黄芪多糖联合多柔比星抗白血病细胞HL-60/A耐药的机制研究 被引量：14

1

作者 彭洪薇 张晓洁 李菲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期743-748,共6页

目的:探讨黄芪多糖联合多柔比星对耐药白血病细胞HL-60/A的协同抗肿瘤机制。方法:RT-PCR、Western blot及CCK-8试验鉴定急性早幼粒细胞耐药株HL-60/A的耐药表型;然后通过CCK-8试验检测黄芪多糖协同多柔比星对HL-60/A的抗肿瘤作用;Annex... 目的:探讨黄芪多糖联合多柔比星对耐药白血病细胞HL-60/A的协同抗肿瘤机制。方法:RT-PCR、Western blot及CCK-8试验鉴定急性早幼粒细胞耐药株HL-60/A的耐药表型;然后通过CCK-8试验检测黄芪多糖协同多柔比星对HL-60/A的抗肿瘤作用;Annexin-Ⅴ细胞凋亡实验检测不同药物处理后的细胞凋亡情况;Western blot检测细胞内caspase级联系统激活情况;实时定量PCR及Western blot实验分析黄芪多糖对多药耐药蛋白M RP的表达及功能影响。结果:与敏感细胞相比,HL-60/A表现出明显的耐药特征,对多柔比星的耐药倍数约为HL-60的27倍。CCK-8试验证实,黄芪多糖可有效促进多柔比星对耐药细胞HL-60/A的杀伤,且黄芪多糖与多柔比星联用可显著诱导HL-60/A细胞凋亡,同时伴随凋亡级联信号系统激活。进一步研究发现,黄芪多糖可降低HL-60/A细胞表面的MRP表达,进而抑制MRP的外排功能,增加进入耐药细胞中的药物浓度。结论:黄芪多糖联合多柔比星可有效发挥对耐药白血病细胞HL-60/A的协同抗肿瘤作用,该作用可能是通过黄芪多糖抑制HL-60/A细胞表面的MRP表达、抑制药物外排,从而增加耐药细胞内药物浓度,诱导HL-60/A细胞凋亡实现的。 展开更多

关键词 HL-60 HL-60/A细胞 黄芪多糖 多柔比星 白血病耐药

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反义RelA下调白血病耐药细胞株HL-60/E6 bcl-x_L mRNA 被引量：3

2

作者 曹文静 张瑶珍 +3 位作者 张东华 邹萍 李登举 唐锦治 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期294-297,共4页

为了探讨NF κB对白血病耐药细胞株HL 6 0 E6bcl x基因转录的影响 ,首先在体外采用间歇小剂量表阿霉素 (6ng ml)作用于HL 6 0细胞的方法 ,建立了性能稳定的广谱耐药细胞株HL 6 0 E6。然后用RT PCR方法检测 5 μmol L硫代修饰反义R... 为了探讨NF κB对白血病耐药细胞株HL 6 0 E6bcl x基因转录的影响 ,首先在体外采用间歇小剂量表阿霉素 (6ng ml)作用于HL 6 0细胞的方法 ,建立了性能稳定的广谱耐药细胞株HL 6 0 E6。然后用RT PCR方法检测 5 μmol L硫代修饰反义RelA作用于HL 6 0 E6细胞后bcl x基因mRNA水平的变化。同时应用免疫荧光技术和流式细胞术分别对HL 6 0 E6细胞中NF κB RelA的功能状态及脂质体作为寡核苷酸载体的转染效率进行评估。结果表明 ,在HL 6 0 E6细胞中RelA表达于胞核 ,NF κB处于持续活化状态。脂质体介导的寡核苷酸 (ODN)的转染效率明显高于裸ODN组 ,在 4 ,6和12小时时有显著差异 (P <0 .0 1)。反义RelA作用于HL 6 0 E6细胞后 ,bcl xL mRNA水平下降呈时间依赖性 ,8小时抑制达到最高峰 ,15小时后逐渐恢复 ,而对照组bcl xL mRNA水平变化不明显。分析结果认为 ,NF κB对bcl x有转录调节作用 ,反义技术封闭RelA亚基可以减弱NF κB对bcl xL 基因的转录激活 ,进而推测NF κB可能是白血病细胞耐药的一个重要因子。 展开更多

关键词 HL-60细胞系 E6细胞系 反义RelA bcl-xLmRNA 白血病耐药细胞株 免疫荧光技术

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裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系的建立及其生物学特性研究 被引量：9

3

作者 陈莉 许小平 +4 位作者 王健民 吕书晴 居小萍 周虹 黄正霞 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期507-511,共5页

目的:建立裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系并研究其生物学特性。方法:采用逐步递增长春新碱(VCR)剂量的方法培养高成瘤性人白血病细胞系K56g-n,采用细胞培养技术、透射电镜观察、流式细胞术、RT-PCR、免疫组化、染色体核型分析及体内... 目的:建立裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系并研究其生物学特性。方法:采用逐步递增长春新碱(VCR)剂量的方法培养高成瘤性人白血病细胞系K56g-n,采用细胞培养技术、透射电镜观察、流式细胞术、RT-PCR、免疫组化、染色体核型分析及体内接种等方法研究其生物学特性。结果:建立1株裸鼠高成瘤性人白血病多药耐药细胞系K562-n／VCR。与K562-n细胞比较,K562-n／VCR细胞对VCR耐药为其297.38倍,对蒽环类、鬼臼类等多种化疗药物具有交叉耐药性,bcr-abl融合基因仍为阳性,裸鼠体内成瘤性不变,但成瘤潜伏期缩短,成瘤体积明显增大。结论:裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系K562-n／VCR具有其独特的生物学特性。 展开更多

关键词 裸鼠高成瘤性多药耐药白血病细胞系 建立 生物学特性 长春新碱 致癌性试验

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槲皮素增敏阿霉素治疗难治耐药急性白血病疗效的研究 被引量：6

4

作者 师迎旭 杜华 +1 位作者 苏晓甜 韩艳秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1094-1103,共10页

目的:探讨槲皮素增敏阿霉素的化疗效果。方法:应用CCK-8检测不同剂量阿霉素、槲皮素及槲皮素联合阿霉素对临床难治耐药急性白血病患者的原代白血病细胞增殖的抑制作用;用槲皮素、阿霉素及二者联合用药作用于非照射T-ALL白血病小鼠,观察... 目的:探讨槲皮素增敏阿霉素的化疗效果。方法:应用CCK-8检测不同剂量阿霉素、槲皮素及槲皮素联合阿霉素对临床难治耐药急性白血病患者的原代白血病细胞增殖的抑制作用;用槲皮素、阿霉素及二者联合用药作用于非照射T-ALL白血病小鼠,观察小鼠生存期的变化,以及对于心肌损伤的程度。结果:在3个不同时间点24、48和72h,不同阿霉素浓度组(6、0.6和0.06μg/ml)与阿霉素半剂量组(3、0.3和0.03μg/ml)+槲皮素浓度0.25mmol/L组两两比较发现,对原代白血病细胞增殖抑制率总体差异无统计学意义;各药物浓度组中原代白血病细胞增殖抑制率组间比较总体差异有统计学意义,对原代白血病细胞增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性(r24h,a\c\e=0.995、r48h,a\c\e=1.000、r72h,a\c\e=0.984、r24h,b\d\f=0.993、r48h,b\d\f=0.999、r72h,b\d\f=0.960)。体内实验显示,经低剂量阿霉素联合槲皮素作用的非照射T-ALL白血病小鼠生存期无明显延长,高剂量阿霉素联合槲皮素作用的非照射T-ALL白血病小鼠生存期明显延长(P<0.05)。阿霉素联合槲皮素组相对于阿霉素组SOD活性明显提高并降低MDA含量。通过转录组测序分析并经验证发现,阿霉素联合槲皮素组和槲皮素组相对于阿霉素组小鼠,Ighv1-84与Igkv6-14均低表达。阿霉素联合槲皮素组和阿霉素组相对于槲皮素组小鼠,Ms4a1、Podx1、Mecom、Sh3bgr12、Bex4、Tdrp高表达,而Crabp1低表达。结论:槲皮素对原代白血病细胞有增殖抑制作用,其抑制细胞增殖效应表现时间依赖性;槲皮素联合阿霉素后对原代白血病细胞的增殖抑制作用明显,对原代白血病细胞的增殖抑制具有协同和相加作用,且其抑制细胞增殖效应表现为浓度和时间依赖性。槲皮素联合高剂量阿霉素可显著延长非照射T-ALL白血病小鼠的生存期并降低阿霉素对于心肌的损伤。 展开更多

关键词 难治耐药白血病 槲皮素 阿霉素 急性T淋巴细胞白血病

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阿伐他汀通过PTEN/mTOR信号调节糖酵解代谢逆转白血病耐药的作用及机制 被引量：1

5

作者 刘苗 周攀 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期38-44,共7页

目的:探讨阿伐他汀对耐阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系HL-60/ADM糖酵解代谢的影响及作用机制。方法:取对数生长期耐阿霉素白血病细胞HL-60/ADM,给予不同浓度阿伐他汀处理后,采用CCK-8法测定细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,葡萄... 目的:探讨阿伐他汀对耐阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系HL-60/ADM糖酵解代谢的影响及作用机制。方法:取对数生长期耐阿霉素白血病细胞HL-60/ADM,给予不同浓度阿伐他汀处理后,采用CCK-8法测定细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,葡萄糖消耗实验检测白血病细胞糖酵解活性,Western blot方法检测PTEN、p-m TOR、PKM2、HK2、P-gp、MRP1蛋白的表达;将PTEN-si RNA转染至HL-60/ADM细胞后,进一步采用上述方法检测PTEN低表达对阿伐他汀调节HL-60/ADM细胞凋亡及糖酵解代谢的影响。结果:CCK-8结果显示,阿伐他汀呈浓度依赖性和时间依赖性抑制HL-60/ADM细胞增殖(r=0.872,r=0.936),10μmol/L阿伐他汀干预24 h后HL-60/ADM细胞增殖活性下降最明显,增殖活性降至(32.3±2.18)%。流式细胞术结果显示,阿伐他汀诱导HL-60/ADM细胞凋亡,该作用呈浓度依赖性(r=0.796),10μmol/L阿伐他汀对HL-60/ADM细胞的诱导凋亡作用最强,细胞凋亡率达到(48.78±2.95)%。葡萄糖消耗实验结果表明阿伐他汀明显抑制HL-60/ADM细胞糖酵解活性,该作用呈浓度依赖性和时间依赖性(r=0.915,r=0.748),10μmol/L阿伐他汀干预24 h后对糖酵解活性的抑制作用最强,相对葡萄糖消耗量降至(46.53±1.71)%。Western blot结果显示,给予阿伐他汀干预24 h后,p-m TOR、PKM2、HK2、P-gp、MRP1蛋白表达呈浓度依赖性降低(r=0.737,r=0.695,r=0.829,r=0.781,r=0.632),而PTEN蛋白表达呈浓度依赖性升高(r=0.531)。进一步将PTEN-si RNA转染HL-60/ADM细胞,结果显示,低表达PTEN减弱了阿伐他汀对细胞凋亡的促进作用以及对糖酵解代谢和多药耐药的抑制作用。结论:阿伐他汀能抑制白血病耐药株HL-60/ADM细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制糖酵解代谢,推测机制可能是通过上调PTEN表达,抑制m TOR激活,下调PKM2和HK2糖酵解代谢基因表达,从而逆转耐药。 展开更多

关键词 阿伐他汀 白血病耐药 PTEN/mTOR通路 糖酵解

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白血病多药耐药研究新进展 被引量：1

6

作者 马静秋 梁辉 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期450-454,共5页

多药耐药(MDR)是白血病化疗失败的主要原因。细胞内药物转运抵抗机制是MDR的主要机制之一,其中P-糖蛋白(Pgp)已普遍被认为与急性髓细胞性白血病的不良治疗效果有关。Pgp抑制剂能使MDR的发生率下降,改善复发白血病患者的治疗效果。本文... 多药耐药(MDR)是白血病化疗失败的主要原因。细胞内药物转运抵抗机制是MDR的主要机制之一,其中P-糖蛋白(Pgp)已普遍被认为与急性髓细胞性白血病的不良治疗效果有关。Pgp抑制剂能使MDR的发生率下降,改善复发白血病患者的治疗效果。本文就几种与MDR有关的转运蛋白和Pgp抑制剂的研究新进展作一综述。 展开更多

关键词 研究新进展 白血病多药耐药 多药耐药(MDR) 急性髓细胞性白血病 治疗效果 P-糖蛋白 白血病患者 化疗失败 抵抗机制 药物转运 转运蛋白 抑制剂 PGP 细胞内 发生率

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凋亡抑制蛋白c-FLIP高表达与白血病细胞耐药的关系 被引量：1

7

作者 刘佳 王颖 +7 位作者 李赛赛 徐颖茜 邢海燕 唐克晶 田征 饶青 王敏 王建祥 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1621-1626,共6页

目的:探讨抗凋亡蛋白c-FLIP的表达对于白血病细胞系Kasumi-1细胞耐药的作用及其机制。方法:应用Tet-on系统,通过强力霉素(doxycycline,Dox)调控c-FLIP的条件性表达;将c-FLIP基因与慢病毒目的载体p LVX-Tight-puro连接,感染Kasumi-1细胞... 目的:探讨抗凋亡蛋白c-FLIP的表达对于白血病细胞系Kasumi-1细胞耐药的作用及其机制。方法:应用Tet-on系统,通过强力霉素(doxycycline,Dox)调控c-FLIP的条件性表达;将c-FLIP基因与慢病毒目的载体p LVX-Tight-puro连接,感染Kasumi-1细胞并获得稳定表达c-FLIP蛋白的稳定克隆;应用实时荧光定量PCR和Western blot方法证实c-FLIP在mRNA和蛋白水平的过表达情况;通过流式细胞术分析Fas激动剂CH11和HDAC抑制剂苯丁酸钠处理的Kasumi-1细胞的凋亡变化,以及过表达c-FLIP蛋白后对凋亡发生的影响;应用吉姆萨染色观察细胞凋亡形态变化,Western blot检测caspase-8凋亡信号通路的激活情况。结果:CH11和苯丁酸钠能够诱导Kasumi-1细胞凋亡,在Kasumi-1细胞过表达c-FLIP蛋白后,细胞能够抵抗CH11和苯丁酸钠诱导的凋亡;Western blot显示c-FLIP过表达阻滞了caspase-8凋亡信号通路的激活。结论:c-FLIP基因高表达使白血病细胞系Kasumi-1细胞对CH11和苯丁酸钠产生耐药作用。 展开更多

关键词 C-FLIP 白血病 KASUMI-1细胞 白血病细胞耐药

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抗白血病新药的临床应用

8

作者 杨品如 《湖北医药导报》 1991年第2期21-23,共3页

急性白血病(AL)为血液系常见的恶性肿瘤,1947年以前人们对其束手无策,患者常于发病后2月内死亡。此后随着细胞生物学和分子生物学的进展,抗肿瘤药物亦不断问世,AL历经了单药治疗、联合化疗、进入了正在推行的综合治疗阶段。显著地提高... 急性白血病(AL)为血液系常见的恶性肿瘤,1947年以前人们对其束手无策,患者常于发病后2月内死亡。此后随着细胞生物学和分子生物学的进展,抗肿瘤药物亦不断问世,AL历经了单药治疗、联合化疗、进入了正在推行的综合治疗阶段。显著地提高了AL的完全缓解率(CR),但仍有10～40％ 展开更多

关键词 抗白血病药 治疗应用

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舒尼替尼诱导耐药白血病细胞K562/ADR焦亡的作用及其通路研究 被引量：1

9

作者 林艳凤 黄莹莹 +3 位作者 洪小颖 吴玮 林东红 薛龑 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1272-1277,共6页

目的:探讨舒尼替尼(SU11248)对耐药白血病细胞K562/ADR死亡的诱导作用及其相关信号通路。方法:使用不同浓度舒尼替尼干预K562/ADR细胞,分别于24、48、72、96 h收集各组细胞,采用MTS法检测舒尼替尼对K562/ADR细胞增殖能力的影响,确定适... 目的:探讨舒尼替尼(SU11248)对耐药白血病细胞K562/ADR死亡的诱导作用及其相关信号通路。方法:使用不同浓度舒尼替尼干预K562/ADR细胞,分别于24、48、72、96 h收集各组细胞,采用MTS法检测舒尼替尼对K562/ADR细胞增殖能力的影响,确定适当的舒尼替尼干预时间和浓度。通过qPCR和Western blot检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平变化。使用4种不同细胞死亡抑制剂Nec-1、VX-765、CQ、Fer-1检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的死亡方式。通过qPCR和Western blot检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的焦亡相关基因mRNA和蛋白表达水平变化。结果:舒尼替尼可明显抑制K562/ADR细胞的增殖,抑制效果呈一定的时间及浓度依赖性(r_(48 h)=0.9579、r_(4μg/ml)=0.9740),其48 h的IC_(50)为(3.96±0.14)μg/ml;舒尼替尼干预后K562/ADR细胞凋亡相关基因Bax、BCL-2、Caspase-3、Caspase-9的mRNA和蛋白表达水平均无明显变化;4种不同细胞死亡抑制剂处理后,仅焦亡抑制剂VX-765能够明显逆转舒尼替尼对K562/ADR细胞的增殖抑制作用(P<0.01);舒尼替尼干预后K562/ADR细胞焦亡相关基因Caspase-1、Caspase-4、Caspase-5、NLRP3、GSDMD、IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论:舒尼替尼可诱导耐药白血病细胞K562/ADR发生焦亡,深入研究细胞焦亡相关信号通路有望为耐药白血病治疗提供实验依据。 展开更多

关键词 舒尼替尼 耐药白血病细胞 K562/ADR 焦亡 信号通路

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茶多酚体外诱导白血病细胞凋亡 被引量：5

10

作者 任莉莉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期174-177,共4页

目的:为研发天然抗白血病新药,研究茶多酚主要活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)体外诱导细胞凋亡的作用。方法:采用体视显微镜、DNA凝胶电泳及透射电镜技术,观察EGCG对体外诱导人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)凋亡的影响及其诱导... 目的:为研发天然抗白血病新药,研究茶多酚主要活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)体外诱导细胞凋亡的作用。方法:采用体视显微镜、DNA凝胶电泳及透射电镜技术,观察EGCG对体外诱导人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)凋亡的影响及其诱导凋亡的最佳作用时间和最佳作用浓度。结果:发现EGCG实验组中,HL-60细胞生长被显著抑制,DNA凝胶电泳中可见DNA条带,其细胞超微结构明显改变。当250μg/ml EGCG作用细胞6h时,其诱导细胞凋亡的作用最明显。结论:EGCG可体外诱导HL-60细胞凋亡,可能是抗白血病的侯选药。 展开更多

关键词 茶多酚 体外诱导 白血病 细胞凋亡 表没食子儿茶素没食子酸酯 抗白血病药

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Ca2+-NFAT信号通路在骨髓基质细胞介导的费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病耐药中的作用

11

作者 张焕新 韩雅慧 +7 位作者 邱婷婷 姚瑶 朱升云 牛铭山 曾令宇 李振宇 闫志凌 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期717-722,共6页

目的:探讨Ca2+-活化T细胞核因子(nuclear factors of activated T cells,NFAT)信号通路在骨髓基质细胞介导的费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药中的作用。方法:聚合酶链式反应检测Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞NFAT mRNA... 目的:探讨Ca2+-活化T细胞核因子(nuclear factors of activated T cells,NFAT)信号通路在骨髓基质细胞介导的费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药中的作用。方法:聚合酶链式反应检测Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞NFAT mRNA的转录水平;流式细胞术检测Sup-B15细胞P-糖蛋白表达;Western blot检测Sup-B15细胞NFAT蛋白的变化;Annexin V/7-AAD标记细胞,流式细胞术检测细胞凋亡;Fluo 3-AM染料标记细胞,流式细胞术检测共培养后白血病细胞Ca2+浓度变化。结果:Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞中均可检测到NFAT表达;流式细胞术未检测到Sup-B15细胞表达P-糖蛋白;临床应用的治疗浓度(2.5和5μmol/L)的环孢素(CAS)可明显抑制NFAT蛋白表达,其中5μmol/L CAS抑制作用更明显;临床治疗浓度CAS(2.5和5μmol/L)对Sup-B15细胞的凋亡无明显影响,而较高浓度CAS(10μmol/L)可诱导Sup-B15细胞的凋亡。骨髓基质细胞OP9可使Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞对伊马替尼的敏感性下降;与骨髓基质细胞OP9共培养后Sup-B15细胞Ca2+浓度升高,总NFAT蛋白水平及核蛋白水平均增加;在共培养体系中加入环孢素抑制Ca2+-NFAT信号通路,可降低OP9对Sup-B15细胞的保护作用。结论:Ca2+-NFAT信号通路有助于Ph+ALL细胞的存活,骨髓基质细胞+可通过活化Ca2+-NFAT信号通路介导Ph+ALL细胞对IM的耐药。 展开更多

关键词 Ph^+急性淋巴细胞白血病 白血病细胞耐药 活化T细胞核因子 骨髓基质细胞

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益气养阴法方药促进KG1a进入细胞周期而增强DNR敏感性的研究 被引量：4

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作者 李红玉 史哲新 +3 位作者 李德冠 杨向东 闫理想 刘富春 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第2期369-372,共4页

目的:探讨益气养阴法方药对白血病干细胞(Leukemia Stem Cells,LSC)KG1a细胞周期及其增殖的影响。方法:WST-8法检测益气养阴方含药血清对KG1a体外增殖的影响;WST-8法检测经益气养阴方含药血清联合柔红霉素(DNR)对的KG1a细胞体外增殖的影... 目的:探讨益气养阴法方药对白血病干细胞(Leukemia Stem Cells,LSC)KG1a细胞周期及其增殖的影响。方法:WST-8法检测益气养阴方含药血清对KG1a体外增殖的影响;WST-8法检测经益气养阴方含药血清联合柔红霉素(DNR)对的KG1a细胞体外增殖的影响;流式细胞术分析益气养阴方含药血清对KG1a细胞周期G0/G1期、S期、G2M期的影响。结果:益气养阴方含药血清对KG1a细胞体外增殖抑制作用不明显,呈一定时间及剂量依赖性,但各浓度相比抑制率无明显差异;含药兔血清20μL、40μL浓度组联合DNR对KG1a细胞有明显的抑制作用,且随浓度的增加和作用时间的延长而增强,且40μL浓度组含药兔血清联合DNR组48 h(72.5%)后抑制率显著高于DNR组(P<0.01);益气养阴方含药血清可促使KG1a细胞由G0期进入细胞周期,并呈剂量依赖性;结论:益气养阴含药血清可能通过促进KG1a细胞由G0期进入细胞周期,从而增强DNR的体外杀伤作用,可显著降低白血病细胞的耐药性。 展开更多

关键词 益气养阴法方药 KG1a细胞 白血病多药耐药 细胞周期

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活化Chk1引起的G_2/M期阻滞在调节K562/A02细胞耐药中的机制探讨 被引量：4

13

作者 王海燕 张敏 +5 位作者 邹萍 游泳 郭静明 唐晓琼 赵智刚 吴耀辉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1105-1109,共5页

本研究探讨活化的Chk1对白血病细胞周期及凋亡的影响,探究Chk1调控肿瘤细胞耐药的机制。以慢性粒细胞白血病细胞系K562及其耐药细胞系K562/A02(耐阿霉素)为研究对象,与阿霉素共孵育后,用流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测Chk1mRNA... 本研究探讨活化的Chk1对白血病细胞周期及凋亡的影响,探究Chk1调控肿瘤细胞耐药的机制。以慢性粒细胞白血病细胞系K562及其耐药细胞系K562/A02(耐阿霉素)为研究对象,与阿霉素共孵育后,用流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测Chk1mRNA表达水平,Westernblot检测转染前后Chk1磷酸化水平;靶向Chk1shRNA抑制细胞内Chk1的表达后,用流式细胞术检测阿霉素作用后细胞的凋亡情况。结果表明阿霉素致K562/A02细胞阻滞在G2/M期的细胞百分率为(54.12±0.57)%,显著高于K562细胞(36.99±1.28)%;Chk1mRNA表达水平在K562与K562/A02细胞间无显著差异;Chk1磷酸化水平在K562/A02细胞为0.79±0·56,在K562细胞为0.27±1·47,其差异有统计学意义。转染Chk1shRNA后,两株细胞的Chk1磷酸化水平显著下降。转染组K562、K562/A02细胞凋亡率分别是空载体转染组的1.30倍和3.84倍。结论Chk1的活化水平调控着K562/A02细胞对阿霉素的敏感性。 展开更多

关键词 CHK1 G2/M期阻滞 K562细胞 K562/A02细胞 RNA干扰 白血病细胞耐药

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雄黄微生物提取液对K562/ADM细胞P-糖蛋白和多药耐药基因表达的影响 被引量：4

14

作者 张景红 李红玉 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第8期855-860,共6页

目的:研究雄黄微生物提取液(RBS)诱导K562/ADM细胞凋亡的作用,并探讨其对P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药基因(MDRI)表达的影响。方法:采用"微生物浸出"法制备RBS,并以H3AsO3作为阳性对照,AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞... 目的:研究雄黄微生物提取液(RBS)诱导K562/ADM细胞凋亡的作用,并探讨其对P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药基因(MDRI)表达的影响。方法:采用"微生物浸出"法制备RBS,并以H3AsO3作为阳性对照,AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞P-gp表达率;逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测细胞MDRI mRNA表达水平。结果:RBS可诱导多药耐药白血病细胞发生典型凋亡,抑制P-gp的表达,下调MDRImRNA表达水平。在含砷量相同的条件下,RBS诱导效应明显强于H3AsO3。结论:诱导细胞凋亡、下调P-gp/MDRI蛋白的表达,可能是雄黄逆转白血病耐药的重要分子机制。 展开更多

关键词 雄黄微生物提取液 耐药白血病细胞 凋亡 P-糖蛋白 多药耐药基因

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2012年10月FDA批准新药概况

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《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期529-529,共1页

2012年10月,FDA批准新分子实体药品2个,新剂型药品3个,生物制剂1个。新分子实体分别为治疗癫痫药Fy-compa,治疗白血病药Synribo。新剂型是Cystaran（半胱胺滴眼液）,Nucynta（他喷他多口服溶液）,Oxtellar XR（奥卡西平缓释片）。生物... 2012年10月,FDA批准新分子实体药品2个,新剂型药品3个,生物制剂1个。新分子实体分别为治疗癫痫药Fy-compa,治疗白血病药Synribo。新剂型是Cystaran（半胱胺滴眼液）,Nucynta（他喷他多口服溶液）,Oxtellar XR（奥卡西平缓释片）。生物制剂是Jetrea，用于治疗症状性玻璃体黄斑黏连（VMA）。 展开更多

关键词 FDA批准 新分子实体 新药 生物制剂 白血病药 口服溶液 奥卡西平 新剂型

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2012年9月FDA批准新药概况

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《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期485-485,共1页

2012年9月,FDA批准新分子实体药物4个,新剂型2个。新分子实体为治疗白血病药Bosulif、治疗多发性硬化症药Aubagio、用于前列腺癌检测的显像剂Choline C11以及治疗晚期肠癌药Stivarga。新剂型Quillivant

关键词 FDA批准 新分子实体 新药 多发性硬化症 盐酸哌甲酯 白血病药 前列腺癌 晚期肠癌

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稳定下调血管内皮钙黏蛋白表达对K562细胞药物敏感性的影响

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作者 洪菲 张焕新 +5 位作者 陈翀 闫志凌 吴庆运 曾令宇 李振宇 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期691-697,共7页

目的:探索稳定下调VE-cadherin蛋白对K562细胞药物敏感性的影响及其可能的机制。方法:设计靶向人VE-cadherin的特异性干扰序列,连同IRES-GFP及NEO基因片段,构建重组慢病毒载体;三质粒系统包装慢病毒颗粒,感染K562细胞,筛选稳定下调VE-ca... 目的:探索稳定下调VE-cadherin蛋白对K562细胞药物敏感性的影响及其可能的机制。方法:设计靶向人VE-cadherin的特异性干扰序列,连同IRES-GFP及NEO基因片段,构建重组慢病毒载体;三质粒系统包装慢病毒颗粒,感染K562细胞,筛选稳定下调VE-cadherin的K562细胞。应用CCK8法测定K562细胞对伊马替尼药物敏感性的变化,AnnexinⅤ/7-AAD标记细胞,流式细胞术检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测白血病细胞CD133、ALDH1的转录水平;Western blot方法检测白血病细胞VE-cadherin、BCR-ABL和β-catenin表达水平。结果:成功构建重组慢病毒载体pLB-sh VEC-NEO-IRES-GFP,并包装慢病毒,筛选出稳定下调VE-cadherin蛋白的K562细胞株。稳定下调K562细胞VE-cadherin表达后,在相同药物浓度处理下白血病细胞增殖率降低,凋亡率升高,CD133及ALDH1转录水平降低,BCR-ABL融合蛋白表达水平无明显变化,总β-catenin蛋白表达水平下降,细胞核β-catenin蛋白水平亦下降。结论:稳定下调K562细胞VE-cadherin蛋白的表达可使白血病细胞药物敏感性增高,其机制可能与降低β-catenin蛋白的稳定性、减少β-catenin蛋白的核转位有关的。 展开更多

关键词 K562细胞 白血病耐药 血管内皮钙黏蛋白 Β-CATENIN 白血病干细胞

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甲醛活化壳聚糖制备固定化l-天冬酰胺酶 被引量：12

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作者 周纪宁 江体乾 +1 位作者 方波 李永丰 《功能高分子学报》 CAS CSCD 1998年第4期534-538,共5页

研究了以甲醛活化的壳聚糖为载体固定化ｌ天冬酰胺酶，其活力回收可达到１１３％，比用以戊二醛为交联剂进行固定化的活力回收要高出五倍多。分别从缓冲液的ｐＨ值及甲醛用量等方面进行了固定化ｌ－天冬酰胺酶的条件优化，并且对固定... 研究了以甲醛活化的壳聚糖为载体固定化ｌ天冬酰胺酶，其活力回收可达到１１３％，比用以戊二醛为交联剂进行固定化的活力回收要高出五倍多。分别从缓冲液的ｐＨ值及甲醛用量等方面进行了固定化ｌ－天冬酰胺酶的条件优化，并且对固定化酶的性质作了探讨。 展开更多

关键词 壳聚糖 天冬酰胺酶 固定化酶 抗白血病药

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三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞的诱导凋亡作用 被引量：7

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作者 旭东 王建华 胡美玉 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期473-475,F003,共4页

目的　研究三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞 (PIEC)的诱导凋亡作用。方法　采用MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、细胞涂片苏丹Ⅲ染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后PIEC的变化。结果　PIEC细胞与三氧化二砷共孵育... 目的　研究三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞 (PIEC)的诱导凋亡作用。方法　采用MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、细胞涂片苏丹Ⅲ染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后PIEC的变化。结果　PIEC细胞与三氧化二砷共孵育后出现细胞变圆、贴壁减少、上浮、细胞空泡样变性 ,脂肪颗粒增多 ;电镜等观察到核膜皱缩、核染色质凝结、边集等细胞凋亡现象 ,并且在一定的范围内该现象随药物浓度的增加而明显。结论　一定浓度的三氧化二砷能抑制PIEC细胞的生长 ,细胞脂肪变性 ,并诱导细胞凋亡。提示向肿瘤组织局部导入三氧化二砷可以抑制肿瘤局部供血动脉内皮的生长 ,促进供血动脉闭塞。 展开更多

关键词 三氧化二砷 猪髂动脉 内皮细胞 细胞凋亡 抗白血病药

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Chk1基因沉默增强K562/A02细胞对阿霉素敏感性的实验研究 被引量：1

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作者 王海燕 邹萍 +2 位作者 张敏 游泳 刘芳 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期173-176,共4页

目的研究Chk1基因沉默对人红白血病耐药细胞株K562/A02(耐阿霉素)生长的影响,探讨Chk1在白血病细胞耐药中的作用。方法通过电穿孔转染法将特异性靶向Chk1的短发卡状RNA(shRNA)导入K562/A02细胞,应用RT-PCR、Weston-blot检测细胞内Chk1... 目的研究Chk1基因沉默对人红白血病耐药细胞株K562/A02(耐阿霉素)生长的影响,探讨Chk1在白血病细胞耐药中的作用。方法通过电穿孔转染法将特异性靶向Chk1的短发卡状RNA(shRNA)导入K562/A02细胞,应用RT-PCR、Weston-blot检测细胞内Chk1的表达,经阿霉素作用后,流式细胞术(FCM)检测其细胞周期分布及细胞凋亡率,MTT法检测细胞增殖。结果与对照组和空载体转染组相比,shRNA使细胞中Chk1 mRNA水平下降了66%,蛋白水平下降了60%。抑制Chk1的表达可解除阿霉素引起的G2/M期阻滞;使阿霉素诱导的细胞凋亡率由转染前的(5.67±0.78)%上升到(19.25±1.41)%;在阿霉素浓度为0.4 mg/L、4 mg/L时,细胞的增殖活性分别下降12%、20%。结论靶向Chk1 shRNA有效地抑制了Chk1的表达,阻断了细胞周期检测点信号传导通路,从而增强了K562/A02细胞对阿霉素的敏感性,有可能为临床上克服白血病的化疗耐药提供新的作用靶点及治疗途径。 展开更多

关键词 Chk1基因 K562/A02细胞 RNA干扰 白血病细胞耐药

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