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敲减辅酶Q10B表达对裸鼠食管鳞癌皮下移植瘤细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响
1
作者 魏瑜 李志芳 +3 位作者 曹雷雨 高艳 马晓丽 张莉 《山东医药》 CAS 2024年第28期40-43,共4页
目的探讨敲减辅酶Q10B(COQ10B)表达对裸鼠食管鳞状细胞癌(鳞癌)皮下移植瘤细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法利用慢病毒转染技术将COQ10B的干扰慢病毒及其阴性对照转染至食管鳞癌细胞(KYSE150细胞)中,构建敲减COQ10B表达的... 目的探讨敲减辅酶Q10B(COQ10B)表达对裸鼠食管鳞状细胞癌(鳞癌)皮下移植瘤细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法利用慢病毒转染技术将COQ10B的干扰慢病毒及其阴性对照转染至食管鳞癌细胞(KYSE150细胞)中,构建敲减COQ10B表达的KYSE150细胞(sh-COQ10B组)和阴性对照KYSE150细胞(sh-NC组)。选择雌性BALB/c裸鼠20只,随机分入sh-COQ10B组和sh-NC组各10只,分别于裸鼠右前肩胛处皮下接种转染sh-COQ10B和sh-NC的KYSE150细胞,以此构建裸鼠皮下移植瘤模型,观察接种后不同时间皮下移植瘤生长情况并测量瘤体的体积和质量。接种第26天实验结束后取瘤体组织,采用HE、免疫组化、TUNEL染色法观察裸鼠皮下移植瘤中细胞增殖和凋亡的情况,以Westernblotting法检测移植瘤中EMT相关蛋白(E-cadherin和Vimentin)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)表达。结果与sh-NC组比较,sh-COQ10B组中COQ10B蛋白表达量低(P<0.05);皮下移植瘤模型构建成功且裸鼠均无死亡。sh-COQ10B组移植后不同时间瘤体体积和质量均小于sh-NC组(P均<0.05)。与sh-NC组比较,sh-COQ10B组肿瘤细胞凋亡率高,瘤体组织内Bcl-2、Vimentin蛋白表达低,Bax、E-cadherin表达高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论敲减COQ10B表达可抑制裸鼠食管鳞癌皮下移植瘤细胞增殖和EMT的发生,促进肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 裸鼠皮下移植瘤 辅酶Q10B 细胞增殖 细胞凋亡 上皮间质转化
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SurvivinshRNA-APC双基因共表达慢病毒载体对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长情况的影响 被引量：10
2
作者 袁禧先 温超 +4 位作者 曹雅 杜井峰 程开 朱艳丽 段厚羽 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第6期584-590,共7页
目的在转录后水平进行干预的RNA干扰技术在多基因治疗中的应用越来越广泛。文中旨在构建人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,通过联合RNAi和外源性补充的方式研究Survivin shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体对结肠癌裸鼠移植瘤生长情... 目的在转录后水平进行干预的RNA干扰技术在多基因治疗中的应用越来越广泛。文中旨在构建人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,通过联合RNAi和外源性补充的方式研究Survivin shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体对结肠癌裸鼠移植瘤生长情况的影响。方法选取35只裸鼠随机数字表法分为5组,即Survivin shRNA-APC双基因组、Survivin shRNA组、APC组、空载组和空白组,每组7只;将已经构建好的处于对数生长期的双基因共表达Survivin shRNA-APC、Survivin shRNA及APC稳转株,空载稳转株,HT-29结肠癌细胞(均为2×106/mL)分别注射至5组裸鼠左前腋下成瘤,构建人HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型;通过测量瘤体体积、重量,检测移植瘤生长抑制率,Real time PCR检测移植瘤组织survivin mRNA的表达,免疫组化检测Survivin蛋白的表达,TUNEL检测凋亡情况。结果与空白组比较,APC组、Survivin shRNA组、双基因组移植瘤平均体积、平均重量均减少(P<0.05);与空载组比较,APC组、Survivin shRNA组、双基因组平均体积、平均移植瘤重量亦减少(P<0.05),而体积抑制率、瘤重抑制率均增加(P<0.05);与双基因组比较,APC组、Survivin shRNA组移植瘤平均体积、平均重量均增加(P<0.05)。与空白组和空载组相比,APC组、Survivin shRNA组、Survivin shRNA-APC双基因组移植瘤组织Survivin mRNA和蛋白表达相对含量明显降低(P<0.05);与Survivin shRNA组、APC组相比,双基因组移植瘤组织Survivin mRNA和蛋白表达相对含量亦明显降低(P<0.05)。与空白组裸鼠移植瘤组织结肠癌细胞凋亡指数[(9.89±0.31)%]比较,APC组、Survivin shRNA组、双基因组[(31.19±1.79)%、(33.64±2.03)%、(56.72±3.17)%]明显升高(P<0.05),而APC组、Survivin shRNA组、双基因组亦较空载组[(10.06±0.43)%]明显升高(P<0.05);与Survivin shRNA组、APC组相比,Survivin shRNA-APC双基因组移植瘤组织癌细胞凋亡指数明显升高(P<0.05)。结论 Survivin shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体能够使Survivin基因的表达水平降低,促进结肠癌细胞的凋亡,抑制移植瘤的生长,且优于单个基因的影响。 展开更多
关键词 皮下移植瘤 双基因共表达慢病毒载体 Survivin shRNA APC HT-29
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康莱特联合5-Fu治疗人胰腺癌PC-3裸鼠皮下移植瘤的实验研究 被引量：12
3
作者 王伟 金建光 秦兆寅 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期473-476,共4页
目的通过研究胰腺癌Bcl-2、Bax和血管内皮生长因子((VEGF)的变化情况与细胞凋亡的关系,探讨康莱特和5-Fu治疗胰腺癌的机制。方法建立人胰腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax和VEGF在胰腺癌移植瘤中的表... 目的通过研究胰腺癌Bcl-2、Bax和血管内皮生长因子((VEGF)的变化情况与细胞凋亡的关系,探讨康莱特和5-Fu治疗胰腺癌的机制。方法建立人胰腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax和VEGF在胰腺癌移植瘤中的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡比率,测量肿瘤体积。结果康莱特和5-Fu都可明显提高胰腺癌细胞凋亡率,降低细胞Bcl-2在蛋白水平上的表达,两者对Bax在蛋白水平上的表达无影响;康莱特明显降低移植瘤VEGF蛋白的表达;康莱特和5-Fu联合组,胰腺癌细胞凋亡比率显著高于单药组,而Bcl-2蛋白表达率显著低于单药组;康莱特和联合用药组VEGF蛋白表达率低于5-Fu组;联合用药组肿瘤体积小于单药组。结论康莱特联合5-Fu治疗胰腺癌的效果明显优于两药单独使用的效果。 展开更多
关键词 人胰腺癌 PC-3细胞 裸鼠 皮下移植瘤 细胞凋亡 免疫组织化学 Bcl-2 Bax VEGF
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shRNA靶向干扰COX-2促进人肝癌裸鼠皮下移植瘤肿瘤细胞凋亡 被引量：1
4
作者 陈光辉 涂植光 +5 位作者 孔飞飞 邱欣欣 成凤 匡文斌 李朴 刘预 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期64-66,共3页
目的:探讨重组干扰质粒pshRNA-COX-2对人肝癌细胞Hep3B裸鼠皮下移植瘤肿瘤细胞凋亡的促进作用。方法:重组干扰质粒pshRNA-COX-2转染Hep3B细胞并筛选后,将被成功转染的Hep3B细胞种植于裸鼠皮下,测量肿瘤大小,成瘤4周后处死裸鼠,绘制肿瘤... 目的:探讨重组干扰质粒pshRNA-COX-2对人肝癌细胞Hep3B裸鼠皮下移植瘤肿瘤细胞凋亡的促进作用。方法:重组干扰质粒pshRNA-COX-2转染Hep3B细胞并筛选后,将被成功转染的Hep3B细胞种植于裸鼠皮下,测量肿瘤大小,成瘤4周后处死裸鼠,绘制肿瘤生长曲线,RT-PCR和Western blot检测肿瘤组织中COX-2 mRNA和蛋白表达,电镜观察和TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果:与空白组相比,干扰组肿瘤组织中COX-2 mRNA和蛋白表达抑制率分别为48.5%和61.4%。干扰组最终瘤体大小明显小于阴性组和空白组<P<0.01)。电镜观察显示干扰组凋亡细胞增多,TUNEL法显示干扰组肿瘤细胞凋亡指数明显高于阴性组和空白组(P<0.01)。结论:pshRNA-COX-2通过靶向抑制COX-2基因表达,可明显抑制人肝癌细胞Hep3B裸鼠皮下移植瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝癌 环氧化酶-2 重组干扰质粒pshRNA-COX-2 皮下移植瘤 凋亡
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人卵巢癌细胞系HO-8910裸鼠皮下移植瘤的建立 被引量：3
5
作者 杜培 张晓薇 李勇 《广州医学院学报》 2005年第2期31-33,4,共4页
目的:探讨建立卵巢癌细胞系HO8910的裸鼠皮下移植瘤模型的适宜条件。方法:分别用2.5×106/100μL(A组),3.5×106/100μL(B组)和4.5×106/100μL(C组)的细胞接种浓度,注入裸鼠后项中间皮下,观察成瘤情况;用4.5×106/100... 目的:探讨建立卵巢癌细胞系HO8910的裸鼠皮下移植瘤模型的适宜条件。方法:分别用2.5×106/100μL(A组),3.5×106/100μL(B组)和4.5×106/100μL(C组)的细胞接种浓度,注入裸鼠后项中间皮下,观察成瘤情况;用4.5×106/100μL的细胞接种浓度,分别接种于裸鼠后项中间(C组),背部(D组)和前肢腋窝皮下(E组),观察成瘤情况;分别用第38代(F组),第25代(G组)和第10代(C组)的肿瘤细胞4.5×106/100μL,注入裸鼠后项中间,观察各组成瘤情况。结果:A组成瘤率为60%,B组和C组的成瘤率均为100%,但C组的成瘤速度明显高于B组;C组,D组和E组的成瘤率均为100%,注射肿瘤细胞后第2周,C组,D组和E组的肿瘤生长平均相对体积分别为3.0593±0.6851,2.4348±0.4862和2.4039±0.3631,各组间差异无显著性;注射肿瘤细胞后第4周,C组,D组和E组的肿瘤生长平均相对体积分别为13.4832±2.2639,9.3437±1.0986和8.9537±1.0041,C组显著高于D组和E组(P<0.01);G组的成瘤率为30%,F组的成瘤率为50%,与C组相比,差异有显著性(P<0.01)。结论:使用HO8910细胞株,接种浓度为4.5×106/100μL,接种部位为后项中间,接种时尽量使用传代次数少,细胞活性高的细胞,能获得较理想的裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 人 皮下移植瘤 裸鼠 动物模型
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阿帕替尼对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及生物钟基因表达的影响 被引量：4
6
作者 何晓晓 熊枝繁 +3 位作者 邱梦君 占静 陈仁旺 杨盛力 《山东医药》 CAS 2018年第8期31-33,共3页
目的探讨阿帕替尼对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及生物钟基因表达的影响。方法选择BALB/c裸鼠16只,将人肝癌HepG2细胞接种于右腋皮下建立皮下移植瘤模型。接种1周,随机将裸鼠分为阿帕替尼组和对照组,每组8只。阿帕替尼组给予阿帕替尼50 mg... 目的探讨阿帕替尼对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及生物钟基因表达的影响。方法选择BALB/c裸鼠16只,将人肝癌HepG2细胞接种于右腋皮下建立皮下移植瘤模型。接种1周,随机将裸鼠分为阿帕替尼组和对照组,每组8只。阿帕替尼组给予阿帕替尼50 mg/kg灌胃,对照组给予DMSO 100μL/20 g灌胃,每天1次,连续2周。两组分别于灌胃前,灌胃第3、6、9、12天及灌胃结束24 h,测量肿瘤最大径和最小径,计算肿瘤体积。末次灌胃结束24 h,颈椎脱臼法处死,剥离肿瘤,采用Real-time PCR法检测生物钟基因Per(Per1、Per2、Per3)、CLOCK、Cry(Cry1、Cry2)、BMAL1和CKIε mRNA表达。结果阿帕替尼组从灌胃第3天开始皮下移植瘤体积明显小于对照组(P均<0.05)。阿帕替尼组Per3、CLOCK、Cry2、CKIε mRNA相对表达量均明显低于对照组(P均<0.05),而Per1、Per2、BMAL1和Cry1 mRNA相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论阿帕替尼能抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长,其机制可能与下调肿瘤细胞生物钟基因Per3、CLOCK、Cry2、CKIε mRNA表达有关。 展开更多
关键词 肝癌皮下移植瘤 阿帕替尼 生物钟基因 小鼠
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丝裂霉素缓释粒子治疗裸鼠胰腺癌皮下移植瘤的效果及安全性
7
作者 丁健 王兵兵 +5 位作者 吴杰 杨青 胡翠 梅俏 许健健 许建明 《山东医药》 CAS 2018年第8期48-50,共3页
目的探讨丝裂霉素缓释粒子治疗裸鼠胰腺癌皮下移植瘤的效果及安全性。方法选择BALB/c裸鼠24只,于右前肢近腋窝处接种人胰腺癌SW1990细胞制备胰腺癌皮下移植瘤模型。常规饲养1周,随机分为粒子组、针剂组、基质组、对照组,每组6只。粒子... 目的探讨丝裂霉素缓释粒子治疗裸鼠胰腺癌皮下移植瘤的效果及安全性。方法选择BALB/c裸鼠24只,于右前肢近腋窝处接种人胰腺癌SW1990细胞制备胰腺癌皮下移植瘤模型。常规饲养1周,随机分为粒子组、针剂组、基质组、对照组,每组6只。粒子组瘤体内注入丝裂霉素缓释粒子1粒,针剂组瘤体内注入注射用丝裂霉素0.1 mL,基质组瘤体内注入不含丝裂霉素的缓释粒子1粒,对照组瘤体内注入生理盐水0.1 mL。分别于治疗前及治疗3、6、9、12、14天测量各组瘤体长径、宽径和厚度,计算瘤体体积。采用高效液相色谱法检测粒子组、针剂组瘤体内丝裂霉素浓度。治疗后观察粒子组与针剂组体质量、精神状态以及瘤体局部变化。结果粒子组、针剂组治疗6天开始瘤体体积明显低于基质组、对照组,随着治疗时间延长,粒子组从治疗9天开始瘤体体积明显低于针剂组(P均<0.05)。粒子组瘤体内丝裂霉素浓度明显高于针剂组(P<0.05)。粒子组治疗后出现的胃肠道等并发症持续时间短于针剂组。结论丝裂霉素缓释粒子能够持续抑制裸鼠胰腺癌皮下移植瘤生长,还能减轻全身毒副作用。 展开更多
关键词 胰腺癌 皮下移植瘤 丝裂霉素 间质化疗 裸鼠
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转基因小鼠源性胰腺癌组织块皮下移植瘤模型的构建与评价
8
作者 钱伟琨 李杰 +5 位作者 严彬 曹俊宇 肖莹 秦涛 马清涌 韩亮 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期368-373,共6页
目的构建基于转基因小鼠的胰腺癌组织块皮下移植瘤模型(transgenic mice-derived allografts, MDAs),为胰腺癌的体内及体外研究提供良好的实验载体模型。方法利用LSL-Kras^(G12D/+);Trp53^(fl/+);Pdx1-Cre(KPC)胰腺癌转基因小鼠的组织... 目的构建基于转基因小鼠的胰腺癌组织块皮下移植瘤模型(transgenic mice-derived allografts, MDAs),为胰腺癌的体内及体外研究提供良好的实验载体模型。方法利用LSL-Kras^(G12D/+);Trp53^(fl/+);Pdx1-Cre(KPC)胰腺癌转基因小鼠的组织块进行皮下移植,构建MDAs。利用HE染色、Masson染色和免疫组化染色评价MDAs的组织病理特征及免疫细胞浸润情况。结果 MDAs成功模拟出胰腺癌的大体和组织病理形态,且其保留了胰腺癌高增殖和高间质纤维化的病理特征。MDAs的纤维化和增殖程度较正常胰腺明显增高(P<0.05);MDAs还可成功模拟胰腺癌MPO+中性粒细胞、CD68+巨噬细胞和CD3+T淋巴细胞的浸润状态。结论 MDAs更利于在体内模拟胰腺癌的进展,是一种可行的胰腺癌研究模型。 展开更多
关键词 胰腺癌 转基因小鼠 组织块 皮下移植瘤
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人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立 被引量：3
9
作者 卢晓莉 成乐楠 +4 位作者 秦方圆 赵子仪 葛利葱 翟亚萍 杨秋云 《河南医学研究》 CAS 2020年第9期1542-1544,共3页
目的建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法将30只裸鼠随机分为两组,实验组15只,对照组15只。培养人卵巢癌细胞系SKOV3细胞,并将浓度调制2×10^7个·mL^-1,取0.2 mL注射于实验组裸鼠右侧肩胛背部皮下,接种后每日观察两组裸鼠精... 目的建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法将30只裸鼠随机分为两组,实验组15只,对照组15只。培养人卵巢癌细胞系SKOV3细胞,并将浓度调制2×10^7个·mL^-1,取0.2 mL注射于实验组裸鼠右侧肩胛背部皮下,接种后每日观察两组裸鼠精神、活动、摄食、排便、体质量等情况,是否有肿瘤生长和肿瘤生长速度等。每3 d使用游标卡尺测量肿瘤最长径和最短径,计算肿瘤体积。于接种后第42天将荷瘤裸鼠处死,剥出肿瘤,测量瘤体长径和短径,称取瘤体质量,取肿瘤组织切片后行HE染色,观察肿瘤病理变化。结果细胞注射法可成功建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型,瘤体出现时间为3~7 d,成瘤率为93.33%。实验组裸鼠的体质量、精神、活动等情况与对照组无明显差异。共有2例瘤体表面出现破溃。观察结束后,处死裸鼠后完整剥除瘤体,测得肿瘤平均体积为(416.21±134.67)mm^3,肿瘤平均质量为(0.88±0.19)g。剖开瘤体,发现4例可见瘤体中间有坏死液化,取移植瘤组织进行病理检查,肿瘤组织大体表现符合人卵巢癌的特点。结论初步建立了人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,为卵巢癌的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 卵巢癌 裸鼠 皮下移植瘤 动物模型
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HT29和HCT116结直肠癌细胞增殖及其裸鼠移植成瘤研究
10
作者 王霞 朱飞艳 +5 位作者 王晶 熊喆 韦云芳 李彬 魏红江 赵红业 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期985-991,共7页
【目的】比较HT29和HCT116两株细胞系体外培养细胞增殖和在裸鼠体内移植后的成瘤情况。【方法】检测结直肠癌细胞HT29和HCT116的细胞活力,观察克隆形成细胞的形态,检测2株细胞p53和p21蛋白的表达水平;将2株细胞移植于裸鼠右侧腹股沟皮下... 【目的】比较HT29和HCT116两株细胞系体外培养细胞增殖和在裸鼠体内移植后的成瘤情况。【方法】检测结直肠癌细胞HT29和HCT116的细胞活力,观察克隆形成细胞的形态,检测2株细胞p53和p21蛋白的表达水平;将2株细胞移植于裸鼠右侧腹股沟皮下,观察移植瘤的生长情况,记录裸鼠的体质量及移植瘤的体积。【结果】与HT29细胞相比,HCT116细胞在体外的增长率极显著升高(P<0.01),p21蛋白正常表达,p53蛋白表达水平极显著降低(P<0.01);在阿霉素存在的情况下,HCT116细胞中的p21蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。14 d内HCT116细胞移植量对裸鼠体质量无显著影响(P>0.05);单只细胞接种量为4×10^(5)和2×10^(6)个时,HT29细胞肿瘤体积显著高于HCT116细胞(P<0.05)。【结论】HCT116细胞在体外的增殖速率显著高于HT29细胞,但是在体内HT29细胞比HCT116细胞更易成瘤,其分子基础可能与HT29细胞中p53基因突变导致的p53蛋白高表达及其下游p21蛋白低表达有关;高浓度的癌细胞移植有利于肿瘤形成。本研究为结直肠癌动物模型的建立及其进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 结直肠癌 HT29细胞 HCT116细胞 细胞增殖 皮下移植瘤
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