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弓形虫ROP2基因的体外扩增及真核表达重组质粒的构建被引量：10: 1; 作者吴昆陈晓光 +1 位作者李华支国舟《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第7期620-623,共4页; 目的　构建弓形虫棒状体蛋白2（POP2）基因真核表达重组质粒。方法　根据ROP2基因已知序列,设计合成一对引物,上、下游引物分别引入EcoRI、SalI酶切位点,用PCR方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码ROP2的基因片段,插入pGEX-4T-1质粒,构... 展开更多; 关键词弓形虫 ROP2基因体外扩增真核表达重组质粒 DNA疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

恶性疟原虫海南株CTP基因测序重组质粒及真核表达重组质粒的构建: 2; 作者陈慧红余新炳 +1 位作者吴忠道徐劲《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期22-24,共3页; 目的　构建恶性疟原虫CTP基因的测序重组质粒和真核表达重组质粒 ,以便进一步研究CTP基因的结构与功能。方法　根据已发表恶性疟原虫CTP基因的序列〔1〕,设计并合成一对引物。将扩增的CTP基因的PCR产物连接于测序载体pUC19上 ,经测序反... 展开更多; 关键词恶性疟原虫聚合酶链式反应基因克隆基因测序 CTP基因真核表达重组质粒疟疾; 在线阅读下载PDF 职称材料

真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染: 3; 作者刘兆球姜世金常维山《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期444-446,共3页; 通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将... 展开更多; 关键词真核重组表达质粒新城疫病毒F基因转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建被引量：3: 4; 作者庄轩覃映雪 +2 位作者苏永全王军丁少雄《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期74-79,共6页; 哈维氏弧菌是水产病害中常见的致病菌.参照基因库上登录的弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因序列设计简并引物,PCR扩增哈维氏弧菌TS-628株的FlaA全基因,并克隆到pMD 18-T载体中测序,经序列分析该基因全长1 140 bp,编码379个氨基酸.与基因库中其他... 展开更多; 关键词哈维氏弧菌 FlaA基因基因克隆序列分析真核表达重组质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达H7N9AIVHA基因的DNA疫苗有望商品化应用: 5; 《中国家禽》北大核心 2014年第14期69-69,共1页; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所陈华兰课题组根据A／Anhui／1／2013（H7N9）株的HA基因进行了密码子优化和全基因合成，克隆于pVAX1中构建真核表达重组质粒pVAH7，将其作为DNA疫苗进行SPF鸡的免疫保护效力评价。采用60μg/羽剂量的pVAH... 展开更多; 关键词 DNA疫苗 HA基因商品化真核表达重组质粒中国农业科学院应用免疫保护 SPF鸡; 在线阅读下载PDF 职称材料

H9亚型禽流感病毒血凝素特异性单因子血清制备被引量：5: 6; 作者陈晓妹王飞 +7 位作者张翼刘丽玲田国斌曾显营管雪婷程成陈化兰李雁冰《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期439-442,共4页; 为制备特异性的H9亚型禽流感病毒(AIV)单因子血清,本研究分别将6株不同亚群的H9亚型AIV的血凝素(HA)基因以鸡偏嗜的密码子进行优化,经全基因合成插入高效真核表达载体pCAGGS中,构建的真核重组质粒转染293T细胞进行瞬时表达,间接免疫荧... 展开更多; 关键词禽流感病毒 H9亚型真核表达重组质粒单因子血清; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫ROP2基因的体外扩增及真核表达重组质粒的构建被引量：10: 1; 作者吴昆陈晓光李华支国舟; 机构第一军医大学寄生虫学教研室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第7期620-623,共4页; 基金广东省科技计划项目(A1090205); 文摘目的　构建弓形虫棒状体蛋白2（POP2）基因真核表达重组质粒。方法　根据ROP2基因已知序列,设计合成一对引物,上、下游引物分别引入EcoRI、SalI酶切位点,用PCR方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码ROP2的基因片段,插入pGEX-4T-1质粒,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ROP2,而后经EcoR　I、Not　I双酶切出ROP2基因片段,再亚克隆到载体pcDNA3中构建真核表达重组质粒pcDNA3-ROP2。结果　ROP2基因体外扩增产物大小约1043bp,重组质粒经酶切及PCR鉴定表明获得正确重组子,克隆基因测序结果与已知序列基本吻合。结论　在国内首次克隆了弓形虫ROP2基因并构建了真核表达质粒pcDNA3-ROP2,为下一步弓形虫DNA疫苗研究打下了基础。; 关键词弓形虫 ROP2基因体外扩增真核表达重组质粒 DNA疫苗; Keywords Toxoplasma rhoptry protein 2 gene rearrangement gene expression vaccines cloning; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名恶性疟原虫海南株CTP基因测序重组质粒及真核表达重组质粒的构建: 2; 作者陈慧红余新炳吴忠道徐劲; 机构中山医科大学寄生虫教研室; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期22-24,共3页; 文摘目的　构建恶性疟原虫CTP基因的测序重组质粒和真核表达重组质粒 ,以便进一步研究CTP基因的结构与功能。方法　根据已发表恶性疟原虫CTP基因的序列〔1〕,设计并合成一对引物。将扩增的CTP基因的PCR产物连接于测序载体pUC19上 ,经测序反应确定无误。用HindⅢ和BamHⅠ双酶切将CTP基因从测序载体中切下 ,构建于真核表达载体pcDNA3上。结果　构建了恶性疟原虫CTP基因的测序重组质粒 ,并对其进行了测序。并将恶性疟原虫的CTP基因从测序重组质粒中切下 ,克隆进真核表达重组质粒 pcDNA3。结论　成功地构建了恶性疟原虫CTP基因的测序重组质粒和真核表达重组质粒。; 关键词恶性疟原虫聚合酶链式反应基因克隆基因测序 CTP基因真核表达重组质粒疟疾; Keywords Plasmodium falciparum Polymerase chain reaction Gene cloning Gene sequencing; 分类号 R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学] R531.3 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染: 3; 作者刘兆球姜世金常维山; 机构山东农业大学动物科技学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期444-446,共3页; 基金山东省优秀中青年科学家奖励基金; 文摘通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。; 关键词真核重组表达质粒新城疫病毒F基因转染; Keywords eukaryotic expression recombination plasmid newcastle disease virus(NDV) F gene transfection; 分类号 S852.659.4 [农业科学—基础兽医学] Q754 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建被引量：3: 4; 作者庄轩覃映雪苏永全王军丁少雄; 机构厦门大学海洋与环境学院; 出处《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期74-79,共6页; 基金国家863项目(2003AA603011) 福建省重大科技项目(2002N009); 文摘哈维氏弧菌是水产病害中常见的致病菌.参照基因库上登录的弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因序列设计简并引物,PCR扩增哈维氏弧菌TS-628株的FlaA全基因,并克隆到pMD 18-T载体中测序,经序列分析该基因全长1 140 bp,编码379个氨基酸.与基因库中其他弧菌的同源基因序列比较显示,哈氏弧菌FlaA基因与霍乱弧菌FlaA基因的同源性最高(79.5%),该基因编码的多肽缺乏半胱氨酸,并在N-,C-两端的氨基酸序列较为保守,中间区域的变异较大.对该蛋白的氨基酸组成及空间结构进行了分析和预测,并推测该蛋白质的平均分子量为40.6 kDa.在该基因末端加上一段编码Flag短肽的核苷酸序列后克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),获得带哈氏弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因的真核表达重组质粒pcDNA-FlaA-tag,为其DNA疫苗的进一步研究奠定了基础.; 关键词哈维氏弧菌 FlaA基因基因克隆序列分析真核表达重组质粒; Keywords Vibrio harveyi FlaA gene gene clone sequence analysis eukaryotic expression recombinant plasmid; 分类号 S94 [农业科学—水产养殖] Q74 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达H7N9AIVHA基因的DNA疫苗有望商品化应用: 5; 出处《中国家禽》北大核心 2014年第14期69-69,共1页; 文摘中国农业科学院哈尔滨兽医研究所陈华兰课题组根据A／Anhui／1／2013（H7N9）株的HA基因进行了密码子优化和全基因合成，克隆于pVAX1中构建真核表达重组质粒pVAH7，将其作为DNA疫苗进行SPF鸡的免疫保护效力评价。采用60μg/羽剂量的pVAH7单次或加强免疫3周龄SPF鸡；; 关键词 DNA疫苗 HA基因商品化真核表达重组质粒中国农业科学院应用免疫保护 SPF鸡; 分类号 S942.5 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H9亚型禽流感病毒血凝素特异性单因子血清制备被引量：5: 6; 作者陈晓妹王飞张翼刘丽玲田国斌曾显营管雪婷程成陈化兰李雁冰; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点实验室/兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期439-442,共4页; 基金农业部行业专项-边境动物疫病防制技术研究(200803026) 农业部动物流感防治与监测专项; 文摘为制备特异性的H9亚型禽流感病毒(AIV)单因子血清,本研究分别将6株不同亚群的H9亚型AIV的血凝素(HA)基因以鸡偏嗜的密码子进行优化,经全基因合成插入高效真核表达载体pCAGGS中,构建的真核重组质粒转染293T细胞进行瞬时表达,间接免疫荧光试验结果表明,重组质粒中的HA目的基因获得表达。将重组质粒以200μg/只的剂量免疫1月龄SPF鸡,6周后采血分离血清。交叉微量血凝抑制试验结果表明,血凝抑制效价可达8 log2～12 log2,灵敏度高,与其他AIV亚型抗原无交叉反应,型特异性强。; 关键词禽流感病毒 H9亚型真核表达重组质粒单因子血清; Keywords avian influenza virus H9 subtype eukaryotic expression recombinant plasmid hemagglutinin subtype-specific reference antiserum; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	弓形虫ROP2基因的体外扩增及真核表达重组质粒的构建	吴昆陈晓光李华支国舟	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2002	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	恶性疟原虫海南株CTP基因测序重组质粒及真核表达重组质粒的构建	陈慧红余新炳吴忠道徐劲	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染	刘兆球姜世金常维山	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建	庄轩覃映雪苏永全王军丁少雄	《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	表达H7N9AIVHA基因的DNA疫苗有望商品化应用		《中国家禽》北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	H9亚型禽流感病毒血凝素特异性单因子血清制备	陈晓妹王飞张翼刘丽玲田国斌曾显营管雪婷程成陈化兰李雁冰	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料