体外用次氯酸氧化牛血清白蛋白(BSA)制备晚期氧化蛋白产物(AOPP)-BSA。将人脐静脉内皮细胞(HUVEC s)与不同浓度的AOPP-BSA共同培养,用W estern b lotting及免疫荧光化学染色法检测血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表达,用RT-PCR法检测VCA...体外用次氯酸氧化牛血清白蛋白(BSA)制备晚期氧化蛋白产物(AOPP)-BSA。将人脐静脉内皮细胞(HUVEC s)与不同浓度的AOPP-BSA共同培养,用W estern b lotting及免疫荧光化学染色法检测血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表达,用RT-PCR法检测VCAM-1 mRNA表达。结果AOPP-BSA诱导VCAM-1 mRNA表达呈时间依赖性,同时以时间和剂量依赖的方式上调HUVEC s VCAM-1蛋白的表达;未经氧化修饰的BSA对HUVEC s VCAM-1表达无明显作用。认为AOPP可诱导内皮细胞VCAM-1表达,此可能是动脉粥样硬化发生和发展的机制之一。展开更多
目的研究血管紧张素(Ang)家族新成员Ang-(1-9)对动脉粥样硬化中关键黏附分子血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的作用及调控机制。方法在体外培养人脐静脉内皮细胞,给予相应刺激进行分组:对照组;AngⅡ为实验1组;Ang-(1-9)为实验2组;AngⅡ+A...目的研究血管紧张素(Ang)家族新成员Ang-(1-9)对动脉粥样硬化中关键黏附分子血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的作用及调控机制。方法在体外培养人脐静脉内皮细胞,给予相应刺激进行分组:对照组;AngⅡ为实验1组;Ang-(1-9)为实验2组;AngⅡ+Ang-(1-9)为实验3组;AngⅡ+氯沙坦为实验4组;AngⅡ+Ang-(1-9)+PD123319为实验5组。采用RT-PCR及流式细胞仪检测VCAM-1 mRNA及蛋白表达,荧光素酶报告基因检测法测定VCAM-1启动子活性,酶联免疫吸附法测定NF-κB细胞核内水平,细胞免疫荧光观察NF-κB细胞核内转移情况。结果与对照组比较,实验1组VCAM-1 mRNA和蛋白表达明显增加(2.61±0.05 vs 1.00±0.00,146.35±1.81 vs 11.17±0.52,P<0.05);与实验1组比较,实验3组和实验4组VCAM-1 mRNA和蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,实验1组VCAM-1启动子活性和NF-κB在细胞核内表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与实验1组比较,实验3组VCAM-1启动子活性和NF-κB在细胞核内表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与实验3组比较,实验5组VCAM-1启动子活性和NF-κB在细胞核内表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ang-(1-9)对VCAM-1的抑制作用有助于为动脉粥样硬化疾病的防治提供新思路。展开更多
文摘体外用次氯酸氧化牛血清白蛋白(BSA)制备晚期氧化蛋白产物(AOPP)-BSA。将人脐静脉内皮细胞(HUVEC s)与不同浓度的AOPP-BSA共同培养,用W estern b lotting及免疫荧光化学染色法检测血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表达,用RT-PCR法检测VCAM-1 mRNA表达。结果AOPP-BSA诱导VCAM-1 mRNA表达呈时间依赖性,同时以时间和剂量依赖的方式上调HUVEC s VCAM-1蛋白的表达;未经氧化修饰的BSA对HUVEC s VCAM-1表达无明显作用。认为AOPP可诱导内皮细胞VCAM-1表达,此可能是动脉粥样硬化发生和发展的机制之一。
文摘目的研究血管紧张素(Ang)家族新成员Ang-(1-9)对动脉粥样硬化中关键黏附分子血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的作用及调控机制。方法在体外培养人脐静脉内皮细胞,给予相应刺激进行分组:对照组;AngⅡ为实验1组;Ang-(1-9)为实验2组;AngⅡ+Ang-(1-9)为实验3组;AngⅡ+氯沙坦为实验4组;AngⅡ+Ang-(1-9)+PD123319为实验5组。采用RT-PCR及流式细胞仪检测VCAM-1 mRNA及蛋白表达,荧光素酶报告基因检测法测定VCAM-1启动子活性,酶联免疫吸附法测定NF-κB细胞核内水平,细胞免疫荧光观察NF-κB细胞核内转移情况。结果与对照组比较,实验1组VCAM-1 mRNA和蛋白表达明显增加(2.61±0.05 vs 1.00±0.00,146.35±1.81 vs 11.17±0.52,P<0.05);与实验1组比较,实验3组和实验4组VCAM-1 mRNA和蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,实验1组VCAM-1启动子活性和NF-κB在细胞核内表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与实验1组比较,实验3组VCAM-1启动子活性和NF-κB在细胞核内表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与实验3组比较,实验5组VCAM-1启动子活性和NF-κB在细胞核内表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ang-(1-9)对VCAM-1的抑制作用有助于为动脉粥样硬化疾病的防治提供新思路。
