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重组腺病毒介导人类白细胞抗原-G基因转染恒河猴树突状细胞对T细胞的增殖作用 被引量:3
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作者 陈哲 胡明道 +3 位作者 田大广 魏晓平 于恒海 陈鹏 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第1期5-9,共5页
目的人类白细胞抗原-G(HLA-G)通过与树突状细胞(DC)表面的免疫球蛋白样转录体(ILT2)和ILT4(CD85d)结合,广泛参与机体的免疫耐受的过程。探讨经HLA-G重组腺病毒载体感染后的恒河猴未成熟树突状细胞刺激T细胞的增殖作用。方法麻醉恒河猴... 目的人类白细胞抗原-G(HLA-G)通过与树突状细胞(DC)表面的免疫球蛋白样转录体(ILT2)和ILT4(CD85d)结合,广泛参与机体的免疫耐受的过程。探讨经HLA-G重组腺病毒载体感染后的恒河猴未成熟树突状细胞刺激T细胞的增殖作用。方法麻醉恒河猴获取新鲜骨髓血,采用密度梯度离心法,分离获得的单个核细胞行免疫磁珠法获得CD34+细胞。添加小剂量细胞因子联合诱导分化CD34+细胞,从而获得树突状细胞。介导HLA-G的重组腺病毒经过转染未成熟树突状细胞后,检测病毒感染效率,Western blot检测HLA-G在未成熟树突状细胞中的表达。以恒河猴T细胞作为反应细胞,将介导HLA-G的重组腺病毒转染的不同状态下的DC为刺激细胞,进行混合淋巴细胞实验。设置5组:即成熟树突状细胞组(mDC组);未成熟树突状细胞组(imDC组);imDC(L)组:在第7天成功获得imDC后加入脂多糖100 ng/m L;imDC(V)组:重组腺病毒介导HLA-G感染的imDC,方法同前;imDC(L+V)组:重组腺病毒同样转染imDC,同时在培养过程中添加100ng/m L的脂多糖。根据DC与T细胞不同比例(1∶5、1∶10、1∶20、1∶40)计算各组刺激指数(SI)。结果成功培养获得恒河猴未成熟树突状细胞,HLA-G在该细胞中表达。流式细胞术检测结果发现DC的纯度高达92.3%,imDC组则高达72.39%,CD4+T细胞阳性率纯度>80%。混合淋巴细胞实验分析DC刺激T细胞增殖结果表明,不同DC与T细胞比例(1∶5、1∶10、1∶20、1∶40)下,imDC组SI为1.63±0.03、1.52±0.04、1.39±0.03和1.21±0.01;mDC组SI为2.23±0.05、2.01±0.03、1.65±0.02和1.54±0.05;imDC(L)组SI为2.25±0.04、1.96±0.02、1.62±0.03和1.48±0.01;imDC(V)组SI为1.46±0.04、1.33±0.02、1.20±0.04和1.04±0.02;imDC(L+V)组SI为1.67±0.03、1.59±0.04、1.38±0.03和1.24±0.03。与imDC组比较,mDC组、imDC(L)组SI明显增高(P<0.01);与imDC(V)组比较,imDC组、mDC组、imDC(L)组、imDC(L+V)组SI明显增高(P<0.01);与imDC(L+V)组比较,mDC组、imDC(L)组SI明显增高(P<0.01)。结论重组腺病毒介导HLA-G转染的恒河猴未成熟树突状细胞能够有效抑制恒河猴T细胞的增殖。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原-g基因 T细胞 免疫耐受 恒河猴
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转化生长因子-β诱导胃癌细胞人白细胞抗原-G表达机制的研究
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作者 关中正 任国琰 +2 位作者 张忠宝 刘凤军 唐乾利 《菏泽医学专科学校学报》 2016年第3期17-19,31,共4页
目的 探讨转化生长因子-β诱导胃癌细胞人白细胞抗原-G的表达及可能作用机制。方法 胃癌患者20例,胃癌组织及癌旁组织标本,同时采集术前1天相应患者的外周血标本。肿瘤组织和以及癌旁组织在-80°液氮冷冻保存,10%福尔马林溶液中固定... 目的 探讨转化生长因子-β诱导胃癌细胞人白细胞抗原-G的表达及可能作用机制。方法 胃癌患者20例,胃癌组织及癌旁组织标本,同时采集术前1天相应患者的外周血标本。肿瘤组织和以及癌旁组织在-80°液氮冷冻保存,10%福尔马林溶液中固定2-3天洗涤、浸腊、包埋以及防脱片。相应外周血标本中可溶性人白细胞抗原-G浓度检测。采用ELISA对转化生长因子-β和人白细胞抗原-G的检测,应用转化生长因子-βkit、可溶性人白细胞抗原-G kit检测胃癌细胞转化生长因子-β与人白细胞抗原-G的浓度。应用SPSS 17.0软件,所获数据采用皮尔逊相关分析法和2检验。结果 在胃癌细胞以及组织中转化生长因子-β及人白细胞抗原-G呈高表达水平,两者的表达呈相关性。不同浓度转化生长因子-β刺激能上调人白细胞抗原-G不同程度表达,转化生长因子-β表达和人白细胞抗原-G的表达在胃癌组织中及外周血中的浓度呈显著正相关。结论 转化生长因子-β参与了胃癌组织中人白细胞抗原-G的表达上调说明转化生长因子-β和人白细胞抗原-G在胃癌组织及外周血中的蛋白水平呈正相关;进一步阐明转化生长因子-β不仅与胃癌的活化和转移相关。 展开更多
关键词 白细胞抗原-g 转化生长因子-Β 胃癌
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卵巢恶性肿瘤组织中HLA-G、HLA-E的表达及意义 被引量:6
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作者 王建英 许茜 +2 位作者 吴淑娟 李勇 程建新 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第15期1-3,共3页
目的探讨人白细胞抗原(HLA)在卵巢恶性肿瘤发生、发展中的作用。方法采用RT-PCR和流式细胞分析技术检测60份卵巢恶性肿瘤组织(恶性组)、30份卵巢良性肿瘤组织(良性组)和10份正常卵巢组织(对照组)标本中HLA-G、HLA-E的表达。结果恶性组HL... 目的探讨人白细胞抗原(HLA)在卵巢恶性肿瘤发生、发展中的作用。方法采用RT-PCR和流式细胞分析技术检测60份卵巢恶性肿瘤组织(恶性组)、30份卵巢良性肿瘤组织(良性组)和10份正常卵巢组织(对照组)标本中HLA-G、HLA-E的表达。结果恶性组HLA-G、HLA-E阳性表达率显著高于良性组与对照组(P均<0.05);HLA-G、HLA-E表达与肿瘤组织类型无关,与临床分期、病理分级显著相关,临床期别越晚、组织分化越差,抗原表达水平越高。结论HLA-G、HLA-E参与了卵巢恶性肿瘤的发生、发展过程,可能机制为癌细胞产生免疫耐受,逃逸宿主的免疫监视。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 白细胞抗原-g 白细胞抗原-E 免疫逃逸
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HLA-G基因转录因子的生物信息学分析 被引量:2
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作者 廖贵益 钟金彪 +1 位作者 赵飞 丁汉东 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第30期37-39,共3页
目的分析人白细胞抗原-G(HLA-G)基因的转录调控因子。方法利用生物信息学技术,从UCSC基因组数据库获取HLA-G基因的启动子区序列,登陆JASPAR数据库,在线预测HLA-G基因的转录调控因子,将得分阈值设定为≥95%并对涉及的转录因子进行分析。... 目的分析人白细胞抗原-G(HLA-G)基因的转录调控因子。方法利用生物信息学技术,从UCSC基因组数据库获取HLA-G基因的启动子区序列,登陆JASPAR数据库,在线预测HLA-G基因的转录调控因子,将得分阈值设定为≥95%并对涉及的转录因子进行分析。结果成功获得了长度为2 kb的HLA-G基因启动子区序列。该启动子区涉及11个家族22种转录因子,其中8个转录因子家族的生物学功能涉及胚胎发育,4个转录因子家族的生物学功能涉及免疫阻遏、免疫耐受。结论 HLA-G基因的表达调控是多种转录因子作用的复杂网络过程。HLA-G转录因子在调控胚胎发育、诱导免疫耐受等过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 白细胞抗原-g 启动子 转录因子 生物信息学技术
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妊高征患者外周血HLA-G水平及CD_4^+/CD_8^+与眼底病变的关系 被引量:2
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作者 房炳华 孟博 雷宁玉 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第15期4-6,共3页
目的探讨妊娠高血压综合征(PIH)患者外周血人白细胞抗原-G(HLA-G)水平及T细胞亚群变化与眼底病变的关系。方法分别采用ELISA法和流式细胞技术检测40例PIH患者(观察组)和20例正常孕妇(对照组)分娩前、后血清HLA-G水平和CD4+/CD8+,分析其... 目的探讨妊娠高血压综合征(PIH)患者外周血人白细胞抗原-G(HLA-G)水平及T细胞亚群变化与眼底病变的关系。方法分别采用ELISA法和流式细胞技术检测40例PIH患者(观察组)和20例正常孕妇(对照组)分娩前、后血清HLA-G水平和CD4+/CD8+,分析其与眼底病变的关系。结果观察组分娩前HLA-G水平随病情加重而降低,并且随眼底病变加重而降低;与PIH眼底病变程度呈负相关(r=-0.655,P<0.01);CD4+/CD8+与PIH病情呈负相关(r=-0.344,P<0.05),而与眼底病变程度无明显相关性。分娩前、后眼底病变与PIH病情均呈显著正相关(r分别为0.809、0.731,P均<0.01)。结论血清HLA-G水平可作为反映妊高征病情和眼底视网膜病变程度的指标之一。 展开更多
关键词 妊娠高血压综合征 眼底病变 白细胞抗原-g T细胞亚群
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胃癌患者血清miR-663、sHLA-G的表达及意义 被引量:4
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作者 唐雪峰 张蝶 张磊 《山东医药》 CAS 2021年第7期37-40,共4页
目的探讨胃癌患者血清微小RNA-663(miR-663)、可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)的表达及意义。方法选取我院诊治的82例胃癌患者(胃癌组)及同时期健康体检者50例(对照组),采用qRT-PCR法检测血清中miR-663的相对表达量,采用酶联免疫吸附法(... 目的探讨胃癌患者血清微小RNA-663(miR-663)、可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)的表达及意义。方法选取我院诊治的82例胃癌患者(胃癌组)及同时期健康体检者50例(对照组),采用qRT-PCR法检测血清中miR-663的相对表达量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中的sHLA-G,并分析两者在胃癌诊断中的价值。结果胃癌组血清miR-663相对表达量低于对照组,而sHLA-G水平高于对照组(P均<0.05)。相关分析结果显示,miR-663表达与胃癌发生呈负相关(r=0.922,P<0.01),sHLA-G水平与胃癌发生呈正相关(r=0.997,P<0.01)。胃癌组血清miR-663及sHLA-G表达与肿瘤TNM分期、细胞分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄及肿瘤直径无关(P均>0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,血清miR-663、sHLA-G诊断胃癌曲线下面积(AUC)分别为0.793、0.855。两者联合应用诊断胃癌的敏感度和特异度分别为0.878、0.860。结论胃癌患者血清miR-663表达降低、sHLA-G水平升高,且与肿瘤TNM分期、细胞分化程度、淋巴结转移有关,可作为胃癌诊断的分子标志物。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA-663 可溶性人类白细胞抗原-g 诊断价值
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实时定量PCR检测自然流产患者HLA-G mRNA的表达
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作者 陈小梅 汪泓 +1 位作者 余彩铃 王萍 《皖南医学院学报》 CAS 2012年第2期171-172,F0003,共3页
目的:检测HLA-G mRNA在自然流产患者绒毛组织中的表达,探讨HLA-G与自然流产的关系。方法:取8例正常妊娠早孕人工流产(对照组)与6例自然流产绒毛组织(实验组),采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测对照组和实验组绒毛组织HLA... 目的:检测HLA-G mRNA在自然流产患者绒毛组织中的表达,探讨HLA-G与自然流产的关系。方法:取8例正常妊娠早孕人工流产(对照组)与6例自然流产绒毛组织(实验组),采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测对照组和实验组绒毛组织HLA-G mRNA表达水平。结果:自然流产组HLA-G mRNA的相对表达量(0.026±0.012)明显低于正常妊娠早孕人工流产组的HLA-G mRNA的相对表达量(1.883±1.774),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HLA-G mRNA在绒毛组织的表达异常可能与自然流产的发病有关。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原-g 自然流产 实时荧光定量聚合酶链反应
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