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枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ的重组表达及分离纯化
被引量：
1
1
作者
马慧娇
郭洪伟
+2 位作者
曾朝玮
郭家俊
章中
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2019年第11期2564-2570,共7页
【目的】皮层裂解酶是芽孢所特有的专一水解皮层肽聚糖的酶,肽聚糖的水解是造成芽孢死亡的重要原因,分离提取芽孢皮层裂解酶CwlJ为推动CwlJ水解肽聚糖进而杀灭芽孢并应用于食品杀菌提供了原材料。【方法】本文将获得的皮层裂解酶CwlJ基...
【目的】皮层裂解酶是芽孢所特有的专一水解皮层肽聚糖的酶,肽聚糖的水解是造成芽孢死亡的重要原因,分离提取芽孢皮层裂解酶CwlJ为推动CwlJ水解肽聚糖进而杀灭芽孢并应用于食品杀菌提供了原材料。【方法】本文将获得的皮层裂解酶CwlJ基因导入质粒pCZN 1,成功构建了基因工程菌。运用IPTG诱导重组菌表达目的蛋白CwlJ,SDS-PAGE和Western-Blot检验重组皮层裂解酶的表达情况,并用亲和层析法纯化重组蛋白CwlJ。【结果】0.5 mM的IPTG能实现CwlJ基因的大量表达,纯化后的重组皮层裂解酶CwlJ分子量为17.9 KD,最适温度为40℃、最适pH为5,比酶活力146.67 U/mg。【结论】相比从天然芽孢中提取出来的皮层裂解酶,重组皮层裂解酶CwlJ的活性提高了2倍,保证了皮层裂解酶CwlJ进一步水解肽聚糖实验的进行。
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关键词
芽孢
皮层裂解酶cwlj
重组表达
分离纯化
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职称材料
题名
枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ的重组表达及分离纯化
被引量：
1
1
作者
马慧娇
郭洪伟
曾朝玮
郭家俊
章中
机构
宁夏大学农学院
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2019年第11期2564-2570,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31760474)
国家自然科学基金项目(31460410)
文摘
【目的】皮层裂解酶是芽孢所特有的专一水解皮层肽聚糖的酶,肽聚糖的水解是造成芽孢死亡的重要原因,分离提取芽孢皮层裂解酶CwlJ为推动CwlJ水解肽聚糖进而杀灭芽孢并应用于食品杀菌提供了原材料。【方法】本文将获得的皮层裂解酶CwlJ基因导入质粒pCZN 1,成功构建了基因工程菌。运用IPTG诱导重组菌表达目的蛋白CwlJ,SDS-PAGE和Western-Blot检验重组皮层裂解酶的表达情况,并用亲和层析法纯化重组蛋白CwlJ。【结果】0.5 mM的IPTG能实现CwlJ基因的大量表达,纯化后的重组皮层裂解酶CwlJ分子量为17.9 KD,最适温度为40℃、最适pH为5,比酶活力146.67 U/mg。【结论】相比从天然芽孢中提取出来的皮层裂解酶,重组皮层裂解酶CwlJ的活性提高了2倍,保证了皮层裂解酶CwlJ进一步水解肽聚糖实验的进行。
关键词
芽孢
皮层裂解酶cwlj
重组表达
分离纯化
Keywords
Endospores
Cortical lyase
cwlj
Recombinant expression
Isolation and purification
分类号
TS2 [轻工技术与工程—食品科学与工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ的重组表达及分离纯化
马慧娇
郭洪伟
曾朝玮
郭家俊
章中
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2019
1
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