建系。经蛋白免疫印迹法证实,与同窝野生型小鼠相比,转基因小鼠的脑组织和肌肉组织中TRPV1蛋白的表达显著升高。结论成功建立了Trpv1转基因小鼠模型,为深入研究TRPV1通道的功能提供了更好的条件。 展开更多
关键词 瞬时受体电位家族香草醛1受体 转基因小鼠 显微注射法
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激活瞬时受体电位香草醛亚家族1抑制RhoA/Rho激酶改善高脂介导的血管舒张功能异常 被引量:2
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作者 朱振宇 张莉莉 +4 位作者 王沛坚 马丽群 王利娟 刘道燕 祝之明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期600-605,I0005,共7页
目的探讨膳食辣椒素通过激活瞬时受体电位香草醛亚家族1(TRPV1)对高脂饮食介导的血管功能障碍的作用及机制。方法 10周龄雄性C57BL/6 J小鼠,分别给予普通饮食(普通饲料)、普通饮食+辣椒素(普食+0.01%辣椒素)、高脂饮食(高脂饲料)、高脂... 目的探讨膳食辣椒素通过激活瞬时受体电位香草醛亚家族1(TRPV1)对高脂饮食介导的血管功能障碍的作用及机制。方法 10周龄雄性C57BL/6 J小鼠,分别给予普通饮食(普通饲料)、普通饮食+辣椒素(普食+0.01%辣椒素)、高脂饮食(高脂饲料)、高脂饮食+辣椒素(高脂饲料+0.01%辣椒素)干预,20周后观察鼠尾血压、离体主动脉环血管收缩和舒张功能、血管电压依赖型钾通道Kv1.4和RhoA/Rho激酶蛋白表达。结果高脂饮食组内皮依赖和非内皮依赖的舒张反应分别为(26±12)%和(18.9±13.0)%,均明显低于普通饮食组的100%和100%(P均<0.01)。高脂饮食+辣椒素组的内皮依赖和非内皮依赖的舒张反应分别为(69±15)%和(46.5±6.0)%,均明显高于高脂饮食组(P均<0.05),但仍明显低于普通饮食组(P<0.05,P<0.01)。高脂饮食组大鼠的血压明显高于普通饮食组[(135±7)mmHg比(116±5)mmHg,P<0.01]。W estern blot检测结果显示,普通饮食+辣椒素组大鼠的Kv1.4蛋白表达明显高于普通饮食组(P<0.05),高脂饮食+辣椒素组大鼠的Kv1.4蛋白表达明显高于高脂饮食组(P<0.05);高脂饮食组大鼠RhoA/Rho激酶蛋白的表达明显高于普通饮食组(P<0.05),普通饮食+辣椒素组明显低于普通饮食组(P<0.05),高脂饮食+辣椒素组明显低于高脂饮食组(P<0.05)。结论膳食辣椒素能够改善高脂介导的血管舒张功能异常,可能与其激活TRPV1通道,从而上调钾通道和抑制RhoA/Rho激酶信号通路相关。 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道香草醛类受体1型 RHOA/RHO激酶 血管功能 通道
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鞘内注射瞬时受体电位通道A1 shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制 被引量:1
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作者 赵峰 樊少卿 +3 位作者 程晓燕 李小娜 李长生 马浩杰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1485-1494,共10页
目的:探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在部分坐骨神经结扎(pSNL)小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=6)和pSNL组(n=18)。pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为p... 目的:探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在部分坐骨神经结扎(pSNL)小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=6)和pSNL组(n=18)。pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为pSNL组、pSNL+NC shRNA组(于术后第7天鞘内注射NC shRNA)和pSNL+TRPA1 shRNA组(于术后第7天鞘内注射TRPA1 shRNA)。检测注射前和注射后l、7、12和24 h各组小鼠后肢机械缩足反射阈值(MWT)和热阈值(TWL)。最后一次检测后2 h处死小鼠,采用Western blotting法检测各组小鼠术侧背根神经节(DRG)中TRPA1蛋白激酶Cε型(Prkce)和星形胶质细胞激活标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,ELISA法检测各组小鼠细胞上清和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平。分离培养pSNL模型小鼠的原代星形胶质细胞,过表达或敲低TRPA1,检测星形胶质细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。采用STRING数据库和免疫共沉淀(Co-IP)法预测并验证TRPA1和Prkce相互作用。检测过表达或敲低TRPA1后空质粒组、Ad-TRPA1、sh-NC组和sh-TRPA1组星形胶质细胞中Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。将TRPA1 shRNA单独转染或与AdPrkce共转染星形胶质细胞,分为sh-TRPA1+empty vector组(转染空载体)、sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染TRPA1过表达载体)和sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染Prkce过表达载体)。采用Western blotting法检测各组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。结果:与对照组比较,pSNL组小鼠MWT和TWL降低(P<0.01);与pSNL+NC中shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠MWT和TWL升高(P<0.01)。与假手术组比较,术后第7天pSNL组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.05),血清中TNF-α和MCP-1水平升高(P<0.05)。与pSNL+NC shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平及血清中TNF-α和MCP-1水平降低(P<0.05)。与空质粒组比较,Ad-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显降低(P<0.05)。与sh-TRPA1+empty vector组比较,sh-TRPA1+Ad-Prkce组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05)。结论:TRPA1通过与Prkce相互作用参与pSNL模型小鼠星形胶质细胞的激活以及神经病理性疼痛发生发展过程。 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道A1 蛋白激酶Cε 部分坐骨神经结扎 神经性疼痛 星形胶质细胞
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TRPV1激活对内毒素血症小鼠肺组织炎症损伤的影响及机制 被引量:6
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作者 施孟如 南超 +5 位作者 徐丽艳 韩文文 徐子琴 李冬 邱俏檬 卢中秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2223-2228,共6页
目的:探讨用辣椒素(CAP)激活瞬时受体电位阳离子通道V亚族成员1(TRPV1)对内毒素血症所致肺损伤在炎症反应产生的影响及相关机制。方法:SPF级ICR小鼠108只随机分为6组:正常对照组、CAP对照组、抗辣椒碱(CAPZ)对照组、内毒素血症组、CAP... 目的:探讨用辣椒素(CAP)激活瞬时受体电位阳离子通道V亚族成员1(TRPV1)对内毒素血症所致肺损伤在炎症反应产生的影响及相关机制。方法:SPF级ICR小鼠108只随机分为6组:正常对照组、CAP对照组、抗辣椒碱(CAPZ)对照组、内毒素血症组、CAP干预组和CAPZ干预组。脂多糖(LPS)经腹腔注射,CAP及CAPZ均在LPS注射前30 min经皮下注射。分别在LPS注射后3 h、8 h和16 h取肺组织,ELISA法检测肺组织TNF-α、IL-6、IL-10、P物质(SP)和降血钙素基因相关肽(CGRP),Western blotting法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)和核内NF-κB的表达水平,光镜下观察肺组织病理学改变。结果:内毒素血症组小鼠3 h、8 h和16 h肺组织TNF-α、IL-6和IL-10水平较正常对照组均显著升高(P<0.05);CAP干预组各时点肺组织TNF-α和IL-6水平较内毒素血症组显著降低(P<0.05),而IL-10均明显升高(P<0.05);CAPZ干预组3 h、8 h和16 h肺组织TNF-α和IL-6较内毒素血症组显著升高(P<0.05),而IL-10水平均显著降低(P<0.05)。内毒素血症组和CAP对照组各时间点SP和CGRP较正常对照组均显著升高(P<0.05),CAP对照组SP和CGRP水平明显低于内毒素血症组(P<0.05);与同时点内毒素血症组相比,CAP干预组SP和CGRP显著升高(P<0.05),而CAPZ干预组显著降低(P<0.05)。内毒素血症组小鼠肺组织TLR4和核内NF-κB表达较正常对照组显著升高(P<0.05);与内毒素血症组相比,CAP干预组和CAPZ干预组小鼠肺组织TLR4表达均无显著差异(P>0.05),而CAP干预组核内NF-κB表达显著降低(P<0.05),CAPZ干预组核内NF-κB表达显著升高(P<0.05)。光镜下,CAP对照组和CAPZ对照组较正常对照组病理学变化不明显,内毒素血症组肺组织在8 h和16 h损害明显,CAP干预组较内毒素血症组损害减轻,CAPZ干预组较内毒素血症组肺组织损害加重。结论:TRPV1激活后能显著降低内毒素血症小鼠肺组织TNF-α、IL-6和核内NF-κB水平,升高IL-10水平,提高肺组织SP和CGRP表达,减轻肺组织炎症损伤程度,但不改变肺组织TLR4水平。 展开更多
关键词 瞬时受体电位阳离子通道V亚族成员1 内毒素血症 NF-κB 细胞因子 Toll样受体4
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淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用
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作者 白俊嫄 戴恩来 +1 位作者 蒲晓薇 张云霞 《世界中医药》 北大核心 2025年第9期1506-1512,1519,共8页
目的:探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用,及对无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、β-连环蛋白(β-catenin)、瞬时受体电位阳离子通道6蛋白(TRPC6)、钙调蛋白(CAM)、钙调神经磷酸酶(CAN)、活化T细胞核因子(NF... 目的:探讨淫羊藿苷联合地塞米松对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用,及对无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、β-连环蛋白(β-catenin)、瞬时受体电位阳离子通道6蛋白(TRPC6)、钙调蛋白(CAM)、钙调神经磷酸酶(CAN)、活化T细胞核因子(NFAT)、F-肌动蛋白(F-actin)及肌球蛋白重链9(MYH9)表达的影响。方法:采用阿霉素诱导大鼠肾足细胞建立足细胞损伤模型,分为空白组、模型组、地塞米松组、淫羊藿苷组、联合组。通过检测足细胞活力、凋亡率、细胞内钙离子浓度,观察足细胞骨架结构和损伤超微结构,分析Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路相关转接分子表达规律。结果:与空白组比较,模型组足细胞存活率显著降低(P<0.01),总凋亡率显著升高(P<0.01),[Ca^(2+)]i浓度增强(P<0.01),足细胞骨架排列紊乱、重组且降解,足突广泛融合,足细胞Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN以及NFAT基因和蛋白表达均显著升高(P<0.01),F-actin和MYH9表达均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,联合组足细胞存活率升高(P<0.01),总凋亡率下降(P<0.01),[Ca^(2+)]i浓度显著降低(P<0.01),足细胞骨架紊乱好转,足细胞微观结构趋于正常,足细胞Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN、NFAT基因和蛋白表达显著低于模型组(P<0.01),F-actin和MYH9表达显著高于模型组(P<0.01)。结论:淫羊藿苷联合地塞米松可能通过干预Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN信号通路的过度激活而抑制钙离子内流,改善足细胞骨架蛋白结构、保护足细胞功能,进而发挥激素增敏作用。 展开更多
关键词 激素抵抗肾病综合征 局灶节段性肾小球硬化 足细胞 细胞骨架 阿霉素足细胞损伤 淫羊藿苷 地塞米松 无翅MMTV整合位点家族成员1/β-连环蛋白/瞬时受体电位阳离子通道6/钙调神经磷酸酶通路
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吴茱萸碱抑制M2型巨噬细胞功能的机制研究 被引量:6
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作者 樊垒垒 朱飞云 +5 位作者 崔琳 王小晓 张松江 沈思 朱明军 王幼平 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第11期2322-2327,共6页
目的:吴茱萸碱是中药吴茱萸重要生物碱成分之一,其具有明显的抗炎作用,但具体机制不清。研究显示瞬时受体电位香草醛亚型1受体(Transient Receptor Potential Vanilloid Type 1 Channel,TRPV1)对炎症反应具有明显的抑制作用,而吴茱萸碱... 目的:吴茱萸碱是中药吴茱萸重要生物碱成分之一,其具有明显的抗炎作用,但具体机制不清。研究显示瞬时受体电位香草醛亚型1受体(Transient Receptor Potential Vanilloid Type 1 Channel,TRPV1)对炎症反应具有明显的抑制作用,而吴茱萸碱可激活TRPV1受体。本研究以人单核细胞(THP-1)培养模型,探明吴茱萸碱对M2型巨噬细胞功能的影响及TRPV1受体参与该过程中的作用,从而阐明吴茱萸碱抑制炎症反应的分子生物机制。方法:在THP-1细胞培养模型上,观察吴茱萸碱对白介素-4(Interleukin-4,IL-4)诱导的M2型巨噬细胞功能的影响,以及特异性TRPV1受体拮抗剂Capsazepine(CAPZ)对该过程的影响,并分别利用ELISA、荧光定量PCR和western blot确定M2型巨噬细胞功能指标,其中包括TGF-β1的产生、Arginase-1和Mannose Receptor m RNA和蛋白的表达。结果:本研究发现吴茱萸碱明显抑制IL-4诱导的M2型巨噬细胞功能亚型,其主要表现为TGF-β1分泌产生下降(P<0.05),同时伴有Arginase-1和Mannose Receptor m RNA和蛋白表达的降低(P<0.05),以上结果可被特异性TRPV1受体拮抗剂CAPZ所阻断(P<0.05)。结论:本研究显示吴茱萸碱通过激活TRPV1受体抑制M2型巨噬细胞功能反应,从而实现其抑制炎症反应的作用。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 瞬时受体电位香草醛1受体 M2巨噬细胞 炎症
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不同灸温下穴位涂抹辣椒素对佐剂性关节炎疗效的影响 被引量:3
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作者 谢波 王玲玲 +3 位作者 季辉 王旋旋 周攀 唐林海 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期600-603,共4页
目的:以佐剂性关节炎为载体,研究穴位涂抹辣椒素(TRPV1激动剂)在不同灸温下对艾灸治疗佐剂性关节炎疗效的影响,以证实艾灸起效需要适宜的灸温,并进一步探讨瞬时受体电位通道香草醛亚型1(简称TRPV1)与艾灸抗炎起效机制的关系。方法:将48... 目的:以佐剂性关节炎为载体,研究穴位涂抹辣椒素(TRPV1激动剂)在不同灸温下对艾灸治疗佐剂性关节炎疗效的影响,以证实艾灸起效需要适宜的灸温,并进一步探讨瞬时受体电位通道香草醛亚型1(简称TRPV1)与艾灸抗炎起效机制的关系。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、38℃艾灸组、38℃实验组、45℃艾灸组、45℃实验组,用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎模型,空白组与模型组不予处理;45℃实验组在双侧后三里、肾俞穴局部涂抹5%辣椒素,每隔10 min涂1次,共涂3次,再用艾条灸后三里、双肾俞,灸温控制在45℃;38℃实验组将灸温控制在38℃;38℃、45℃艾灸组仅艾灸;1次/d,每次每穴灸10 min,连续治疗5 d,治疗结束后检测患侧足趾肿胀度、血清IL-1β、TNF-α含量。结果:45℃艾灸组、38℃实验组、45℃实验组3个指标较模型组均明显降低(P<0.01);38℃艾灸组与模型组相比,肿胀度、IL-1β含量虽有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05)。38℃与45℃艾灸组、38℃实验组与艾灸组、45℃实验组与艾灸组比较,炎症指标有明显统计学意义(P<0.01)。38℃实验组与45℃艾灸组比较,各指标无统计学意义(P>0.05)。结论:1艾灸抗炎需要适宜的灸温,其启动机制与TRPV1有关;2穴位涂抹辣椒素可降低艾灸抗炎所需的温度阈值,并能提高艾灸抗炎的疗效,其起效机制依赖于TRPV1。 展开更多
关键词 灸温 瞬时受体电位通道香草醛1 辣椒素 佐剂性关节炎
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TRPV4在皮肤免疫性大疱病中的表达及意义 被引量:1
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作者 白洁 邹兴伟 +1 位作者 姜友贵 王琼玉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1349-1351,共3页
目的探讨TRPV4蛋白在寻常型天疱疮(PV)、大疱性类天疱疮(BP)、疱疹样皮炎(DH)、获得性大疱性表皮松解症(EBA)中的作用机制。方法用免疫组化方法检测正常皮肤组织、PV、BP、DH及EBA皮损组织中TRPV4蛋白的表达量。结果 TRPV4在PV(61.90%)... 目的探讨TRPV4蛋白在寻常型天疱疮(PV)、大疱性类天疱疮(BP)、疱疹样皮炎(DH)、获得性大疱性表皮松解症(EBA)中的作用机制。方法用免疫组化方法检测正常皮肤组织、PV、BP、DH及EBA皮损组织中TRPV4蛋白的表达量。结果 TRPV4在PV(61.90%)、BP(81.81%)、DH(72.22%)、EBA(68.42%)的阳性率均低于正常皮肤组织(93.33%),且各类疾病间亦存在表达差异(PV<EBA<DH<BP)。结论 TRPV4蛋白的低表达可能影响着皮肤连接的形成或修复,参与皮肤免疫性大疱病的发生、发展。 展开更多
关键词 瞬时感受器电位离子通道香草受体亚家族4 寻常天疱疮 大疱性天疱疮 疱疹样皮炎 获得性大疱性表皮松解症
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格列本脲治疗蛛网膜下腔出血的研究进展
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作者 冯雪冰 张彤宇 徐跃峤 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期212-217,共6页
动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)是一种常见的卒中类型,在全球具有高发病率、死亡率及残疾率,其继发的脑水肿更是预后不良的指征之一。针对脑水肿的治疗以药物治疗、物理治疗及手术治疗为主,然而在改善远期预后方面临床效果不一,而作为降... 动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)是一种常见的卒中类型,在全球具有高发病率、死亡率及残疾率,其继发的脑水肿更是预后不良的指征之一。针对脑水肿的治疗以药物治疗、物理治疗及手术治疗为主,然而在改善远期预后方面临床效果不一,而作为降糖药的格列本脲在中枢神经系统损伤中发挥着减轻脑水肿及保护神经的作用。磺酰脲受体1-瞬时受体电位M4型(SUR1-TRPM4)通道参与细胞毒性及血管源性脑水肿,在aSAH继发脑水肿中起到关键的作用。格列本脲的作用机制主要在于抑制SUR1-TRPM4通道,以改善aSAH后导致的血-脑屏障通透性增加,显著减轻细胞间紧密连接蛋白的破坏,并减少炎性反应标志物表达以及细胞损伤或死亡。研究表明,格列本脲有望为中枢神经系统疾病治疗提供一种安全有效的治疗选择,作为aSAH的一种潜在治疗方法显著改善功能预后。 展开更多
关键词 格列本脲 动脉瘤 蛛网膜下腔出血 磺酰脲受体1-瞬时受体电位M4通道 综述
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