百合无症病毒衣壳蛋白基因克隆和蛋白分析 被引量：3

1

作者 徐品三 刘纪文 +1 位作者 高晓蓉 尹雅蕾 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期476-480,共5页

根据已报道的LSV CP基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,模板为感染LSV的百合叶片的总RNA,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出大小为876bp的LSV CP基因,经测序后,对该基因编码区全长序列及相应的氨基酸序列用生物信息学软件系统进行... 根据已报道的LSV CP基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,模板为感染LSV的百合叶片的总RNA,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出大小为876bp的LSV CP基因,经测序后,对该基因编码区全长序列及相应的氨基酸序列用生物信息学软件系统进行序列分析及结构功能预测.结果表明:该基因由876个核苷酸组成,编码291个氨基酸;与GeneBank公布的其他LSV分离物的基因序列同源性为93.4%～99.0%,氨基酸同源性为84.8%～99.5%;它含有一个卷曲螺旋结构和多个磷酸化位点,平均疏水值为-0.432;含有Carlaviruses完整的衣壳蛋白保守结构域,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主. 展开更多

关键词 百合无症病毒 衣壳蛋白 序列分析 功能预测

在线阅读 下载PDF 职称材料

百合无症病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立 被引量：4

2

作者 余澍琼 陈先锋 +3 位作者 张吉红 于翠 张慧丽 闻伟刚 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期127-130,共4页

百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)是侵染百合科植物的主要病毒之一。根据该病毒不同分离株外壳蛋白基因(coat protein,CP)的保守序列,设计特异性引物与荧光探针,建立了LSV的实时荧光RTPCR检测方法。利用该方法检测LSV的2个阳... 百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)是侵染百合科植物的主要病毒之一。根据该病毒不同分离株外壳蛋白基因(coat protein,CP)的保守序列,设计特异性引物与荧光探针,建立了LSV的实时荧光RTPCR检测方法。利用该方法检测LSV的2个阳性样品,均能够得到典型扩增曲线,而在百合斑驳病毒、烟草环斑病毒、番茄环斑病毒等其他病毒阳性样品中没有典型的扩增曲线,表明了该方法的特异性。与普通RTPCR法相比,此方法灵敏度提高10倍。应用该方法,2012年6月至今,宁波出入境检验检疫局从荷兰进境的67批百合种球样品中检出53批百合无症病毒阳性,检出率为93%。 展开更多

关键词 百合无症病毒 实时荧光RT—PCR 百合科

在线阅读 下载PDF 职称材料

百合无症病毒的RT-PCR检测 被引量：7

3

作者 马书智 陈臻 徐秉良 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第5期60-62,共3页

以百合病株为材料,针对百合无症病毒(LSV)的CP基因序列,设计合成了一对特异引物,并通过RT-PCR技术扩增出与预期大小相一致的870 bp片段,而对照无任何产物,应用该方法对田间百合中的LSV的带毒情况进行检测,检出率达80%,检测灵敏度高,专... 以百合病株为材料,针对百合无症病毒(LSV)的CP基因序列,设计合成了一对特异引物,并通过RT-PCR技术扩增出与预期大小相一致的870 bp片段,而对照无任何产物,应用该方法对田间百合中的LSV的带毒情况进行检测,检出率达80%,检测灵敏度高,专一性强,为百合的病毒检测提供了一种分子生物学检测方法. 展开更多

关键词 百合无症病毒 RT-PCR 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

百合无症病毒CP基因在大肠杆菌中的表达 被引量：2

4

作者 李燕 李发慧 陈毓荃 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期171-173,共3页

应用RT-PCR 方法从感病百合总RNA中扩增出百合无症病毒的外壳蛋白基因片段,连接到原核载 体pUC19,转化大肠杆菌DH5α并用IPTG诱导表达。SDS—PAGE及Western blot分析表明,CP基因在大肠肝 菌中获得了特异性表达,融合蛋白分子量约为35kD。

关键词 百合无症病毒 外壳蛋白 原核表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

两种蚜虫携带百合无症病毒、烟草花叶病毒的基因芯片检测 被引量：1

5

作者 贾慧 郑洁 +1 位作者 孟庆江 曹志艳 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期20-24,共5页

蚜虫作为病毒的传播介体为害植物造成的经济损失远远超过蚜虫本身,因此急需建立快速、准确、灵敏的蚜虫带毒检测方法。根据百合无症病毒(LSV)和烟草花叶病毒(TMV)外壳蛋白基因保守序列设计引物与探针,制备基因芯片;用Cy3标记下游引物,... 蚜虫作为病毒的传播介体为害植物造成的经济损失远远超过蚜虫本身,因此急需建立快速、准确、灵敏的蚜虫带毒检测方法。根据百合无症病毒(LSV)和烟草花叶病毒(TMV)外壳蛋白基因保守序列设计引物与探针,制备基因芯片;用Cy3标记下游引物,提取饲毒(LSV和TMV)棉蚜、桃蚜总RNA,RT-PCR扩增产物与芯片杂交,荧光扫描仪检测并分析信号。结果表明,该芯片可以同时检测上述2种蚜虫的带毒情况,此方法有较好的特异性和重复性,能快速、准确地对介体蚜虫的带毒情况进行检测。 展开更多

关键词 棉蚜 桃蚜 百合无症病毒 烟草花叶病毒 基因芯片 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

龙山卷丹百合无症病毒的检测 被引量：4

6

作者 蒋辉 源朝政 陈海霞 《天津农业科学》 CAS 2014年第5期27-30,共4页

以龙山卷丹百合的病叶作为试材,采用DAS-ELISAS检测法对样品进行百合无症病毒的检测,检出率为58.3%;提取总RNA为模板,通过RT-PCR扩增其外壳蛋白基因,大小为287 bp,和预期条带大小一致。经Blast比对发现,该基因片段与Genbank上发表的LSV... 以龙山卷丹百合的病叶作为试材,采用DAS-ELISAS检测法对样品进行百合无症病毒的检测,检出率为58.3%;提取总RNA为模板,通过RT-PCR扩增其外壳蛋白基因,大小为287 bp,和预期条带大小一致。经Blast比对发现,该基因片段与Genbank上发表的LSV CP基因序列同源性达92%以上。 展开更多

关键词 卷丹百合 RT-PCR DAS—ELISA 百合无症病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

百合无症病毒的ELISA检测 被引量：3

7

作者 周云 薛寒青 《青海农林科技》 2008年第2期20-20,52,共2页

对两个百合品种应用ELISA检测法进行百合无症病毒检测,发现样品、阳性对照与底物的反应均表现出阳性,结果表明样品100%带有LSV病毒。

关键词 百合无症病毒 ELISA检测 样品 阳性反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

复合RT-PCR方法同步检测百合X病毒、百合无症病毒及百合斑驳病毒 被引量：13

8

作者 黎昊雁 吴姗 +2 位作者 张晓峰 方莹 施伟良 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期42-45,共4页

建立了特异性检测百合X病毒(LVX)、百合无症病毒(LSV)及百合斑驳病毒(LMoV)的单一、双重及三重PCR体系并对各体系的灵敏度进行了研究。结果表明,单一PCR体系可检测的LVX最低浓度在1×10-7μg/mL,LSV最低浓度在1×10-8μg/mL,LMo... 建立了特异性检测百合X病毒(LVX)、百合无症病毒(LSV)及百合斑驳病毒(LMoV)的单一、双重及三重PCR体系并对各体系的灵敏度进行了研究。结果表明,单一PCR体系可检测的LVX最低浓度在1×10-7μg/mL,LSV最低浓度在1×10-8μg/mL,LMoV最低浓度在1pg/mL;双重PCR体系可明显检测的LVX、LSV最低浓度在1pg/mL,LSV、LMoV最低浓度在1ng/mL,LVX、LMoV最低浓度在1pg/mL;三重PCR体系可明显检测的LVX、LSV和LMoV的最低浓度为1ng/mL。 展开更多

关键词 百合X病毒 百合无症病毒 百合斑驳病毒 复合PCR 灵敏度

在线阅读 下载PDF 职称材料

云南食用百合病毒病的发生与检测 被引量：6

9

作者 王连春 孔宝华 +2 位作者 赵丹 陈海如 李凡 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期518-521,共4页

通过田间调查、血清学技术、电镜技术、RT-PCR技术对侵染云南食用百合的主要病毒进行调查和研究,结果表明,食用百合病毒病的症状类型多为花叶,斑驳或者无症等类型。病毒种类主要是黄瓜花叶病毒(CMV),百合无症病毒(LSV)和百合斑驳病毒(LM... 通过田间调查、血清学技术、电镜技术、RT-PCR技术对侵染云南食用百合的主要病毒进行调查和研究,结果表明,食用百合病毒病的症状类型多为花叶,斑驳或者无症等类型。病毒种类主要是黄瓜花叶病毒(CMV),百合无症病毒(LSV)和百合斑驳病毒(LMoV)。其中通过ELISA检测,CMV的检出率达到53.3%,LSV的检出率达到46.7%;通过RT-PCR检测,CMV的检出率达到60%,LSV的检出率达到50%,LMoV的检出率达到30%。 展开更多

关键词 食用百合 黄瓜花叶病毒(CMV) 百合无症病毒(LSV) 百合斑驳病毒(LMoV)

在线阅读 下载PDF 职称材料

RT-PCR方法同步检测兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)两种主要病毒 被引量：3

10

作者 张玉宝 谢忠奎 +2 位作者 王亚军 郭志鸿 童勋章 《武汉植物学研究》 CSCD 北大核心 2010年第6期744-749,共6页

建立并优化了以18S rRNA为内参照的特异性检测兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)两种主要病毒:黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)的三重RT-PCR体系。结果表明,52.5°C的退... 建立并优化了以18S rRNA为内参照的特异性检测兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)两种主要病毒:黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)的三重RT-PCR体系。结果表明,52.5°C的退火温度、0.025 U/μL的Taq DNA聚合酶、0.6 mmol/L的dNTP浓度、4 mmol/L的Mg2+浓度、0.4μmol/L的各引物浓度以及30个循环等是三重PCR体系扩增的最佳条件;同时用该优化体系检测了兰州百合不同取样部位的病毒差异,发现LSV在不同取样部位的特异扩增条带的强度比较一致,而CMV差距相对较大,外鳞片CMV相对含量在整个感病植株中最高。为兰州百合主要病毒检测、脱毒组培快繁提供了技术支撑。 展开更多

关键词 兰州百合 黄瓜花叶病毒 百合无症病毒 三重RT-PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

LSV和LMoV侵染对百合光合生理和抗氧化酶活性的影响 被引量：4

11

作者 徐品三 姜旭 贾娟 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第4期408-412,共5页

以东方百合"西伯利亚"为试验材料,研究了百合无症病毒(LSV)和百合斑驳病毒(LMoV)侵染对植株光合生理和抗氧化酶活性的影响.检测结果表明:LSV侵染叶片中叶绿素a、b以及总叶绿素含量与健康叶片相比分别降低了15.8%、16.6%和11.1... 以东方百合"西伯利亚"为试验材料,研究了百合无症病毒(LSV)和百合斑驳病毒(LMoV)侵染对植株光合生理和抗氧化酶活性的影响.检测结果表明:LSV侵染叶片中叶绿素a、b以及总叶绿素含量与健康叶片相比分别降低了15.8%、16.6%和11.1%;LMoV侵染叶片分别降低了24.3%、22.6%和16.5%.LSV侵染叶片中净光合速率、胞间CO2浓度和气孔导度与健康叶片相比分别降低了19.2%、13.4%和15.1%;LMoV侵染叶片分别降低了50.6%、48.2%和29.6%.LSV侵染叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性与健康对照组相比分别增加了24.6%、29.4%、16.5%和23.4%;LMoV侵染叶片分别增加了10.6%、18.2%、9.6%和19.6%.可见,百合植株光合生理和抗氧化酶活性均受到LSV和LMoV侵染的影响,危害程度LMoV高于LSV. 展开更多

关键词 百合无症病毒 百合斑驳病毒 光合生理 抗氧化酶活性 叶绿素

在线阅读 下载PDF 职称材料