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人胸腺素α1真核表达重组体的构建及其转染人外周血淋巴细胞对后者免疫活性的影响被引量：1: 1; 作者徐峰陈智 +1 位作者姚航平何剑琴《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2002年第2期121-124,共4页; 目的 :构建人胸腺素α1(Tα1)真核表达重组体 p BK- Tα1,并研究其转染人外周血淋巴细胞 (PBL)对后者免疫活性的影响。方法 :将已构建的 Tα1克隆重组体 p UC18- Tα1经 Eco R I、Hind 酶切 ,获得 Tα1片段 ,再将其克隆入真核细胞表达... 展开更多; 关键词胸腺素淋巴细胞免疫学人胸腺素α1 真核表达重组体人外周血淋巴细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠全长OBRbcDNA克隆及真核表达重组体的构建: 2; 作者王佑民黎峰 +1 位作者程桦傅祖植《安徽医科大学学报》 CAS 2002年第5期333-335,共3页; 目的　克隆SD大鼠全长长胞内段瘦素受体基因cD NA(OBRbcDNA)及构建其真核表达重组体 ,为进一步研究该基因打下基础。方法　应用RT PCR方法分段扩增全长OBRbcDNA ,再将它们连接起来 ,并获得载有全长OBRbcDNA的阳性克隆质粒。将上述质粒... 展开更多; 关键词真核表达重组体瘦素受体基因克隆质粒瘦素; 在线阅读下载PDF 职称材料

人P15基因真核表达重组体的构建和鉴定: 3; 作者时伟红金春元 +2 位作者张学王太一孙开来《中国实验动物学杂志》 1996年第3期151-153,共3页; 将含人ｐ１５ｃＤＮＡ质粒ｐＢＳ－ＳＫ－ｐ１５以ＥｃｏＲＩ和ＸｈｏＩ进行双酶切，再与真核表达载体ｐＣＲＴＭ３经相同酶切点连接，转化感受态细菌、筛选、鉴定得到可在真核细胞中表达人ｐ１５基因的重组质粒ｐＣＲ－ｈｐ１５。; 关键词 P^15 DNA质粒 P15基因真核表达载体 SK 真核表达重组体鉴定酶切感受态细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用被引量：1: 4; 作者邓征浩周建华 +2 位作者曹慧秋沈明文继舫《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期193-196,共4页; 目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κB亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernbl... 展开更多; 关键词基因转染细胞株A549 RASSF1A基因抑制作用人肺腺癌肺腺癌细胞A549 增殖 blotting Western pcDNA3 真核表达重组体脂质体转染技术四甲基偶氮唑盐流式细胞仪分析 A549细胞系 RT-PCR mRNA表达 P65 生物学行为 B亚单位; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人胸腺素α1真核表达重组体的构建及其转染人外周血淋巴细胞对后者免疫活性的影响被引量：1: 1; 作者徐峰陈智姚航平何剑琴; 机构浙江大学医学院附属第一医院; 出处《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2002年第2期121-124,共4页; 基金浙江省自然科学基金资助项目 (ZD990 4 ); 文摘目的 :构建人胸腺素α1(Tα1)真核表达重组体 p BK- Tα1,并研究其转染人外周血淋巴细胞 (PBL)对后者免疫活性的影响。方法 :将已构建的 Tα1克隆重组体 p UC18- Tα1经 Eco R I、Hind 酶切 ,获得 Tα1片段 ,再将其克隆入真核细胞表达载体 p BK- CMV得到 p BK- Tα1重组体 ,p BK- Tα1以脂质体包裹的方法转染 PBL细胞 ,作 RT- PCR在 m RNA水平检测 p BK- Tα1在 PBL细胞中的表达。用 E玫瑰花环试验检测转染 p BK- Tα1后的 PBL细胞中T淋巴细胞表面 E受体的表达情况 ,并以酶联免疫吸附试验检测转染 p BK- Tα1后的 PBL细胞培养上清中的 IFN- γ和 IL- 2值。结果 :构建成功 Tα1真核细胞表达重组体 p BK- Tα1;在 m RNA水平证实 ,p BK- Tα1可在 PBL细胞中得以转录 ;初步证实 p BK- Tα1转染入 PBL细胞可促进 IFN- γ、IL- 2的表达和 T淋巴细胞表面 E受体的产生。结论 :p BK- Tα1在 PBL细胞内的表达可能会增强; 关键词胸腺素淋巴细胞免疫学人胸腺素α1 真核表达重组体人外周血淋巴细胞; Keywords Thymosin/immunol Lymphocytes/immunol Human thymosinα1 Eukarocyte expression recombinant Human peripheral blood lymphocytes; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠全长OBRbcDNA克隆及真核表达重组体的构建: 2; 作者王佑民黎峰程桦傅祖植; 机构安徽医科大学第一附属医院内分泌科中山医科大学孙逸仙纪念医院内分泌科; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 2002年第5期333-335,共3页; 基金广东省自然科学基金 (编号 :980 117) 卫生部基金 (标号 :98-1-0 91)资助课题; 文摘目的　克隆SD大鼠全长长胞内段瘦素受体基因cD NA(OBRbcDNA)及构建其真核表达重组体 ,为进一步研究该基因打下基础。方法　应用RT PCR方法分段扩增全长OBRbcDNA ,再将它们连接起来 ,并获得载有全长OBRbcDNA的阳性克隆质粒。将上述质粒中全长OBRbcDNA定向插入真核表达质粒pcDNA3中 ,筛选出阳性克隆。通过限制性内切酶酶切和核苷酸序列测定进行鉴定。结果　重组的克隆质粒和真核表达质粒经限制性内切酶酶切后获得的片段大小均与理论值一致。结论　成功地克隆了SD大鼠全长OBRbcDNA 。; 关键词真核表达重组体瘦素受体基因克隆质粒瘦素; Keywords cloning, molecular DNA, recombinant; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人P15基因真核表达重组体的构建和鉴定: 3; 作者时伟红金春元张学王太一孙开来; 机构中国医科大学实验动物学部遗传室; 出处《中国实验动物学杂志》 1996年第3期151-153,共3页; 基金美国中华医学基金辽宁省科委资助; 文摘将含人ｐ１５ｃＤＮＡ质粒ｐＢＳ－ＳＫ－ｐ１５以ＥｃｏＲＩ和ＸｈｏＩ进行双酶切，再与真核表达载体ｐＣＲＴＭ３经相同酶切点连接，转化感受态细菌、筛选、鉴定得到可在真核细胞中表达人ｐ１５基因的重组质粒ｐＣＲ－ｈｐ１５。; 关键词 P^15 DNA质粒 P15基因真核表达载体 SK 真核表达重组体鉴定酶切感受态细胞; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R735 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用被引量：1: 4; 作者邓征浩周建华曹慧秋沈明文继舫; 机构中南大学湘雅医学院病理学教研室; 出处《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期193-196,共4页; 文摘目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κB亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernblotting检测RASSF1A基因表达。采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法、流式细胞仪分析转染细胞的生物学行为。RT PCR和Westernblotting检测基因转染对P65表达的影响。结果:经脂质体转染和筛选,建立了稳定表达RASSF1A基因的A549细胞系。与未转染组和转染空白载体组比较,转染RASSF1A基因的细胞生长速度明显减慢(P<0. 05),细胞周期中G1 /G0期比例明显增加(P<0. 05),而S期比例减少;转染组细胞核内P65蛋白表达明显降低(P<0. 05),而全细胞P65蛋白及mRNA表达未见明显变化。结论:RASSF1A基因可能通过抑制P65活性而抑制人肺腺癌细胞A549的生长。; 关键词基因转染细胞株A549 RASSF1A基因抑制作用人肺腺癌肺腺癌细胞A549 增殖 blotting Western pcDNA3 真核表达重组体脂质体转染技术四甲基偶氮唑盐流式细胞仪分析 A549细胞系 RT-PCR mRNA表达 P65 生物学行为 B亚单位; Keywords RASSF1A lung adenocarcinoma A549 P65; 分类号 R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人胸腺素α1真核表达重组体的构建及其转染人外周血淋巴细胞对后者免疫活性的影响	徐峰陈智姚航平何剑琴	《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大鼠全长OBRbcDNA克隆及真核表达重组体的构建	王佑民黎峰程桦傅祖植	《安徽医科大学学报》 CAS	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人P15基因真核表达重组体的构建和鉴定	时伟红金春元张学王太一孙开来	《中国实验动物学杂志》	1996	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用	邓征浩周建华曹慧秋沈明文继舫	《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料