目的通过体外实验探讨白细胞介素(IL)-6在对乙酰氨基酚(APAP)所致急性肝损伤(ALI)后肝再生过程中的作用。方法体外实验,培养AML12小鼠正常肝细胞,CCK-8法检测不同浓度APAP药物和IL-6中和抗体(IL-6 Ab)作用于AML12细胞后细胞的活力,筛选...目的通过体外实验探讨白细胞介素(IL)-6在对乙酰氨基酚(APAP)所致急性肝损伤(ALI)后肝再生过程中的作用。方法体外实验,培养AML12小鼠正常肝细胞,CCK-8法检测不同浓度APAP药物和IL-6中和抗体(IL-6 Ab)作用于AML12细胞后细胞的活力,筛选出最适药物作用浓度;ELISA测量IL-6浓度;Western blot法检测PCNA、CyclinD1、HGF等肝脏再生相关蛋白水平;qRT-PCR法检测IL-6、PCNA、CyclinD1 mRNA水平。GraphPad Prism 8.0软件处理数据。结果通过CCK-8数据,筛选5 mmol/L最适药物浓度造模以及0.01μg/ml IL-6 Ab作用细胞。ELISA试剂盒测量IL-6浓度,0、4、12、24、48 h IL-6浓度分别为0、1.794、2.264、1.658、1.086 pg/ml。Western blot结果,与APAP处理AML12细胞其他时间点相比,4 h APAP组CyclinD1蛋白水平最高,12 h APAP组PCNA、HGF蛋白水平最高(P<0.05)。与4 h APAP组相比,4 h APAP+IL-6 Ab组Cyclin-D1、p-STAT3蛋白表达降低(P<0.05);与12 h APAP组相比,12 h APAP+IL-6 Ab组PCNA、HGF表达减低(P<0.05)。qRT-PCR结果,与APAP处理AML12细胞其他时间点相比,4 h APAP组IL-6、PCNA、CyclinD1 mRNA水平达高峰(P<0.05);与4 h APAP组相比,4 h APAP+IL-6 Ab组PCNA、CyclinD1 mRNA水平降低(P<0.05)。结论IL-6Ab通过中和IL-6抑制STAT3磷酸化进而抑制肝细胞再生,推测IL-6在APAP诱导的肝损伤后肝再生过程中可能起到促进作用。展开更多
文摘目的通过体外实验探讨白细胞介素(IL)-6在对乙酰氨基酚(APAP)所致急性肝损伤(ALI)后肝再生过程中的作用。方法体外实验,培养AML12小鼠正常肝细胞,CCK-8法检测不同浓度APAP药物和IL-6中和抗体(IL-6 Ab)作用于AML12细胞后细胞的活力,筛选出最适药物作用浓度;ELISA测量IL-6浓度;Western blot法检测PCNA、CyclinD1、HGF等肝脏再生相关蛋白水平;qRT-PCR法检测IL-6、PCNA、CyclinD1 mRNA水平。GraphPad Prism 8.0软件处理数据。结果通过CCK-8数据,筛选5 mmol/L最适药物浓度造模以及0.01μg/ml IL-6 Ab作用细胞。ELISA试剂盒测量IL-6浓度,0、4、12、24、48 h IL-6浓度分别为0、1.794、2.264、1.658、1.086 pg/ml。Western blot结果,与APAP处理AML12细胞其他时间点相比,4 h APAP组CyclinD1蛋白水平最高,12 h APAP组PCNA、HGF蛋白水平最高(P<0.05)。与4 h APAP组相比,4 h APAP+IL-6 Ab组Cyclin-D1、p-STAT3蛋白表达降低(P<0.05);与12 h APAP组相比,12 h APAP+IL-6 Ab组PCNA、HGF表达减低(P<0.05)。qRT-PCR结果,与APAP处理AML12细胞其他时间点相比,4 h APAP组IL-6、PCNA、CyclinD1 mRNA水平达高峰(P<0.05);与4 h APAP组相比,4 h APAP+IL-6 Ab组PCNA、CyclinD1 mRNA水平降低(P<0.05)。结论IL-6Ab通过中和IL-6抑制STAT3磷酸化进而抑制肝细胞再生,推测IL-6在APAP诱导的肝损伤后肝再生过程中可能起到促进作用。
