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露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系的建立
被引量：
2
1
作者
王羽晗
李子豪
+4 位作者
李世彪
陈驰航
王瑜麟
吴雅妮
张旸
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期2236-2241,共6页
【目的】建立露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系,为菊花品质改良提供参考依据。【方法】采用农杆菌真空渗透和浸染转化法对露地菊火焰的脚芽进行目的基因遗传转化,分析其PCR结果,以抗性分化苗叶片进行β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronid...
【目的】建立露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系,为菊花品质改良提供参考依据。【方法】采用农杆菌真空渗透和浸染转化法对露地菊火焰的脚芽进行目的基因遗传转化,分析其PCR结果,以抗性分化苗叶片进行β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)组织染色验证转基因植株,分析农杆菌真空渗透转化率。【结果】将含AtLFY基因和AtCO基因的表达载体分别转入露地菊根部脚芽中,通过PCR检测GUS染色鉴定后,真空渗透1次的平均转化率为11.97%,真空渗透2次的平均转化率为15.86%,菌液浸染10 min的平均转化率为3.64%,菌液浸染20 min的平均转化率为11.14%,总体嵌合率为14.58%。【结论】建立的露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系对露地菊的遗传转化效率高,可操作性强。
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关键词
露地菊
农杆菌
真空渗透转化
技术
浸染
脚芽
遗传
转化
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职称材料
利用真空渗透和CRISPR/Cas9系统获得非转基因菜薹突变体
被引量：
2
2
作者
宗梅
韩硕
+3 位作者
郭宁
段蒙蒙
刘凡
王桂香
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期159-163,共5页
通过CRISPR/Cas9基因编辑系统获得非转基因菜薹突变体,实现CRISPR/Cas9体系在菜薹原位转化中的应用,为无选择标记的基因编辑技术应用提供参考。以‘49菜心’为试材,番茄红素脱氢酶基因(PDS)为靶基因,采用真空渗透原位转化方法,转化菜薹2...
通过CRISPR/Cas9基因编辑系统获得非转基因菜薹突变体,实现CRISPR/Cas9体系在菜薹原位转化中的应用,为无选择标记的基因编辑技术应用提供参考。以‘49菜心’为试材,番茄红素脱氢酶基因(PDS)为靶基因,采用真空渗透原位转化方法,转化菜薹25株。结果表明,在2032株原位转化种子苗中鉴定出3株发生PDS基因编辑,其中1株有外源转化载体插入,PDS发生杂合编辑,表型与野生型一致。另外2株具有矮化和失绿表型,且基因组无外源载体片段插入,PDS发生不同类型的敲除突变。CRISPR/Cas9通过不依赖组织培养的原位转化可以在菜薹中实现基因编辑,并能直接获得无外源插入的非转基因编辑突变体。
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关键词
菜薹
无筛选标记
真空渗透转化
不依赖组织培养
CRISPR/Cas9
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职称材料
题名
露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系的建立
被引量：
2
1
作者
王羽晗
李子豪
李世彪
陈驰航
王瑜麟
吴雅妮
张旸
机构
东北林业大学生命科学学院
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期2236-2241,共6页
基金
国家科技支撑计划项目(2013AA102706)
大学生创新创业训练计划项目(201710225302)
文摘
【目的】建立露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系,为菊花品质改良提供参考依据。【方法】采用农杆菌真空渗透和浸染转化法对露地菊火焰的脚芽进行目的基因遗传转化,分析其PCR结果,以抗性分化苗叶片进行β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)组织染色验证转基因植株,分析农杆菌真空渗透转化率。【结果】将含AtLFY基因和AtCO基因的表达载体分别转入露地菊根部脚芽中,通过PCR检测GUS染色鉴定后,真空渗透1次的平均转化率为11.97%,真空渗透2次的平均转化率为15.86%,菌液浸染10 min的平均转化率为3.64%,菌液浸染20 min的平均转化率为11.14%,总体嵌合率为14.58%。【结论】建立的露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系对露地菊的遗传转化效率高,可操作性强。
关键词
露地菊
农杆菌
真空渗透转化
技术
浸染
脚芽
遗传
转化
Keywords
Chrysanthemum morifolium
Agrobacterium
vacuum infiltration and transformation
dipping
foot shoot
genetic transformation
分类号
S682.1 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
利用真空渗透和CRISPR/Cas9系统获得非转基因菜薹突变体
被引量：
2
2
作者
宗梅
韩硕
郭宁
段蒙蒙
刘凡
王桂香
机构
北京市农林科学院蔬菜研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期159-163,共5页
基金
北京市农林科学院创新能力建设项目(KJCX20200401,KJCX20200205,KJCX20200113)
国家自然科学基金项目(31972401)。
文摘
通过CRISPR/Cas9基因编辑系统获得非转基因菜薹突变体,实现CRISPR/Cas9体系在菜薹原位转化中的应用,为无选择标记的基因编辑技术应用提供参考。以‘49菜心’为试材,番茄红素脱氢酶基因(PDS)为靶基因,采用真空渗透原位转化方法,转化菜薹25株。结果表明,在2032株原位转化种子苗中鉴定出3株发生PDS基因编辑,其中1株有外源转化载体插入,PDS发生杂合编辑,表型与野生型一致。另外2株具有矮化和失绿表型,且基因组无外源载体片段插入,PDS发生不同类型的敲除突变。CRISPR/Cas9通过不依赖组织培养的原位转化可以在菜薹中实现基因编辑,并能直接获得无外源插入的非转基因编辑突变体。
关键词
菜薹
无筛选标记
真空渗透转化
不依赖组织培养
CRISPR/Cas9
Keywords
Brassica campestris
marker-free
vacuum infiltration transformation
tissue culture-independent
CRISPR/Cas9
分类号
S634.5 [农业科学—蔬菜学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
露地菊脚芽农杆菌真空渗透转化技术体系的建立
王羽晗
李子豪
李世彪
陈驰航
王瑜麟
吴雅妮
张旸
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用真空渗透和CRISPR/Cas9系统获得非转基因菜薹突变体
宗梅
韩硕
郭宁
段蒙蒙
刘凡
王桂香
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
在线阅读
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职称材料
已选择
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