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人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建及鉴定
被引量：
1
1
作者
陈星
糜若然
+7 位作者
伊铁忠
瞿全新
熊冬生
邵晓枫
姜文国
许元富
杨纯正
郑曙民
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第11期625-628,共4页
目的:克隆血管内皮生长因子C(VascularEndothelialGrowthFactorC)功能片段的cDNA,构建人VEGF-C基因的真核表达载体,以便进一步研究VEGF-C在宫颈癌中表达的意义及在淋巴管生长及转移中的作用。方法:根据人VEGF-CcDNA序列,设计合成二对特...
目的:克隆血管内皮生长因子C(VascularEndothelialGrowthFactorC)功能片段的cDNA,构建人VEGF-C基因的真核表达载体,以便进一步研究VEGF-C在宫颈癌中表达的意义及在淋巴管生长及转移中的作用。方法:根据人VEGF-CcDNA序列,设计合成二对特异性引物,第一对5'端含有EcoRⅠ及第二对3'端含有XhoⅠ酶切位点。运用RT-PCR法克隆人MDA-MB231中的VEGF-CcDNA部分编码序列(CDS);经双酶切后将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组质粒在处于感受态的大肠杆菌DH5α中扩增,纯化。通过PCR和双酶切鉴定阳性重组子及进行基因序列的测定。结果:用RT-PCR克隆到VEGF-CcDNA部分CDS;PCR和双酶切鉴定阳性重组子,显示有人VEGF-CcDNA编码序列,基因序列测定显示重组质粒上插入的人VEGF-C序列正确。结论:从富含VEGF-C的人MDA-MB231细胞系中克隆得到的VEGF-C基因功能片段cDNA,成功构建了人真核表达载体pcDNA3.1(+)/VEGF-C。
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关键词
血管内皮生长因子
克隆
真核表达栽体
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题名
人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建及鉴定
被引量：
1
1
作者
陈星
糜若然
伊铁忠
瞿全新
熊冬生
邵晓枫
姜文国
许元富
杨纯正
郑曙民
机构
天津医科大学总医院妇产科
中国医学科学院协和医科大学血液学研究所药物室国家重点实验室
山西省肿瘤医院妇科
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第11期625-628,共4页
基金
天津市自然科学基金项目资助(编号:973608511)
文摘
目的:克隆血管内皮生长因子C(VascularEndothelialGrowthFactorC)功能片段的cDNA,构建人VEGF-C基因的真核表达载体,以便进一步研究VEGF-C在宫颈癌中表达的意义及在淋巴管生长及转移中的作用。方法:根据人VEGF-CcDNA序列,设计合成二对特异性引物,第一对5'端含有EcoRⅠ及第二对3'端含有XhoⅠ酶切位点。运用RT-PCR法克隆人MDA-MB231中的VEGF-CcDNA部分编码序列(CDS);经双酶切后将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组质粒在处于感受态的大肠杆菌DH5α中扩增,纯化。通过PCR和双酶切鉴定阳性重组子及进行基因序列的测定。结果:用RT-PCR克隆到VEGF-CcDNA部分CDS;PCR和双酶切鉴定阳性重组子,显示有人VEGF-CcDNA编码序列,基因序列测定显示重组质粒上插入的人VEGF-C序列正确。结论:从富含VEGF-C的人MDA-MB231细胞系中克隆得到的VEGF-C基因功能片段cDNA,成功构建了人真核表达载体pcDNA3.1(+)/VEGF-C。
关键词
血管内皮生长因子
克隆
真核表达栽体
Keywords
Vascular endothelial growth factor-c Clone Eukaryotic expression vector
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建及鉴定
陈星
糜若然
伊铁忠
瞿全新
熊冬生
邵晓枫
姜文国
许元富
杨纯正
郑曙民
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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