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柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析
被引量：
2
1
作者
孔春林
韩红玉
+8 位作者
姜连连
王晔
董辉
赵其平
朱顺海
李婷
薛璞
舒凡帆
黄兵
《中国动物传染病学报》
CAS
2012年第2期47-52,共6页
在毕赤酵母真核表达系统中表达柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d（Emeria tenella eukaryotic initiation factor 3d,EteIF3d）基因,并获得具有天然构象的活性蛋白。将EteIF3d基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,将构建正确的重组质粒通...
在毕赤酵母真核表达系统中表达柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d（Emeria tenella eukaryotic initiation factor 3d,EteIF3d）基因,并获得具有天然构象的活性蛋白。将EteIF3d基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,将构建正确的重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞。在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导培养,收集1~3 d的表达上清。表达产物进行SDS-PAGE检测,并用Western blot进行免疫学分析。结果表明,本研究成功构建了重组质粒pPIC9k-EteIF3d,并成功表达该蛋白,且该蛋白能与兔抗EteIF3d血清特异性结合,具有良好的抗原性。EteIF3d基因可在真核表达系统毕赤酵母中表达,且获得蛋白具有抗原性,从而为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。
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关键词
球虫
柔嫩艾美耳球虫
真核起始因子3d
毕赤酵母
真核
表达
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题名
柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析
被引量：
2
1
作者
孔春林
韩红玉
姜连连
王晔
董辉
赵其平
朱顺海
李婷
薛璞
舒凡帆
黄兵
机构
上海师范大学生命与环境科学学院
中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
2012年第2期47-52,共6页
基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(2011JB01)
文摘
在毕赤酵母真核表达系统中表达柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d（Emeria tenella eukaryotic initiation factor 3d,EteIF3d）基因,并获得具有天然构象的活性蛋白。将EteIF3d基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,将构建正确的重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞。在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导培养,收集1~3 d的表达上清。表达产物进行SDS-PAGE检测,并用Western blot进行免疫学分析。结果表明,本研究成功构建了重组质粒pPIC9k-EteIF3d,并成功表达该蛋白,且该蛋白能与兔抗EteIF3d血清特异性结合,具有良好的抗原性。EteIF3d基因可在真核表达系统毕赤酵母中表达,且获得蛋白具有抗原性,从而为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。
关键词
球虫
柔嫩艾美耳球虫
真核起始因子3d
毕赤酵母
真核
表达
Keywords
Cocci
d
ia
Eimeria tenella
eIF
3
d
Pichia pastoris
eukaryotic expression
分类号
S852.723 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析
孔春林
韩红玉
姜连连
王晔
董辉
赵其平
朱顺海
李婷
薛璞
舒凡帆
黄兵
《中国动物传染病学报》
CAS
2012
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