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针对断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL)b3a2位点的兔多克隆抗体制备及鉴定
被引量：
1
1
作者
李香凝
屈佳肴
+6 位作者
蒋静
王丽
罗迪贤
李佳
段丽丽
贺荣章
胡政
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期746-751,共6页
目的制备兔抗断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL)b3a2位点的多克隆抗体并鉴定其特异性。方法针对BCR-ABL融合蛋白b3a2型的特异性抗原序列,设计并合成纯度高于90%的多肽。一方面通过透孔螺血蓝蛋白(KLH)偶联融合多肽用于...
目的制备兔抗断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL)b3a2位点的多克隆抗体并鉴定其特异性。方法针对BCR-ABL融合蛋白b3a2型的特异性抗原序列,设计并合成纯度高于90%的多肽。一方面通过透孔螺血蓝蛋白(KLH)偶联融合多肽用于免疫新西兰兔,多次加强免疫得到抗血清;另一方面通过仅偶联单独BCR或者ABL肽段对抗血清进行二次纯化,吸附并去除未结合融合表位的抗血清以达到进一步纯化抗体的效果。最终得到的抗血清用于ELISA及Western blot法检测。结果免疫前兔血清背景均低,免疫后抗血清效价达到1∶32000,满足实验要求。抗原亲和纯化所得抗体纯度及效价高,Western blot法检测表明抗血清能特异性识别BCR-ABL融合基因的b3a2位点,特异性好。结论制备了针对BCR-ABL基因b3a2位点的特异性兔源多克隆抗体。
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关键词
断裂点集簇区-Abelson鼠
白血病
病毒
癌
基因
(BCR-ABL)
b3a2
多克隆抗体
亲和纯化
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职称材料
siRNA沉默RALA基因影响人白血病K562细胞增殖和凋亡
被引量：
1
2
作者
李育敏
朱雪姣
+1 位作者
谷景义
费嘉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期625-630,共6页
目的:研究小干扰RNA(siRNA)抑制v-ral猴白血病病毒癌基因同系物A(RALA)基因表达对人慢性粒细胞性白血病K562细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用LipofectamineTM2000将化学合成的RALA siRNA转染体外培养的K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检...
目的:研究小干扰RNA(siRNA)抑制v-ral猴白血病病毒癌基因同系物A(RALA)基因表达对人慢性粒细胞性白血病K562细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用LipofectamineTM2000将化学合成的RALA siRNA转染体外培养的K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测RALA siRNA对K562细胞增殖的影响;台盼蓝拒染法检测RALA siRNA对K562细胞存活率的影响;real-time PCR检测RALA mRNA表达水平;Western blotting检测RALA蛋白表达水平;annexin V/PI双染流式细胞仪检测RALA siRNA对K562细胞凋亡的影响;Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞形态学变化。结果:RALA siRNA可明显抑制K562细胞内RALA mRNA和蛋白的表达(P<0.05);与阴性对照组相比,转染RALA siRNA的K562细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);流式细胞术结果显示转染RALA siRNA的K562细胞凋亡较阴性对照组显著增加(P<0.05);Hoechst 33258染色见转染RALA siRNA的K562细胞出现典型的凋亡形态学变化。结论:癌基因RALA在白血病发生发展过程中发挥重要作用。siRNA下调RALAmRNA和蛋白的表达,可抑制人白血病K562细胞增殖,诱导细胞凋亡,提示RALA可能是白血病治疗的新靶点。
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关键词
v-ral猴
白血病
病毒
癌
基因
同系物A
小干扰RNA
白血病
细胞增殖
细胞凋亡
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职称材料
微小RNA-16对K562细胞向巨核细胞系分化的影响
被引量：
1
3
作者
史金龙
刘峰
+2 位作者
胡颖
袁玉林
卢运
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期585-589,共5页
目的:观察微小RNA-16(microRNA-16,miR-16)对人白血病细胞K562向巨核细胞系分化的影响,并初步探索其中可能的机制。方法:在K562细胞中通过转染miR-16模拟物(mimics)或miR-16抑制物(inhibitor),实时荧光定量PCR检测miR-16的水平变化,通...
目的:观察微小RNA-16(microRNA-16,miR-16)对人白血病细胞K562向巨核细胞系分化的影响,并初步探索其中可能的机制。方法:在K562细胞中通过转染miR-16模拟物(mimics)或miR-16抑制物(inhibitor),实时荧光定量PCR检测miR-16的水平变化,通过流式细胞术检测巨核细胞系分化指标CD41、CD42b及CD61的表达。用Western blotting检测miR-16对下游白血病癌基因(myeloblastosis oncogene,MYB)蛋白水平的影响,进而利用流式细胞术检测miR-16是否通过影响MYB调控CD41、CD42b及CD61的表达。结果:转染miR-16-mimics可显著升高K562细胞中的miR-16水平并促进CD41、CD42b及CD61的表达(P<0.05),而转染miR-16-inhibitor可明显抑制K562细胞中的miR-16水平同时降低CD41、CD42b及CD61的表达(P<0.05);Western blotting证实miR-16可调控MYB蛋白水平,而沉默MYB可逆转miR-16对CD41、CD42b及CD61表达的调控作用。结论:miR-16可通过调控MYB的表达,调节人白血病细胞K562向巨核细胞系分化的能力。
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关键词
微小RNA-16
白血病癌基因
巨核细胞系分化
血小板
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职称材料
题名
针对断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL)b3a2位点的兔多克隆抗体制备及鉴定
被引量：
1
1
作者
李香凝
屈佳肴
蒋静
王丽
罗迪贤
李佳
段丽丽
贺荣章
胡政
机构
南华大学附属郴州医院南华大学转化医学研究所
郴州市第一人民医院高通量分子诊断技术国家地方联合工程实验室
南方医科大学第一临床学院
深圳市第三人民医院检验科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期746-751,共6页
基金
湖南省自然科学基金(2017JJ2004)
第九批博士后科学基金特别资助项目(2016T90765)
湖南省卫计委课题(C20180166)。
文摘
目的制备兔抗断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL)b3a2位点的多克隆抗体并鉴定其特异性。方法针对BCR-ABL融合蛋白b3a2型的特异性抗原序列,设计并合成纯度高于90%的多肽。一方面通过透孔螺血蓝蛋白(KLH)偶联融合多肽用于免疫新西兰兔,多次加强免疫得到抗血清;另一方面通过仅偶联单独BCR或者ABL肽段对抗血清进行二次纯化,吸附并去除未结合融合表位的抗血清以达到进一步纯化抗体的效果。最终得到的抗血清用于ELISA及Western blot法检测。结果免疫前兔血清背景均低,免疫后抗血清效价达到1∶32000,满足实验要求。抗原亲和纯化所得抗体纯度及效价高,Western blot法检测表明抗血清能特异性识别BCR-ABL融合基因的b3a2位点,特异性好。结论制备了针对BCR-ABL基因b3a2位点的特异性兔源多克隆抗体。
关键词
断裂点集簇区-Abelson鼠
白血病
病毒
癌
基因
(BCR-ABL)
b3a2
多克隆抗体
亲和纯化
Keywords
BCR-ABL
b3a2
polyclonal antibody
affinity purification
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
siRNA沉默RALA基因影响人白血病K562细胞增殖和凋亡
被引量：
1
2
作者
李育敏
朱雪姣
谷景义
费嘉
机构
暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期625-630,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81170496)
暨南大学科研培育与创新基金(前瞻性与基础)研究项目(No.21609406)
文摘
目的:研究小干扰RNA(siRNA)抑制v-ral猴白血病病毒癌基因同系物A(RALA)基因表达对人慢性粒细胞性白血病K562细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用LipofectamineTM2000将化学合成的RALA siRNA转染体外培养的K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测RALA siRNA对K562细胞增殖的影响;台盼蓝拒染法检测RALA siRNA对K562细胞存活率的影响;real-time PCR检测RALA mRNA表达水平;Western blotting检测RALA蛋白表达水平;annexin V/PI双染流式细胞仪检测RALA siRNA对K562细胞凋亡的影响;Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞形态学变化。结果:RALA siRNA可明显抑制K562细胞内RALA mRNA和蛋白的表达(P<0.05);与阴性对照组相比,转染RALA siRNA的K562细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);流式细胞术结果显示转染RALA siRNA的K562细胞凋亡较阴性对照组显著增加(P<0.05);Hoechst 33258染色见转染RALA siRNA的K562细胞出现典型的凋亡形态学变化。结论:癌基因RALA在白血病发生发展过程中发挥重要作用。siRNA下调RALAmRNA和蛋白的表达,可抑制人白血病K562细胞增殖,诱导细胞凋亡,提示RALA可能是白血病治疗的新靶点。
关键词
v-ral猴
白血病
病毒
癌
基因
同系物A
小干扰RNA
白血病
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
v-ral simian leukemia viral oncogene homolog A
siRNA
Leukemia
Cell proliferation
Apoptosis
分类号
R342.7 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
微小RNA-16对K562细胞向巨核细胞系分化的影响
被引量：
1
3
作者
史金龙
刘峰
胡颖
袁玉林
卢运
机构
武汉大学基础医学院解剖教研室
荆州市第三人民医院普胸外科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期585-589,共5页
文摘
目的:观察微小RNA-16(microRNA-16,miR-16)对人白血病细胞K562向巨核细胞系分化的影响,并初步探索其中可能的机制。方法:在K562细胞中通过转染miR-16模拟物(mimics)或miR-16抑制物(inhibitor),实时荧光定量PCR检测miR-16的水平变化,通过流式细胞术检测巨核细胞系分化指标CD41、CD42b及CD61的表达。用Western blotting检测miR-16对下游白血病癌基因(myeloblastosis oncogene,MYB)蛋白水平的影响,进而利用流式细胞术检测miR-16是否通过影响MYB调控CD41、CD42b及CD61的表达。结果:转染miR-16-mimics可显著升高K562细胞中的miR-16水平并促进CD41、CD42b及CD61的表达(P<0.05),而转染miR-16-inhibitor可明显抑制K562细胞中的miR-16水平同时降低CD41、CD42b及CD61的表达(P<0.05);Western blotting证实miR-16可调控MYB蛋白水平,而沉默MYB可逆转miR-16对CD41、CD42b及CD61表达的调控作用。结论:miR-16可通过调控MYB的表达,调节人白血病细胞K562向巨核细胞系分化的能力。
关键词
微小RNA-16
白血病癌基因
巨核细胞系分化
血小板
Keywords
MicroRNA-16
Myeloblastosis oncogene
Megakaryocytic differentiation
Platelets
分类号
R558 [医药卫生—血液循环系统疾病]
R363.2 [医药卫生—病理学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
针对断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL)b3a2位点的兔多克隆抗体制备及鉴定
李香凝
屈佳肴
蒋静
王丽
罗迪贤
李佳
段丽丽
贺荣章
胡政
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
siRNA沉默RALA基因影响人白血病K562细胞增殖和凋亡
李育敏
朱雪姣
谷景义
费嘉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
微小RNA-16对K562细胞向巨核细胞系分化的影响
史金龙
刘峰
胡颖
袁玉林
卢运
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
在线阅读
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职称材料
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