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Gateway技术构建酵母双杂分析用辣椒cDNA文库
被引量：
11
1
作者
邱爱连
刘林林
+5 位作者
蔡汉阳
朱万里
黄木坤
陈雄
何水林
张健
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期791-796,共6页
构建cDNA文库是利用酵母双杂交技术开展特定cDNA分离的重要基础工作。利用Gateway技术,在成功提取辣椒总RNA并分离mRNA的基础上,合成了3种读码框的双链cDNA,通过BP反应构建其相应的入门文库,再通过LR反应将cDNA迅速且定向地重组到酵母...
构建cDNA文库是利用酵母双杂交技术开展特定cDNA分离的重要基础工作。利用Gateway技术,在成功提取辣椒总RNA并分离mRNA的基础上,合成了3种读码框的双链cDNA,通过BP反应构建其相应的入门文库,再通过LR反应将cDNA迅速且定向地重组到酵母双杂分析用目的载体pDESTTM22上,构建成高质量目的文库。经检测入门文库和目的文库滴度均达到(4.0～5.0)×106cfu/mL,文库总容量为(2.4～3.0)×107cfu,平均插入片段大小为1250bp,其质量完全满足于进一步利用酵母双杂体系分析目的基因互作蛋白cDNA。
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关键词
辣椒
入门
文库
目的文库
GATEWAY
酵母双杂
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职称材料
题名
Gateway技术构建酵母双杂分析用辣椒cDNA文库
被引量：
11
1
作者
邱爱连
刘林林
蔡汉阳
朱万里
黄木坤
陈雄
何水林
张健
机构
福建农林大学生命科学学院
出处
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期791-796,共6页
基金
国家自然基金项目(30571128)
福建省自然科学基金重点项目(2008J003
+1 种基金
2008J0049)
福建省创新人才项目(2007F3013)
文摘
构建cDNA文库是利用酵母双杂交技术开展特定cDNA分离的重要基础工作。利用Gateway技术,在成功提取辣椒总RNA并分离mRNA的基础上,合成了3种读码框的双链cDNA,通过BP反应构建其相应的入门文库,再通过LR反应将cDNA迅速且定向地重组到酵母双杂分析用目的载体pDESTTM22上,构建成高质量目的文库。经检测入门文库和目的文库滴度均达到(4.0～5.0)×106cfu/mL,文库总容量为(2.4～3.0)×107cfu,平均插入片段大小为1250bp,其质量完全满足于进一步利用酵母双杂体系分析目的基因互作蛋白cDNA。
关键词
辣椒
入门
文库
目的文库
GATEWAY
酵母双杂
Keywords
pepper
entry library
destination library
Gateway
yeast two-hybrid
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Gateway技术构建酵母双杂分析用辣椒cDNA文库
邱爱连
刘林林
蔡汉阳
朱万里
黄木坤
陈雄
何水林
张健
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
11
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