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直接酶联免疫吸附法检测猪血清IgG的影响因素
被引量：
6
1
作者
罗磊
丁霄霖
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期97-101,共5页
直接酶联免疫吸附法检测猪血清中G型免疫球蛋白（IgG），最小检测量为10ng，最适检测范围纯IgG为10～60ng，猪血清IgG为10～40ng。酶标抗体最适稀释度为1／3500。酶标板内与酶标板间平行测定变异系数均小于5％。
关键词
直接酶联免疫吸附法
G型
免疫
球蛋白(IgG)
猪血清
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职称材料
直接竞争酶联免疫吸附法检测虾过敏蛋白
被引量：
1
2
作者
罗奕铭
王丽
钟青萍
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期337-339,347,共4页
目的:建立酶标抗原的直接竞争酶联免疫吸附法(dcELISA)检测食品中虾过敏蛋白,为食品过敏诊断试剂的开发和应用提供理论基础。方法:提取虾主要过敏蛋白,免疫小鼠制备抗虾过敏蛋白多克隆抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗原,建立酶标抗原的d...
目的:建立酶标抗原的直接竞争酶联免疫吸附法(dcELISA)检测食品中虾过敏蛋白,为食品过敏诊断试剂的开发和应用提供理论基础。方法:提取虾主要过敏蛋白,免疫小鼠制备抗虾过敏蛋白多克隆抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗原,建立酶标抗原的dcELISA检测虾过敏蛋白。结果:所建立的dcELISA法最低检测限为3.94ng/mL,标准曲线在0.12～128.86ng/mL范围内线性良好,批内和批间变异系数分别为6.16%和2.73%,回收率为82%～98%。结论:该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为进一步研制检测虾过敏蛋白的ELISA试剂盒提供有效的方法。
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关键词
虾过敏蛋白
检测
多克隆抗体
酶
标抗原
直接
竞争
酶
联
免疫吸附
法
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职称材料
抗孔雀石绿单链抗体-碱性磷酸酶融合表达和活性鉴定
被引量：
3
3
作者
伍伟健
董洁娴
+3 位作者
饶美芳
詹屋强
王弘
孙远明
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第17期121-126,共6页
采用重叠延伸的方法成功将抗孔雀石绿(malachite green,MG)单克隆细胞的轻链VL和重链VH用连接肽(Gly_4Ser)_3连接,形成单链抗体(single chain variable fragment,scFv)基因,并将其酶切连接进入含有碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,PhoA...
采用重叠延伸的方法成功将抗孔雀石绿(malachite green,MG)单克隆细胞的轻链VL和重链VH用连接肽(Gly_4Ser)_3连接,形成单链抗体(single chain variable fragment,scFv)基因,并将其酶切连接进入含有碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,PhoA)基因的载体plip6/GN中,成功构建重组质粒plip6/GN-MG-scFv。随后重组质粒转入大肠杆菌BL21,经诱导表达后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting鉴定结果表明所获得的融合蛋白sc Fv-PhoA大小约72 kD。利用scFv与MG特异性结合的活性和PhoA催化对硝基苯磷酸二钠的显色机制,经过直接竞争酶联免疫吸附法测定融合蛋白scFv-PhoA的IC_(50)为9.81 ng/mL。本方法操作简单、灵敏度高且检测时间短,这为进一步进行MG免疫法快速检测提供了参考。
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关键词
孔雀石绿
单链抗体
碱性磷酸
酶
融合表达
直接
竞争
酶
联
免疫吸附
法
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职称材料
题名
直接酶联免疫吸附法检测猪血清IgG的影响因素
被引量：
6
1
作者
罗磊
丁霄霖
机构
江南大学食品学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期97-101,共5页
文摘
直接酶联免疫吸附法检测猪血清中G型免疫球蛋白（IgG），最小检测量为10ng，最适检测范围纯IgG为10～60ng，猪血清IgG为10～40ng。酶标抗体最适稀释度为1／3500。酶标板内与酶标板间平行测定变异系数均小于5％。
关键词
直接酶联免疫吸附法
G型
免疫
球蛋白(IgG)
猪血清
Keywords
Direct Enzyme-Linked Immunoserbent Assay
Immunoglobulin G （IgG）
Porcine Serum
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
直接竞争酶联免疫吸附法检测虾过敏蛋白
被引量：
1
2
作者
罗奕铭
王丽
钟青萍
机构
华南农业大学食品学院
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期337-339,347,共4页
文摘
目的:建立酶标抗原的直接竞争酶联免疫吸附法(dcELISA)检测食品中虾过敏蛋白,为食品过敏诊断试剂的开发和应用提供理论基础。方法:提取虾主要过敏蛋白,免疫小鼠制备抗虾过敏蛋白多克隆抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗原,建立酶标抗原的dcELISA检测虾过敏蛋白。结果:所建立的dcELISA法最低检测限为3.94ng/mL,标准曲线在0.12～128.86ng/mL范围内线性良好,批内和批间变异系数分别为6.16%和2.73%,回收率为82%～98%。结论:该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为进一步研制检测虾过敏蛋白的ELISA试剂盒提供有效的方法。
关键词
虾过敏蛋白
检测
多克隆抗体
酶
标抗原
直接
竞争
酶
联
免疫吸附
法
Keywords
shrimp allergic protein
detection
polyclonal antibody
enzyme-labeled antigen
direct competitive enzyme linked immunoassay
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
抗孔雀石绿单链抗体-碱性磷酸酶融合表达和活性鉴定
被引量：
3
3
作者
伍伟健
董洁娴
饶美芳
詹屋强
王弘
孙远明
机构
广东省食品质量安全重点实验室
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第17期121-126,共6页
基金
国家自然科学基金面上项目(31271866)
广东省自然科学基金项目(2014A030311043)
广东省科技计划项目(2014A050503059)
文摘
采用重叠延伸的方法成功将抗孔雀石绿(malachite green,MG)单克隆细胞的轻链VL和重链VH用连接肽(Gly_4Ser)_3连接,形成单链抗体(single chain variable fragment,scFv)基因,并将其酶切连接进入含有碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,PhoA)基因的载体plip6/GN中,成功构建重组质粒plip6/GN-MG-scFv。随后重组质粒转入大肠杆菌BL21,经诱导表达后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting鉴定结果表明所获得的融合蛋白sc Fv-PhoA大小约72 kD。利用scFv与MG特异性结合的活性和PhoA催化对硝基苯磷酸二钠的显色机制,经过直接竞争酶联免疫吸附法测定融合蛋白scFv-PhoA的IC_(50)为9.81 ng/mL。本方法操作简单、灵敏度高且检测时间短,这为进一步进行MG免疫法快速检测提供了参考。
关键词
孔雀石绿
单链抗体
碱性磷酸
酶
融合表达
直接
竞争
酶
联
免疫吸附
法
Keywords
malachite green
single chain antibody
alkaline phosphatase
fusion expression
direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
直接酶联免疫吸附法检测猪血清IgG的影响因素
罗磊
丁霄霖
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
直接竞争酶联免疫吸附法检测虾过敏蛋白
罗奕铭
王丽
钟青萍
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
抗孔雀石绿单链抗体-碱性磷酸酶融合表达和活性鉴定
伍伟健
董洁娴
饶美芳
詹屋强
王弘
孙远明
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
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职称材料
已选择
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