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白细胞介素-12促进氧化应激参与干燥综合征肝脏病变
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作者 查洁 江婷婷 +2 位作者 郭俊巧 肖帧 姚根宏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期461-465,共5页
目的:探讨白细胞介素-12(IL-12)对干燥综合征小鼠肝脏病变及氧化应激通路的影响,阐明干燥综合征肝脏病变的可能机制。方法:分别检测NOD、IL-12基因敲除(IL-12KO)NOD和C57BL/6(B6)小鼠的唾液流率、肝功能、肝脏病理、IL-12水平等。取不... 目的:探讨白细胞介素-12(IL-12)对干燥综合征小鼠肝脏病变及氧化应激通路的影响,阐明干燥综合征肝脏病变的可能机制。方法:分别检测NOD、IL-12基因敲除(IL-12KO)NOD和C57BL/6(B6)小鼠的唾液流率、肝功能、肝脏病理、IL-12水平等。取不同浓度IL-12及JAK2、TYK2抑制剂作用于小鼠肝癌细胞。测定各组小鼠血清及细胞培养上清的氧化应激指标。结果:与其他两组小鼠相比,NOD小鼠GOT和GPT显著升高(P<0.05),血清GSH-PX、SOD和CAT降低(P<0.05)。不同浓度IL-12处理后,小鼠肝癌细胞CAT、GSH、GSH-PX和SOD有下降趋势,MDA增加。JAK2/TYK2抑制剂能逆转IL-12对肝癌细胞SOD、GSH和MDA的调节(P<0.05)。结论:IL-12可能通过促进干燥综合征肝脏细胞的氧化应激,进而参与干燥综合征肝脏病变过程。 展开更多
关键词 干燥综合征 肝脏病变 白细胞介素-12 氧化应激
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卵泡液中白细胞介素2、白细胞介素12、白细胞介素18与体外受精-胚胎移植妊娠结局的相关性 被引量:6
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作者 王秀霞 王天任 +3 位作者 何丽霞 孔琳 徐小延 杨大磊 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期643-645,共3页
目的探讨卵泡液中细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-18与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法接受体外受精-胚胎移植助孕治疗的妇女117例,其中妊娠妇女59例,未妊娠妇女58例,应用酶联免疫吸附试验检测卵泡液中IL-2、IL-12、IL-1... 目的探讨卵泡液中细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-18与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法接受体外受精-胚胎移植助孕治疗的妇女117例,其中妊娠妇女59例,未妊娠妇女58例,应用酶联免疫吸附试验检测卵泡液中IL-2、IL-12、IL-18的浓度。结果妊娠组卵泡液中IL-2的浓度为(36.73±18.53)pg/ml、IL-12的浓度为(0.52±0.88)pg/ml、IL-18的浓度为(76.10±69.06)pg/ml;未妊娠组卵泡液中IL-2的浓度为(40.89±22.83)pg/ml、IL-12的浓度为(1.59±1.58)pg/ml、IL-18的浓度为(131.80±162.35)pg/ml。未妊娠组IL-12和IL-18浓度均明显高于妊娠组(P<0.05),未妊娠组IL-2浓度虽较妊娠组升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-12、IL-18在接受体外受精-胚胎移植助孕治疗的非妊娠妇女中明显升高,考虑与体外受精-胚胎移植妊娠结局负相关。 展开更多
关键词 体外受精-胚胎移植 妊娠 卵泡液 细胞因子 白细胞介素2 白细胞介素12 白细胞介素18
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帕瑞昔布钠超前镇痛对烧伤患者热休克蛋白70和白细胞介素-6水平的影响 被引量:11
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作者 周桥灵 张文璇 +4 位作者 杨承祥 高少青 刘洪珍 梁桦 杨智慧 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期37-39,共3页
目的研究帕瑞昔布钠超前镇痛对烧伤患者的镇痛作用以及对热休克蛋白70(HSP70)、白细胞介素-6(IL-6)水平的影响。方法全身麻醉下行削痂植皮术患者60例,随机均分为三组:P组麻醉诱导前30min静脉给予帕瑞昔布钠40mg,PD组分别于麻醉诱导前30... 目的研究帕瑞昔布钠超前镇痛对烧伤患者的镇痛作用以及对热休克蛋白70(HSP70)、白细胞介素-6(IL-6)水平的影响。方法全身麻醉下行削痂植皮术患者60例,随机均分为三组:P组麻醉诱导前30min静脉给予帕瑞昔布钠40mg,PD组分别于麻醉诱导前30min和手术结束前静脉给予帕瑞昔布钠40mg,N组手术结束前30min静脉给予生理盐水5ml。检测患者麻醉前、术毕、术后6、12、24h血浆HSP70和IL-6水平。观察患者术后2、4、8、12、24h的VAS评分。结果术后4、8、12、24hP组和PD组VAS评分均低于N组(P<0.05)。术后6、12hP组和PD组HSP70显著升高(P<0.05),且明显高于N组(P<0.05)。术后6、12、24hP组和PD组IL-6明显降低(P<0.05),N组明显升高(P<0.05),且明显高于P组和PD组(P<0.05)。结论帕瑞昔布钠超前镇痛能够增加烧伤患者HSP70的浓度,减少炎性因子IL-6的释放,并产生较好的镇痛效果。 展开更多
关键词 帕瑞昔布钠 烧伤 热休克蛋白70 白细胞介素-6
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白细胞介素-1β在病理性疼痛大鼠脊髓LTP中的作用及机制 被引量:7
4
作者 钟祎 黄阳亮 许继德 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期541-545,共5页
目的:探讨白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角C纤维诱发电位长时程增强(long-term potentiation,LTP)中的作用及其机制。方法:用坐骨神经部分损伤(spared nerve iniury,SNI)和腰5前根切断(lumbar 5 ve... 目的:探讨白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角C纤维诱发电位长时程增强(long-term potentiation,LTP)中的作用及其机制。方法:用坐骨神经部分损伤(spared nerve iniury,SNI)和腰5前根切断(lumbar 5 ventral root transection,L5 VRT)方法复制大鼠病理性疼痛模型,观察外源性IL-1β对正常大鼠及病理性疼痛模型大鼠脊髓背角C纤维诱发电位的影响,并且检测p38 MAPK(p38 mitogen-activatedprotein kinase)和NF-κB(nuclear factor-kappa B)信号通路在其中的作用。结果:500μg/L IL-1β对正常大鼠C纤维介导的基本突触传递和高频刺激诱导的LTP都没有影响,而5μg/L的IL-1β可以在神经病理性疼痛模型的大鼠上诱导出LTP。预先用p38 MAPK或NF-κB的抑制剂(SB203580或PDTC)可以完全阻断IL-1β诱导的LTP。结论:外源性IL-1β可诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角C纤维诱发电位的LTP。38 MAPK和NF-κB信号通路可能参与这一过程。 展开更多
关键词 白细胞介素-1 长时程增强 p38 MApK NF-κB
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鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达 被引量:3
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作者 陈玮 邵传森 +6 位作者 沈建根 鲍建芳 潘建平 韩伟 寿林 项哨 郑树 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第1期15-18,共4页
目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载... 目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载体 ,使两个目的基因均受各自的启动子 CMV控制 ,构建成 m IL - 12双亚基共表达质粒 p Cm IL -12 ,并进行体内外表达。结果 :p Cm IL - 12在体外转染 COS- 7细胞后 ,经 EL ISA证实有 m IL- 12表达 ,其表达上清能在体外明显增强小鼠 NK细胞活性。小鼠皮内注射 p Cm IL - 12亦能增强小鼠 NK细胞活性。结论 :所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的 m IL- 展开更多
关键词 白细胞介素-12 生物合成 质粒 基因表达 MIL-12 天然杀伤细胞 遗传载体 分子克隆 双亚基共表达 小鼠
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rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎发病过程中对白细胞介素-10和Toll样受体4表达的调控作用 被引量:8
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作者 孙园园 郭大东 +4 位作者 陈美清 李少玉 刘滨 唐凯 毕宏生 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第4期330-334,共5页
目的探讨rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎中对白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的调控作用。方法构建IL-10、TLR4基因的3’端非编码区域(3’UTR)荧光素酶质粒载体以及结合位点突变质粒载体,将... 目的探讨rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎中对白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的调控作用。方法构建IL-10、TLR4基因的3’端非编码区域(3’UTR)荧光素酶质粒载体以及结合位点突变质粒载体,将rnomiR-30b-5p模拟物(mimic)与构建好的报告基因载体共转染293T细胞,通过报告基因相对荧光值的表达改变检测rno-miR-30b-5p对IL-10、TLR4表达的调控作用;制备实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)模型,通过注射视网膜光感受器间维生素A类结合蛋白乳糜液,在造模后12 d分离EAU大鼠的脾脏和淋巴结,实时荧光定量PCR检测rno-miR-30b-5p和IL-10、TLR4基因的表达情况;ELISA检测IL-10和TLR4蛋白的表达情况。结果双荧光素酶报告基因表达结果表明,经rno-miR-30b-5p mimic干预后IL-10、TLR4野生型的报告荧光有明显的下调作用,对其预测靶位点进行突变后,突变型载体中的报告荧光也存在明显的下调作用,与阴性对照相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果发现rno-miR-30b-5p在EAU大鼠脾脏和淋巴结中的表达均较对照组明显降低(均为P<0.01),而IL-10 mRNA、TLR4 mRNA表达明显升高(均为P<0.01);ELISA检测发现IL-10、TLR4蛋白表达升高,与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论rno-miR-30b-5p对带有IL-10、TLR4基因片段3’UTR基因表达的调控作用可能不是通过预测到的位点起作用而是通过其他的调控结合位点发挥作用;rno-miR-30b-5p在EAU大鼠脾脏和淋巴结的下调表达导致IL-10和TLR4的表达水平升高,进而调控葡萄膜炎的发展。本研究为进一步探索microRNA在葡萄膜炎发生发展进程中的调控作用、治疗葡萄膜炎奠定了基础。 展开更多
关键词 rno—miR-30b-5p 荧光素酶质粒载体 白细胞介素-10 TOLL样受体4 葡萄膜炎
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猪白细胞介素-12的分子克隆与序列测定 被引量:4
7
作者 兰文升 童光志 +3 位作者 仇华吉 周艳君 王云峰 郭海龙 《动物医学进展》 CSCD 2002年第1期38-41,共4页
为研究白细胞介素-12在机体免疫应答中的作用,从猪外周血提取单个核细胞(PBMCs),用含LPS的培养基培养细胞,从培养2 h和12 h的活化细胞中分别提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出编码猪IL-12两个亚基的... 为研究白细胞介素-12在机体免疫应答中的作用,从猪外周血提取单个核细胞(PBMCs),用含LPS的培养基培养细胞,从培养2 h和12 h的活化细胞中分别提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出编码猪IL-12两个亚基的基因,其大小分别为720 bp(P35)和1 044 bp(P40),将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化,用SacI和SalI双酶切后,分别将其连接至pUC18质粒上,进行质粒PCR和SacI、SalI双酶切鉴定后筛选阳性克隆,并进行序列测定和分析。序列分析表明P35基因开放阅读框含有669个核苷酸,序列与人、小鼠和羊同源性分别为79.2%,37.6% ,86.1%,P40基因开放阅读框含有975个核苷酸,与人和小鼠、羊基因序列的同源性分别为79.5%,53.1%,84.3%。结果表明克隆到了猪白细胞介素-12 P35和P40两个亚基的基因,得到的P35基因序列与国外报道完全一致,P40基因序列与发表的序列有4个碱基差异,提示P40基因可能存在多态性。 展开更多
关键词 白细胞介素-12 基因克隆 序列测定 免疫调节作用
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携带鼠白细胞介素-12基因腺病毒载体(AdCMVIL-12)抗B16黑色素瘤的实验研究 被引量:2
8
作者 高航 王建伟 +4 位作者 车广华 张海英 苑晓军 陈立 陈远耀 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期457-458,共2页
关键词 白细胞介素-12 腺病毒载体 AdCMVIL-12 B16细胞 黑色素瘤 实验 免疫治疗
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白细胞介素-12抗NK/T细胞淋巴瘤的活性及其机制研究 被引量:6
9
作者 王媛 惠双 +3 位作者 张成辉 郭宏强 李敏 郑芝欣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期365-371,共7页
目的研究白细胞介素-12(IL-12)的抗NK/T细胞淋巴瘤活性及机制。方法培养NK/T细胞淋巴瘤的YTS细胞株并分为对照组、IL-12组、NC siRNA组、JAK2 siRNA组、空白质粒组、JAK2表达质粒组,用含有0.625、1.25、2.5、5.0、10.0、20.0 ng·mL... 目的研究白细胞介素-12(IL-12)的抗NK/T细胞淋巴瘤活性及机制。方法培养NK/T细胞淋巴瘤的YTS细胞株并分为对照组、IL-12组、NC siRNA组、JAK2 siRNA组、空白质粒组、JAK2表达质粒组,用含有0.625、1.25、2.5、5.0、10.0、20.0 ng·mL^-1 IL-12的培养基处理或转染NC siRNA、JAK2 siRNA、空白质粒、JAK2表达质粒,检测细胞活力、细胞凋亡、细胞周期及细胞中JAK2及STAT3的表达;选择C57小鼠并建立移植瘤模型,随机分为对照组及IL-12组后,测定移植瘤质量及JAK2、STAT3的表达。结果在YTS细胞中,IL-12以及JAK2 siRNA能够抑制细胞活力、细胞周期及细胞中p-JAK2、p-STAT3的表达,诱导细胞凋亡(P<0.05);转染JAK2的表达质粒能够使20.0 ng·mL^-1的IL-12抑制细胞活力、细胞周期、细胞中p-JAK2、p-STAT3表达及诱导细胞凋亡的作用减弱;在移植瘤小鼠中,IL-12干预后,移植瘤质量及移植瘤中p-JAK2、p-STAT3的表达均明显下降(P<0.05)。结论IL-12具有抗NK/T细胞淋巴瘤的活性且其机制与抑制JAK2/STAT3信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 NK/T细胞淋巴瘤 白细胞介素-12 Janus蛋白质酪氨酸激酶2 信号转导和转录活化蛋白3 凋亡 细胞周期
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小鼠白细胞介素12基因的钓取及其在COS-7细胞中的表达 被引量:2
10
作者 杨英 刘晓冬 刘树铮 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期12-13,共2页
目的 :钓取小鼠白细胞介素 12 (m IL- 12 ) p4 0和 p35c DNA并检测其在哺乳动物细胞 (COS- 7)中的表达。方法 :RT- PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞 m RNA中扩增 p4 0和 p35亚基 ;脂质体Lipofect AMINE将质粒 p NG- m IL- 12转染至 COS- 7细胞 ... 目的 :钓取小鼠白细胞介素 12 (m IL- 12 ) p4 0和 p35c DNA并检测其在哺乳动物细胞 (COS- 7)中的表达。方法 :RT- PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞 m RNA中扩增 p4 0和 p35亚基 ;脂质体Lipofect AMINE将质粒 p NG- m IL- 12转染至 COS- 7细胞 ,ELISA法检测不同时间 m IL- 12表达水平。结果 :1RT- PCR法扩增出特异的 p4 0和 p35亚基 ,p35亚基克隆至 p KS载体测序 ;2 EL ISA法检测转染 p NG- m IL- 12的 COS- 7细胞上清有 m IL- 12分泌。结论 :为进一步研究 m IL- 12的免疫调节机制及其抑瘤作用奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠 白细胞介素12 基因表达 COS-7细胞 p40亚基 p35亚基
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肺结核患者血清白细胞介素-12水平检测及临床意义 被引量:8
11
作者 奚莹 王莉 《中国感染控制杂志》 CAS 2012年第2期109-111,133,共4页
目的了解白细胞介素(IL)-12在肺结核病中的临床意义。方法对80例抗结核治疗前肺结核患者血清IL-12,采用酶联免疫法进行检测,并与30例健康志愿者(健康对照组)、20例有效抗结核治疗随访6个月后的患者进行对比,同时依据临床常用结核检测指... 目的了解白细胞介素(IL)-12在肺结核病中的临床意义。方法对80例抗结核治疗前肺结核患者血清IL-12,采用酶联免疫法进行检测,并与30例健康志愿者(健康对照组)、20例有效抗结核治疗随访6个月后的患者进行对比,同时依据临床常用结核检测指标分组研究IL-12的临床意义。结果 80例肺结核患者血清IL-12均值为(41.49±34.22)pg/mL,显著低于健康对照组(58.12±44.92)pg/mL,差异有统计学意义(t=2.51,P<0.05)。20例随访肺结核患者经6个月有效抗结核治疗后,血清IL-12水平由治疗前的(12.93±12.48)pg/mL上升为(66.26±20.97)pg/mL,差异有统计学意义(t=-6.88,P<0.05)。20例随访肺结核患者经6个月有效抗结核治疗后,血清IL-12水平与健康对照组比较,差异无统计学意义(t=-0.60,P>0.05)。肺结核患者血清IL-12水平在不同分组中:单纯肺结核/肺结核合并结核性胸膜炎组、空洞组/非空洞组、肺CT病变累及<3叶组/≥3叶组、痰结核菌阳性组/阴性组、结核试验阳性组/阴性组、血沉升高组/正常组、PPD强阳性组/非强阳性组,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 IL-12与肺结核活动性密切相关,其水平可作为临床工作中了解患者免疫状态,判断肺结核活动性和病情转归的临床参考指标。 展开更多
关键词 肺结核 白细胞介素-12 结核分枝杆菌 细胞免疫 体液免疫
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白细胞介素-12抑制肿瘤血管生成的研究进展 被引量:5
12
作者 严林 潘运龙 《医学研究生学报》 CAS 2005年第3期242-245,共4页
 白细胞介素 12(IL -12)可诱导干扰素 γ(INF -γ)的产生,上调干扰素诱导蛋白 10(IP- 10)、单核因子(MIG)、组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)、肿瘤坏死因子α(TNF -α)等血管生成抑制因子,下调血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生...  白细胞介素 12(IL -12)可诱导干扰素 γ(INF -γ)的产生,上调干扰素诱导蛋白 10(IP- 10)、单核因子(MIG)、组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)、肿瘤坏死因子α(TNF -α)等血管生成抑制因子,下调血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶(MMP)等血管生成诱导因子,协同抑制肿瘤新生血管的形成,促进肿瘤消退。IL -12可以不依赖免疫系统而发挥抑制肿瘤血管生成的作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-12 抑制 血管生成 肿瘤
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肺炎支原体感染患儿血清γ-干扰素、白细胞介素-12变化 被引量:5
13
作者 沈丽萍 张英 范峥 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期456-457,共2页
关键词 Γ-干扰素 白细胞介素-12 肺炎支原体感染 血清 患儿 肺炎支原体(Mp) 小儿呼吸道感染 免疫学发病机制 呼吸系统炎症 Mp感染 肺外并发症 呼吸道上皮 IFN-γ 细胞吸附 多系统 介素
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日本血吸虫脂肪酸结合蛋白DNA联合白细胞介素-12的免疫保护作用 被引量:4
14
作者 朱晓华 石佑恩 《医药导报》 CAS 2005年第4期268-270,共3页
目的 探讨白细胞介素-12 (IL-12)对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 (Sj14FABP)DNA疫苗的辅佐作用。方法 大量制备pVIVO2、pVIVO2 IL-12、pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA。48只雄性Balb/c小鼠随机分为A、B、C、D组,每组各 12只,每只小鼠于免疫前 1... 目的 探讨白细胞介素-12 (IL-12)对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 (Sj14FABP)DNA疫苗的辅佐作用。方法 大量制备pVIVO2、pVIVO2 IL-12、pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA。48只雄性Balb/c小鼠随机分为A、B、C、D组,每组各 12只,每只小鼠于免疫前 1d在右后腿股四头肌肌内注射 0 75%盐酸布比卡因 30μL。A组给予 0 9%氯化钠注射液 100μL,im;B组给予pVIVO2质粒DNA 100μg,im; C组给予pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA 100μg,im;D组给予pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA50μg和pVIVO2 IL 12质粒DNA50μg,im。免疫 30d后,每只小鼠以 ( 40±2 )条尾蚴感染,感染 45d后,计数成虫及肝内虫卵;用ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平。结果 C、D组的减虫率分别为24 11%和 38 83%,减卵率为 27 20%和 40 27%,差异有显著性(P<0. 05);免疫 30d后小鼠血清IgG水平无明显升高,各组间差异无显著性 (P>0 05)。结论 pVIVO2 Sj14FABP能够诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力,IL-12是一种有效的血吸虫病DNA疫苗佐剂。 展开更多
关键词 日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 白细胞介素-12 DNA疫苗 佐剂
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人白细胞介素-12的纯化及鉴定 被引量:2
15
作者 黄进 罗果 葛正龙 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第14期6353-6355,共3页
[目的]利用人白细胞介素-12(human interleukin 12,hIL-12)转基因马铃薯,探讨hIL-12的纯化条件。[方法]提取转基因马铃薯中的总蛋白,hIL-12的分离纯化步骤包括超滤、MKF-AIW阴离子交换层析、MKF-CIC阳离子交换层析。在阴离子交换层析吸... [目的]利用人白细胞介素-12(human interleukin 12,hIL-12)转基因马铃薯,探讨hIL-12的纯化条件。[方法]提取转基因马铃薯中的总蛋白,hIL-12的分离纯化步骤包括超滤、MKF-AIW阴离子交换层析、MKF-CIC阳离子交换层析。在阴离子交换层析吸附过程中采用试管法选择最佳吸附pH值,选择洗脱过程最佳洗脱pH值;选择阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值;ELISA法测定各纯化阶段收集的上清液或洗脱峰中的hIL-12的含量;非还原SDS-PAGE电泳鉴定蛋白纯度;Western Blot检测纯化的hIL-12。[结果]阴离子交换层析吸附过程最佳吸附pH值为7.5,洗脱过程最佳洗脱pH值为7,阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值为6.5。纯化的hIL-12经非还原SDS-PAGE分析蛋白纯度为91%。Western Blot分析结果表明,在40 kD处有特异的蛋白条带出现。[结论]hIL-12转基因马铃薯经总蛋白提取,超滤,阴离子交换层析,阳离子交换层析纯化,获得了高纯度的hIL-12。 展开更多
关键词 白细胞介素-12 纯化 转基因马铃薯
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马铃薯块茎特异性启动子驱动的人白细胞介素-12的遗传转化研究 被引量:2
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作者 杨加伟 程小玲 龙朝康 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期220-225,共6页
为获得高效表达人白细胞介素-12(h IL-12)蛋白的转基因马铃薯植株,利用根瘤农杆菌侵染法将前期构建的马铃薯块茎特异性启动子Ppatatin驱动的h IL-12植物表达载体导入马铃薯,通过共培养、筛选、分化等过程获得转基因植株,并结合PCR、RT-... 为获得高效表达人白细胞介素-12(h IL-12)蛋白的转基因马铃薯植株,利用根瘤农杆菌侵染法将前期构建的马铃薯块茎特异性启动子Ppatatin驱动的h IL-12植物表达载体导入马铃薯,通过共培养、筛选、分化等过程获得转基因植株,并结合PCR、RT-PCR、GUS染色及ELISA分析对转基因植株进行鉴定。结果显示,获得12个马铃薯转基因株系,PCR检测表明其中的10个株系目的基因已导入马铃薯基因组,转基因阳性率为83%;RT-PCR分析表明其中的7个株系外源基因在转录水平成功获得表达,ELISA分析表明其中的5个株系有明显的蛋白水平表达。对这7个株系后代的检测表明外源基因成功表达且具有良好的遗传稳定性。 展开更多
关键词 ppatatin启动子 白细胞介素-12 转基因马铃薯 植物生物反应器
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子宫内膜异位症患者腹腔液及血清中白细胞介素12和肿瘤坏死因子-α检测 被引量:8
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作者 李爱军 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第4期728-730,共3页
目的:探讨子宫内膜异位症(内异症)患者腹腔液及血清中白细胞介素12(IL12)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的变化及意义。方法:采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测26例内异症患者(Ⅰ、Ⅱ期11例,Ⅲ、Ⅳ期15例)及16例对照组(其他妇科手术,... 目的:探讨子宫内膜异位症(内异症)患者腹腔液及血清中白细胞介素12(IL12)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的变化及意义。方法:采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测26例内异症患者(Ⅰ、Ⅱ期11例,Ⅲ、Ⅳ期15例)及16例对照组(其他妇科手术,术中可见腹腔积液者)腹腔液及血清中IL12和TNFα含量。结果:内异症组腹腔液及血清IL12含量均低于对照组,2组腹腔液IL12均低于同组的血清含量,差异有统计学意义(P<0.01)。内异症组Ⅲ、Ⅳ期腹腔液IL12((19.56±0.83)ng·L-1)和血清IL12((23.62±0.59)ng·L-1)均低于Ⅰ、Ⅱ期腹腔液((23.59±0.56)ng·L-1)和血清((28.71±0.54)ng·L-1)含量,差异均有统计学意义(P均<0.01);内异症组腹腔液及血清TNFα含量均高于对照组,2组腹腔液TNFα含量均高于同组的血清含量,差异有统计学意义(P<0.01)。内异症组Ⅲ、Ⅳ期腹腔液TNFα((60.24±0.96)ng·L-1)和血清TNFα((49.90±1.36)ng·L-1)均高于Ⅰ、Ⅱ期腹腔液((53.37±0.89)ng·L-1)和血清((42.20±0.99)ng·L-1)含量,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论:IL12和TNFα在内异症发病中起重要作用,检测其含量变化有利于该病的诊断和治疗。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 白细胞介素12 肿瘤坏死因子-Α
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从转基因马铃薯中纯化的人白细胞介素-12的生物学活性分析 被引量:1
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作者 黄进 罗果 葛正龙 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第16期7334-7334,7347,共2页
[目的]研究从转人白细胞介素-12(hIL-12)基因马铃薯中纯化的hIL-12的生物学活性。[方法]MTT法检测纯化的hIL-12体外抗肿瘤作用。[结果]纯化的hIL-12在体外对NK敏感肿瘤细胞K562有杀伤作用,而野生对照组无作用。[结论]试验中从转hIL-12... [目的]研究从转人白细胞介素-12(hIL-12)基因马铃薯中纯化的hIL-12的生物学活性。[方法]MTT法检测纯化的hIL-12体外抗肿瘤作用。[结果]纯化的hIL-12在体外对NK敏感肿瘤细胞K562有杀伤作用,而野生对照组无作用。[结论]试验中从转hIL-12基因马铃薯中纯化的hIL-12具有生物学活性。 展开更多
关键词 白细胞介素-12 纯化 生物学活性 转基因马铃薯
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栉孔扇贝白细胞介素-2及其受体和白细胞介素-12的免疫组化定位
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作者 孙虎山 王宜艳 +2 位作者 王晓安 孙修勤 李光友 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期87-90,共4页
采用免疫组化技术对栉孔扇贝(Chlamys farreri)血细胞及各主要器官组织中的白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素2受体(IL-2R)和白细胞介素12(IL-12)进行了定性定位研究.结果表明,栉孔扇贝血淋巴中的部分血细胞呈IL-2免疫反应阳性和IL-12弱阳... 采用免疫组化技术对栉孔扇贝(Chlamys farreri)血细胞及各主要器官组织中的白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素2受体(IL-2R)和白细胞介素12(IL-12)进行了定性定位研究.结果表明,栉孔扇贝血淋巴中的部分血细胞呈IL-2免疫反应阳性和IL-12弱阳性,血淋巴中的所有血细胞均呈IL-2R强阳性.外套膜、鳃、唇瓣和口唇等器官内少量细胞呈IL-2和IL-12免疫反应弱阳性,其他大部分细胞呈IL-2和IL-12阴性;肝脏肝小叶细胞分别呈IL-2和IL-12免疫反应强阳性和阳性.外套膜、鳃、唇瓣和口唇等器官的上皮及结缔组织呈IL-2R阳性或弱阳性,结缔组织内的血窦、血管内皮和血细胞呈IL-2R免疫反应强阳性;肝脏肝小叶细胞呈IL-2R强阳性或极强阳性;生殖腺表层部分细胞也呈IL-2R强阳性;神经节内的部分神经纤维和脑神经节表层部分小细胞呈IL-2R免疫反应弱阳性.栉孔扇贝体内的IL-2、IL-2R和IL-12可能在其免疫调节中发挥重要作用. 展开更多
关键词 栉孔扇贝 白细胞介素-2 白细胞介素-2受体 白细胞介素-12 免疫组织化学 白细胞介素-2 免疫组化定位 栉孔扇贝 受体 IL-12 免疫反应 IL-2 器官组织 白细胞介素2
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组胺HR1拮抗剂对变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素-12的影响
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作者 燕志强 章如新 +4 位作者 余少卿 刘国均 温武 姜俊芝 吴革平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期458-459,共2页
随着分子生物学技术的发展,对组胺功能认识的不断深入,组胺在变应性鼻炎等变态反应性疾病中对免疫系统的影响逐步引起重视。组胺HR1拮抗剂是目前治疗变应性鼻炎的主要药物之一,但治疗中也存在不足之处。本研究旨在进一步了解组胺和HR... 随着分子生物学技术的发展,对组胺功能认识的不断深入,组胺在变应性鼻炎等变态反应性疾病中对免疫系统的影响逐步引起重视。组胺HR1拮抗剂是目前治疗变应性鼻炎的主要药物之一,但治疗中也存在不足之处。本研究旨在进一步了解组胺和HR1拮抗剂在变应性鼻炎中的作用机制。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 白细胞介素-12 组胺HR1拮抗剂
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