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白细胞介素10受体A基因突变导致的极早发型炎症性肠病临床特点及基因分析
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作者 李玉佳 官德秀 +2 位作者 郭姝 郭景 徐樨巍 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第1期140-148,共9页
目的总结白细胞介素10受体A(interleukin 10 receptor A,IL-10RA)基因突变导致的极早发型炎症性肠病(very early onset inflammatory bowel disease,VEO-IBD)患儿临床特点和遗传学特征。方法回顾性分析2007年3月到2019年5月在首都医科... 目的总结白细胞介素10受体A(interleukin 10 receptor A,IL-10RA)基因突变导致的极早发型炎症性肠病(very early onset inflammatory bowel disease,VEO-IBD)患儿临床特点和遗传学特征。方法回顾性分析2007年3月到2019年5月在首都医科大学附属北京儿童医院院消化科住院的慢性腹泻的患儿中,确诊为VEO-IBD的患儿,其中病因为IL-10RA基因突变的患儿15例,对照组为15例非IL-10RA突变所致VEO-IBD患儿,统计分析其临床特点及基因报告。结果IL-10RA基因突变所致的VEO-IBD患儿,克罗恩病(Crohn s disease,CD)11例,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)4例,临床症状以慢性腹泻(15/15例,100.0%)、便血(15/15例,100.0%)为主,肠外表现依次为口腔黏膜溃疡(6/15例,40.0%)、皮肤红斑(5/15例,33.3%);肛周表现依次为直肠会阴瘘5例(5/15,33.3%),肛瘘4例(4/15,26.7%),肛裂3例(3/15,20.0%),直肠会阴瘘、皮赘并存1例(1/15,6.7%);全身表现为IL-10RA基因突变组营养不良13例(13/15例,86.7%),肛周病变13例(13/15例,86.7%);对照组营养不良6例(6/15例,40.0%),肛周病变5例(5/15例,33.3%),此两项指标与IL-10RA基因突变组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。15例IL-10RA突变患儿中,共检测到9个突变位点,其中c.301c>T(p.R101W)和c.537G>A(p.T179T)为最常见的突变位点。IL-10RA突变导致炎症因子增高,引起肠道炎症反应。凝血酶原时间和部分凝血活酶时间均明显延长。结论IL-10RA基因突变导致的VEO-IBD患儿发病年龄早,除消化道症状外,肠外表现和肛周病变较为常见,结肠镜下病变特点以结肠多发溃疡最常见,其次为炎性息肉。c.301c>T(p.R101W)和c.537G>A(p.T179T)为最常见的基因突变位点。IL-10RA突变导致炎症因子增高,引起肠道炎症反应。 展开更多
关键词 极早发型炎症性肠病 白细胞介素10受体a基因 儿童 慢性腹泻 炎症因子
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白细胞介素4受体基因rs3024608、rs1110470、rs3024685多态性与哮喘的相关性研究 被引量:1
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作者 周兆山 吉中强 +3 位作者 王燕青 薛卫林 张小燕 梁文华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期535-536,共2页
哮喘是常见的呼吸道疾病,也是一种多发病,全球约有3亿哮喘患者,其中我国约有2 000万人催患此病[1].随着工业化的进展及生活方式的改变,哮喘发病率和死亡率在大多数国家呈上升趋势,己成为严重的公共卫生问题.然而,哮喘发病机制至今尚不... 哮喘是常见的呼吸道疾病,也是一种多发病,全球约有3亿哮喘患者,其中我国约有2 000万人催患此病[1].随着工业化的进展及生活方式的改变,哮喘发病率和死亡率在大多数国家呈上升趋势,己成为严重的公共卫生问题.然而,哮喘发病机制至今尚不十分清楚.结合文献我们选择白介素4受体(Interleukin-4 receptor,IL-4R)基因的rs3024608、rs1110470、rs3024685共3个多态位点,探讨青岛地区成人中该基因多态性与哮喘的相关性,以期进一步揭示哮喘的遗传学发病机制,有利于哮喘的预防、早期诊断和治疗. 展开更多
关键词 哮喘患者 基因多态性 受体基因 白细胞介素4 相关性 RECEPTOR 公共卫生问题 介素4受体
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兔白细胞介素-10基因的克隆、原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量:5
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作者 万小颖 秦立志 +4 位作者 施丽娟 王文洲 李挺 李碧春 吴信生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期788-795,共8页
白细胞介素-10(IL-10)是一种多功能的细胞因子,参与免疫调节和抗炎反应。本研究旨在克隆并表达IL-10基因,以制备兔IL-10多克隆抗体。运用RT-PCR技术从新西兰白兔脾脏总RNA中扩增IL-10基因,将该基因亚克隆入原核表达载体pET-32a并转入大... 白细胞介素-10(IL-10)是一种多功能的细胞因子,参与免疫调节和抗炎反应。本研究旨在克隆并表达IL-10基因,以制备兔IL-10多克隆抗体。运用RT-PCR技术从新西兰白兔脾脏总RNA中扩增IL-10基因,将该基因亚克隆入原核表达载体pET-32a并转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达获得融合蛋白,融合蛋白经纯化后免疫豚鼠制备多克隆抗体,最后分别用间接ELISA和Western blot检测抗体的效价和特异性。结果表明:克隆得到了兔IL-10基因,大小为537bp,经核苷酸测序与GenBank已登录的基因序列(NM_001082045)相似性为99%;重组载体pET-IL-10构建成功;SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白成功表达;制备的多克隆抗体效价高达1∶56 000,且具有很高的特异性。成功实现了兔IL-10基因的原核表达,并制备了豚鼠抗兔IL-10多克隆抗体,为深入研究兔IL-10基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素-10基因 克隆 表达 抗体制备
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白细胞介素-10启动区基因多态性与慢性丙型肝炎的相关性 被引量:8
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作者 曾俊涛 刘正稳 +1 位作者 韩群英 张妮 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期37-39,共3页
目的 探讨白细胞介素 -10(IL- 10)启动区- 592 位点的基因多态性与慢性丙型肝炎的发生、发展以及转归的关系。方法 采用聚合酶链反应- 限制性片段长度多态性分析(PCR- RFLP)方法检测 85 例慢性丙型肝炎患者和 75 名健康对照者 IL- 10... 目的 探讨白细胞介素 -10(IL- 10)启动区- 592 位点的基因多态性与慢性丙型肝炎的发生、发展以及转归的关系。方法 采用聚合酶链反应- 限制性片段长度多态性分析(PCR- RFLP)方法检测 85 例慢性丙型肝炎患者和 75 名健康对照者 IL- 10基因启动区域 592位点的基因型。结果 IL -10 基因启动区 592 位点基因型在慢性丙型肝炎患者与健康对照之间的分布无显著性差异(P> 0. 05); IL- 10 基因启动区 592 位点基因型在血清 HCV RNA> 105拷贝/mL组和HCV RNA≤105拷贝/mL组之间的分布无显著性差异(P>0.05);IL- 10 基因启动区 592 位点基因型在慢性丙型肝炎组和肝硬化组之间的分布无显著性差异(P>0.05); IL- 10 基因启动区 592 位点基因型在 ALT≥80U/L组中A/A基因型出现的比率高于ALT<80U/L组,两组之间分布存在显著性差异(P<0.01)。结论 IL- 10基因启动区域 592位点的基因多态性与慢性丙型肝炎和肝硬化患者的病毒血症水平无显著相关性;IL- 10 启动区域 592位点的基因多态性可能与慢性丙型肝炎患者的肝脏炎症反应有关。 展开更多
关键词 白细胞介素-10 基因多态性 慢性丙型肝炎
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白细胞介素10基因转移抑制肾小球系膜细胞诱生炎症细胞因子 被引量:7
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作者 李锦华 余学清 +1 位作者 陈永雄 张仕光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期321-324,共4页
目的:通过建立白细胞介素10(IL-10)的重组逆转录病毒载体基因转移系统,观察IL-10对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerularmesengialcel,GMC)中细胞因子的产生及其基因表达... 目的:通过建立白细胞介素10(IL-10)的重组逆转录病毒载体基因转移系统,观察IL-10对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerularmesengialcel,GMC)中细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法:通过构建的重组逆转录病毒载体pLX(IL-10)SN将外源基因IL-10转移至大鼠GMC:(1)应用聚合酶链反应(PCR),反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和ELISA检测IL-10基因的整合和表达;(2)以RT-PCR观察IL-10基因转移对LPS诱导的GMC肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达的影响,以ELISA测定白细胞介素-1β(IL-1β)和TNF-α的蛋白质表达。结果:外源性IL-10基因已整合到靶细胞染色体DNA并有效地表达,它能抑制LPS诱生GMC过度产生IL-1β,TNF-α。结论:外源性IL-10基因可以转移到GMC并稳定表达,它能抑制GMC炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。 展开更多
关键词 白细胞介素10 肾小球系膜 炎症 基因转染
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白细胞介素1受体拮抗剂基因型与糖尿患者群中牙周炎的关系 被引量:5
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作者 黄青 高津福 +2 位作者 王雅南 张乐 徐菁玲 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期571-574,共4页
目的:探讨白细胞介素1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)基因型与2型糖尿患者群中牙周炎(periodontitis of diabetes mellitus,DMP)易感性的关系。方法:收集2型糖尿病患者186例,分为糖尿病伴牙周炎组108名和糖尿病... 目的:探讨白细胞介素1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)基因型与2型糖尿患者群中牙周炎(periodontitis of diabetes mellitus,DMP)易感性的关系。方法:收集2型糖尿病患者186例,分为糖尿病伴牙周炎组108名和糖尿病不伴牙周炎组78名,取血提取DNA,采用序列特异引物多聚酶链反应(sequence specific primers polymerase chain reaction,SSP-PCR)法测定IL-1RN内含子2/VNTR位点的基因型,比较各基因型检出率的差别。结果:IL-1RN内含子2/VNTR等位基因A2在2型糖尿病伴牙周炎组的检出率显著高于2型糖尿病不伴牙周炎组,分布差异有显著性(χ2=3.579,P=0.040)。结论:在2型糖尿病患者中,IL-1RN内含子2/VNTR等位基因A2可能与牙周炎的遗传易感性相关。 展开更多
关键词 牙周炎 2型糖尿病 受体 白细胞介素1 基因 疾病易感性
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rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎发病过程中对白细胞介素-10和Toll样受体4表达的调控作用 被引量:8
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作者 孙园园 郭大东 +4 位作者 陈美清 李少玉 刘滨 唐凯 毕宏生 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第4期330-334,共5页
目的探讨rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎中对白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的调控作用。方法构建IL-10、TLR4基因的3’端非编码区域(3’UTR)荧光素酶质粒载体以及结合位点突变质粒载体,将... 目的探讨rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎中对白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的调控作用。方法构建IL-10、TLR4基因的3’端非编码区域(3’UTR)荧光素酶质粒载体以及结合位点突变质粒载体,将rnomiR-30b-5p模拟物(mimic)与构建好的报告基因载体共转染293T细胞,通过报告基因相对荧光值的表达改变检测rno-miR-30b-5p对IL-10、TLR4表达的调控作用;制备实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)模型,通过注射视网膜光感受器间维生素A类结合蛋白乳糜液,在造模后12 d分离EAU大鼠的脾脏和淋巴结,实时荧光定量PCR检测rno-miR-30b-5p和IL-10、TLR4基因的表达情况;ELISA检测IL-10和TLR4蛋白的表达情况。结果双荧光素酶报告基因表达结果表明,经rno-miR-30b-5p mimic干预后IL-10、TLR4野生型的报告荧光有明显的下调作用,对其预测靶位点进行突变后,突变型载体中的报告荧光也存在明显的下调作用,与阴性对照相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果发现rno-miR-30b-5p在EAU大鼠脾脏和淋巴结中的表达均较对照组明显降低(均为P<0.01),而IL-10 mRNA、TLR4 mRNA表达明显升高(均为P<0.01);ELISA检测发现IL-10、TLR4蛋白表达升高,与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论rno-miR-30b-5p对带有IL-10、TLR4基因片段3’UTR基因表达的调控作用可能不是通过预测到的位点起作用而是通过其他的调控结合位点发挥作用;rno-miR-30b-5p在EAU大鼠脾脏和淋巴结的下调表达导致IL-10和TLR4的表达水平升高,进而调控葡萄膜炎的发展。本研究为进一步探索microRNA在葡萄膜炎发生发展进程中的调控作用、治疗葡萄膜炎奠定了基础。 展开更多
关键词 rno—miR-30b-5p 荧光素酶质粒载体 白细胞介素-10 TOLL样受体4 葡萄膜炎
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白细胞介素10及受体在系统性红斑狼疮患者中表达的研究 被引量:3
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作者 崔华东 刘冬梅 +2 位作者 张宁 祁赞梅 姜奕 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期725-728,共4页
目的明确白细胞介素10(IL-10)及IL-10受体(IL-10R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病过程中的作用。方法应用流式细胞微球捕获技术检测血浆IL-10表达水平,应用流式细胞方法检测外周血白细胞表面IL-10R表达水平。共检测40例SLE患者和20例正常对... 目的明确白细胞介素10(IL-10)及IL-10受体(IL-10R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病过程中的作用。方法应用流式细胞微球捕获技术检测血浆IL-10表达水平,应用流式细胞方法检测外周血白细胞表面IL-10R表达水平。共检测40例SLE患者和20例正常对照者。以SLE疾病活动性指数(SLEDAI)判定SLE疾病活动性。结果狼疮肾炎(LN)患者血浆IL-10表达水平较正常对照者高。各细胞亚群表面的IL-10R表达水平在SLE和正常对照组中相似,但是,LN患者的CD4+和CD8+T细胞表面IL-10R表达降低。血浆IL-10水平与SLEDAI没有相关性,而CD4+T细胞和CD8+T细胞的IL-10R1表达水平与SLEDAI呈明显负相关。结论 IL-10及其受体在狼疮肾炎发病过程中可能具有重要的作用。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 狼疮肾炎 白细胞介素10 白细胞介素10受体
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安非他明对小鼠白细胞介素-10释放的影响及多巴胺D3受体的调控作用 被引量:2
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作者 陈艳炯 朱俊艳 +5 位作者 张洪波 魏曙光 阎春霞 郑海波 任会勋 陈腾 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期279-282,300,共5页
目的研究安非他明(AM)对细菌脂多糖(LPS)刺激后小鼠白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)释放的影响以及多巴胺D3受体在此过程中参与的调控作用。方法实验Ⅰ:采用多巴胺D3受体基因敲除小鼠(D3RKO)以及具有相似遗传背景的野生型小鼠(C57B... 目的研究安非他明(AM)对细菌脂多糖(LPS)刺激后小鼠白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)释放的影响以及多巴胺D3受体在此过程中参与的调控作用。方法实验Ⅰ:采用多巴胺D3受体基因敲除小鼠(D3RKO)以及具有相似遗传背景的野生型小鼠(C57BL/6J),腹腔注射AM(5 mg/kg)10 min后再注射LPS(150μg/kg)刺激,在LPS给药后不同时间点(0、30、60、90、120、240 min)心脏穿刺抽血进行IL-10测试,观察上述不同时间点D3RKO和C57BL/6J小鼠IL-10的分泌情况。实验Ⅱ:在实验Ⅰ所确定的小鼠IL-10分泌最高时间点,观察不同剂量AM(0、2、5、10 mg/kg)对D3RKO和C57BL/6J小鼠IL-10分泌的影响。结果实验Ⅰ:AM5 mg/kg在LPS注射后可以引起D3RKO和C57BL/6J小鼠IL-10分泌增多,其中60 min达最大值,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验Ⅱ:C57BL/6J小鼠以AM5 mg/kg作用后IL-10增多最为显著,D3RKO小鼠以AM2 mg/kg作用后IL-10升高最为显著,与生理盐水对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),且二者之间亦存在统计学差异。结论AM对小鼠免疫功能的抑制可能是通过增加IL-10分泌而起作用;小剂量AM即可引起D3RKO小鼠血中IL-10升高,提示多巴胺D3受体可能参与了AM对小鼠免疫功能抑制作用的调控。 展开更多
关键词 安非他明 白细胞介素-10 多巴胺D3受体 细菌脂多糖 基因敲除小鼠
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冠心病与白细胞介素-1受体拮抗剂基因多态性的相关性研究 被引量:5
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作者 李艳 徐朴 +1 位作者 张平安 黄从新 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2003年第4期237-239,共3页
目的 探讨白细胞介素 1受体拮抗剂基因 (interleukin 1receptorantagonistgene ,IL 1RN)第 2号外显子 +80 0 6T C位点基因多态性在冠心病及正常人群中的分布 ,初步分析其基因型与冠心病的相关关系。方法 采用聚合酶链反应 限制性片... 目的 探讨白细胞介素 1受体拮抗剂基因 (interleukin 1receptorantagonistgene ,IL 1RN)第 2号外显子 +80 0 6T C位点基因多态性在冠心病及正常人群中的分布 ,初步分析其基因型与冠心病的相关关系。方法 采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性的方法 ,检测了 2 40例老年冠心病患者 (冠心病组 )和 2 2 9例老年健康对照者 (对照组 )的IL 1RN(+80 0 6T C)位点基因多态性。结果 对照组和冠心病组的 3种基因型频率分别为TT型 :0 .82 1和 0 .90 0 ;TC型 :0 .170和 0 .0 96 ;CC型 :0 .0 0 9和 0 .0 0 4。与对照组比较 ,不携带等位基因C(IL 1RN C)的基因型 ,其患冠心病的相对风险度约是携带IL 1RN C基因型的 1.96倍 ;与心绞痛组比较 ,患心肌梗死的相对风险度约是 4.0 9倍。结论 IL 1RN第 2号外显子 +80 0 6T C位点基因多态性与冠心病的发生、发展及该疾病的严重程度密切相关 ,IL 1RN C在其中可能具有保护作用。 展开更多
关键词 冠状动脉疾病 受体 白细胞介素1 基因 多态现象(遗传学)
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人白细胞介素1受体拮抗剂基因转染人胚颞颌关节软骨细胞的实验研究 被引量:2
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作者 李逸松 田卫东 +2 位作者 王栋 李声伟 陈希哲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期19-21,共3页
目的 研究人白细胞介素 1受体拮抗剂 (hIL_1ra)基因转染人胚颞颌关节软骨细胞的方法和表达。方法 分离培养人胚颞颌关节软骨细胞 ,将hIL_1ra基因以阳离子脂质体Lipefectine介导进行基因转染 ,免疫细胞化学染色和ELISA法检测转染细胞中... 目的 研究人白细胞介素 1受体拮抗剂 (hIL_1ra)基因转染人胚颞颌关节软骨细胞的方法和表达。方法 分离培养人胚颞颌关节软骨细胞 ,将hIL_1ra基因以阳离子脂质体Lipefectine介导进行基因转染 ,免疫细胞化学染色和ELISA法检测转染细胞中hIL_1ra蛋白的表达。结果 使用阳离子脂质体介导hIL_1ra基因转染人胚颞颌关节软骨细胞 ,免疫细胞化学染色hIL_1ra蛋白呈阳性表达 ,瞬时转染和稳定转染时 ,转染细胞胞浆内和培养基上清液中均有目的基因的表达 ,与未经转染的对照组存在显著性差异 (P <0 0 1)。结论 体外实验证实脂质体介导hIL_1ra基因转染方法切实可行 ,为今后颞颌关节骨关节病的基因治疗提供了依据。 展开更多
关键词 白细胞介素1 受体拮抗剂 基因转染 颞颌关节 软骨细胞 实验研究 基因转染
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人分泌型白细胞介素2受体α链基因的克隆及其在真核细胞中的表达 被引量:3
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作者 程小款 杜恺 +2 位作者 衡凤燕 吴宁华 沈珝琲 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 1995年第5期326-332,共7页
删除人白细胞介素-2受体α链cDNA中编码胞质内13个氨基酸及跨膜区19个氨基酸残基的DNA片段后,接上人工合成的终止寡核苷酸片段,改建后的cDNA与真核表达载体pRc/CMV重组成质粒pCMV/rsIL2R。用电打... 删除人白细胞介素-2受体α链cDNA中编码胞质内13个氨基酸及跨膜区19个氨基酸残基的DNA片段后,接上人工合成的终止寡核苷酸片段,改建后的cDNA与真核表达载体pRc/CMV重组成质粒pCMV/rsIL2R。用电打孔及磷酸钙法将此质粒转染CHO细胞,经G418筛出表达Neo基因的克隆20株,通过mRNA狭缝杂交及ELISA检测,有5株能稳定表达分泌型α链mRNA及蛋白,其中4株细胞培养上清中的IL2Rα链的含量达1400U/ml以上。 展开更多
关键词 白细胞介素2 受体 重组克隆 真核基因表达
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人白细胞介素-1受体拮抗剂基因转染人颞颌关节软骨细胞的基因表达 被引量:2
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作者 李逸松 田卫东 +2 位作者 李声伟 刘流 代晓明 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期300-302,共3页
目的研究人白细胞介素-1受体拮抗剂(hIL-1ra)基因转染人颞颌关节软骨细胞的基因表达情况。方法hIL-1ra基因以阳离子脂质体介导转染体外培养的人颞颌关节软骨细胞,描记细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间,并采用酶联免疫吸附法检测瞬时... 目的研究人白细胞介素-1受体拮抗剂(hIL-1ra)基因转染人颞颌关节软骨细胞的基因表达情况。方法hIL-1ra基因以阳离子脂质体介导转染体外培养的人颞颌关节软骨细胞,描记细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间,并采用酶联免疫吸附法检测瞬时转染和稳定转染细胞中hIL-1ra蛋白的表达。结果转染细胞与正常细胞的增殖率有一定差异,转染细胞胞浆内和培养基上清液中均有hIL-1ra蛋白的表达。在细胞转染结束后48h,细胞内hIL-1ra蛋白的表达量最高,稳定转染细胞中基因表达最长时间达72d以上。结论经阳离子脂质体介导hIL-1ra基因转染人颞颌关节软骨细胞后,目的基因在细胞内有一定数量的表达。 展开更多
关键词 白细胞介素-1受体拮抗剂 基因转染 阳离子脂质体
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重组人白细胞介素10基因的克隆及其在真核细胞中的表达 被引量:3
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作者 卢斌 卢大儒 赵明 《医学研究生学报》 CAS 2007年第8期796-798,805,共4页
目的:克隆编码人白细胞介素10(hIL-10)基因的全长cDNA,构建真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中进行表达。方法:应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,从活化的正常人外周血单个核细胞中扩增出hIL-10 cDNA,将测序正确的hIL-10 cDN... 目的:克隆编码人白细胞介素10(hIL-10)基因的全长cDNA,构建真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中进行表达。方法:应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,从活化的正常人外周血单个核细胞中扩增出hIL-10 cDNA,将测序正确的hIL-10 cDNA克隆至真核表达载体pcDNA3构建重组表达载体。采用磷酸钙法转染CHO细胞,用ELISA法检测hIL-10基因的表达,用单四唑(MTT)检测hIL-10蛋白的活性。结果:RT-PCR产物插入Teasy载体,经序列测定证实hIL-10基因全序列克隆成功。在CHO细胞培养上清中有hIL-10的表达,该产物能抑制淋巴细胞转化。结论:成功构建了真核表达质粒pcDNA3-hIL-10,为进一步研究hIL-10在自身免疫、移植免疫及炎症性疾病中的作用打下了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素10 克隆 基因表达
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不同临床类型紫癜性肾炎患儿白细胞介素10基因表达的研究 被引量:2
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作者 吴元俊 陈荣华 +2 位作者 陈吉庆 张爱华 蔡毅 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期101-103,共3页
目的:探讨白细胞介素10(IL-10)在不同临床类型紫癜性肾炎(HSPN)发病中的作用。方法:应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及双抗体夹心ELISA法检测了40例HSPN患儿活动期和恢复期外周血单个核细胞(P... 目的:探讨白细胞介素10(IL-10)在不同临床类型紫癜性肾炎(HSPN)发病中的作用。方法:应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及双抗体夹心ELISA法检测了40例HSPN患儿活动期和恢复期外周血单个核细胞(PBMC)在植物血凝素(PHA)刺激下IL-10mRNA和蛋白水平的变化。结果:①HSPN活动期PBMC中IL-10mRNA和蛋白水平均显著高于正常对照组[(0.48±0.12)比(0.39±0.10)和(1023.90±158.78)pg/ml比(895.51±141.06)pg/ml,P分别<0.01及0.05],恢复期与正常对照组相比差异无显著性[(0.42±0.13)比(0.39±0.10)和(941.25±165.36)pg/ml比(895.51±141.06)pg/ml,P均>0.05]。②临床上表现为蛋白尿型、肾病综合征型及急性肾炎综合征型者,活动期PBMC中IL-10mRNA和蛋白水平均显著高于正常对照组,而表现为单纯血尿型者与正常对照组相比差异无显著性。结论:HSPN患儿活动期IL-10表达异常且与临床类型有一定的关系。IL-10在其发病中具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 紫癜性肾炎 白细胞介素10 外周血单个核细胞 逆转录-多聚酶链反应 基因表达
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白细胞介素-1受体拮抗剂对体外培养的大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性损伤的影响及其基因转染治疗 被引量:2
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作者 梁卫兰 母得志 +1 位作者 张国荣 吴希如 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第3期243-246,共4页
目的:观察IL1的受体拮抗剂(IL1ra)对缺氧性神经细胞的影响,探讨IL1在神经细胞缺氧损伤中的作用以及基因转染治疗的可能性。方法:(1)以缺陷型HSV为载体构建的pHSVIL1ra转染体外培养的神经细胞... 目的:观察IL1的受体拮抗剂(IL1ra)对缺氧性神经细胞的影响,探讨IL1在神经细胞缺氧损伤中的作用以及基因转染治疗的可能性。方法:(1)以缺陷型HSV为载体构建的pHSVIL1ra转染体外培养的神经细胞为实验组,以pHSVLacZ转染的体外培养的神经细胞为对照,进行体外缺氧实验。以神经细胞的3HGABA和3HGlu摄取能力及细胞凋亡情况为判定损伤程度的指标。结果:转染pHSVIL1ra的神经细胞缺氧后,其3HGABA和3HGlu的摄取较转染pHSVLacZ的神经细胞有所增高,神经细胞凋亡的程度少于对照。结论:pHSVIL1ra转染可减轻缺氧引起的神经细胞急性损伤和迟发性损伤。 展开更多
关键词 白细胞介素1 受体拮抗剂 神经细胞缺氧 基因治疗
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老年缺血性脑卒中患者白细胞介素1受体拮抗剂基因多态性研究 被引量:1
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作者 高洪云 韩红星 +1 位作者 朱其义 张晨 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期272-274,共3页
目的探讨白细胞介素1受体拮抗剂基因内舍子2的变数串联重复(VNTR)多态性与老年缺血性脑卒中的关系。方法选择老年缺血性脑卒中患者112例作为脑卒中组,选择同期年龄和性别相匹配的健康志愿者或其他疾病住院的患者105例作为对照组,通... 目的探讨白细胞介素1受体拮抗剂基因内舍子2的变数串联重复(VNTR)多态性与老年缺血性脑卒中的关系。方法选择老年缺血性脑卒中患者112例作为脑卒中组,选择同期年龄和性别相匹配的健康志愿者或其他疾病住院的患者105例作为对照组,通过PCR和琼脂糖凝胶电泳来确定其基因型。结果脑卒中组患者A2等位基因频率低于对照组(4.9% vs 10.5%,X^2=4.78.P=0.029),A1A2+A2A2基因型的频率也较对照组低(9.8% vs 20.0%.)[X^2=4.47,P=0.035)。结论白细胞介素1受体拮抗剂内含子2基因VNTR多态性与老年缺血性脑卒中有关,其A2等位基因对脑卒中可能有保护作用。 展开更多
关键词 受体 白细胞介素1 脑血管意外 基因频率 聚合酶链反应 串联重复序列
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白细胞介素-10对人外周血白细胞β-防御素2基因诱导性表达的影响 被引量:1
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作者 陈齐兴 周景琳 +2 位作者 Malte Book Frank Stuber 方向明 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第6期596-599,604,共5页
目的:探讨炎症抑制因子白细胞介素-10(白介素-10)在β-防御素2(hBD-2)基因诱导性表达中的作用。方法:22例健康人被纳入本研究中,以终浓度0 ng/m l的LPS、100 ng/m l的LPS、10ng/m l的IL-10、100 ng/m l的LPS+10 ng/m l的IL-10加入900μ... 目的:探讨炎症抑制因子白细胞介素-10(白介素-10)在β-防御素2(hBD-2)基因诱导性表达中的作用。方法:22例健康人被纳入本研究中,以终浓度0 ng/m l的LPS、100 ng/m l的LPS、10ng/m l的IL-10、100 ng/m l的LPS+10 ng/m l的IL-10加入900μl人外周血中,于37℃刺激培养6 h后,提取外周血白细胞总RNA,用实时定量RT-PCR的方法测定外周血白细胞hBD-2mRNA的表达水平。结果:0 ng/m l的LPS或10 ng/m l的IL-10刺激6 h的白细胞中未检测到hBD-2 mRNA,100 ng/m l的LPS刺激6 h后hBD-2mRNA的表达水平为166.9±35.14,而IL-10与LPS共同刺激6 h后hBD-2 mRNA的表达水平为30.40±9.18。IL-10使hBD-2mRNA的诱导性表达水平明显降低(P<0.05)。结论:人外周血白细胞中hBD-2基因呈现诱导性表达,IL-10能下调hBD-2的诱导性表达。 展开更多
关键词 白细胞介素10 防御素类/遗传学 Β-防御素2 基因表达
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白细胞介素1受体拮抗剂基因多态性与IgA肾病预… 被引量:1
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作者 胡伟新 刘志红 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1997年第Z11期13-16,共4页
目的:探讨白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-lra)基因多态民生与IgA肾病(IgAN)远期预后的联系。方法:71例原发性IgAN,随方过程中肾功能变化分为两组:A组病例随方10年以上肾功能保持正常:B组病例则在阴访过... 目的:探讨白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-lra)基因多态民生与IgA肾病(IgAN)远期预后的联系。方法:71例原发性IgAN,随方过程中肾功能变化分为两组:A组病例随方10年以上肾功能保持正常:B组病例则在阴访过程中出现肾功能不全。IL_1ra基因类型用PCR方法测定。结果:B组平均携带IL-1ra基因IL1RN2等位基因的频率(17.6%)高于A组(10%),但统计学差异不显著。 展开更多
关键词 基因多态性 白细胞介素 受体 拮抗剂 肾炎
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鲤鱼白细胞介素10基因组DNA克隆及序列分析
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作者 冯祥汝 陈义龙 +5 位作者 孙真 贾生美 王文东 张俊辉 杨振国 卢强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期65-68,共4页
为获得鲤鱼白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)全长基因组序列,本研究利用鲤鱼IL-10全长cDNA序列(Gen-Bank登录号:JX524550),通过在两端非编码区设计引物,以提取的鲤鱼脾脏基因组为模板,使用PCR方法成功获得鲤鱼IL-10全长基因组序列。... 为获得鲤鱼白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)全长基因组序列,本研究利用鲤鱼IL-10全长cDNA序列(Gen-Bank登录号:JX524550),通过在两端非编码区设计引物,以提取的鲤鱼脾脏基因组为模板,使用PCR方法成功获得鲤鱼IL-10全长基因组序列。鲤鱼IL-10基因组全长2176bp,GenBank登录号为JX524551。将所获得的序列与其他物种IL-10基因组序列相比,结果发现都含有5个外显子,4个内含子,外显子在进化上相对保守,剪切位点都符合"gt......ag"规则;序列包含540bp的开放阅读框,编码179个氨基酸,有2段典型的IL-10氨基酸信号基序。 展开更多
关键词 鲤鱼 白细胞介素10 基因 克隆 序列分析
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