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人可溶性白介素4受体(sIL4R)在大肠杆菌中的表达和纯化 被引量:1
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作者 张勇 王渭池 李元 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期778-784,共7页
白细胞介素 4 (IL 4 )作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用 .IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应 .sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递介导IL 4的生物学活... 白细胞介素 4 (IL 4 )作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用 .IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应 .sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂 ,应用于哮喘等疾病治疗 .采用RT PCR方法 ,以人单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序确证后插入大肠杆菌高效表达质粒pBV2 2 0 ,得到重组质粒pBV2 2 0 sIL 4R ,重组质粒转化E .coliDH5α .重组菌经温度诱导后超声破碎得到包涵体 ,经SuperdexHR75分子筛柱和DEAE SepharoseFastFlow离子交换柱进行纯化 ,HPLC检测表明纯度达到 90 % .N端测序证明 ,重组sIL 4R与天然sIL 4RN端序列完全一致 .Western印迹、配基结合印迹对重组sIL 4R进行鉴定 .结果表明 ,重组sIL 4R具有结合IL 展开更多
关键词 人可溶性白介素-4受体 PBV220 表达与纯化
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中国人群白介素1受体相关激酶4基因多态性与脓毒症易感性的相关性研究 被引量:3
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作者 方宇 张璐 +5 位作者 周钢桥 曾昭书 王志富 罗志毅 李垒 刘保池 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期385-391,共7页
目的探讨白介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK4)多态性位点与脓毒症发生风险及疾病严重程度的关联性。方法采用Hapmap单倍型标签SNPs(htSNPs)策略和SNPstream分型方法,对255例脓毒症患者和260例对照... 目的探讨白介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK4)多态性位点与脓毒症发生风险及疾病严重程度的关联性。方法采用Hapmap单倍型标签SNPs(htSNPs)策略和SNPstream分型方法,对255例脓毒症患者和260例对照个体进行分型。采用Logistic回归分析,校正性别、年龄、吸烟和饮酒、慢性病状态、A-PACHEⅡ评分和脓毒症病因等混杂因素的影响,评价IRAK4多态性位点与脓毒症的发生风险,以及脓毒症性休克、死亡和多器官功能障碍的遗传相关性。结果 IRAK4基因在中国人群中共捕获6个htSNPs。rs4251431 G/T,rs4251460A/C,rs4251513 G/C和rs4251545 G/A最终用于分型研究。4个htSNPs位点在病例和对照组中的基因型分布均呈Hardy-Weinberg平衡状态。IRAK4多态性位点及单倍体与脓毒症的发生风险和疾病严重程度均无明显相关性。结论在中国人群中,IRAK4基因多态性位点在脓毒症的发生、发展和病程转归中可能不发挥重要作用。 展开更多
关键词 白介素1受体相关激酶4 脓毒症 单倍型标签单核苷酸多态性 连锁不平衡 遗传关联
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白细胞介素4受体基因rs3024608、rs1110470、rs3024685多态性与哮喘的相关性研究 被引量:1
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作者 周兆山 吉中强 +3 位作者 王燕青 薛卫林 张小燕 梁文华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期535-536,共2页
哮喘是常见的呼吸道疾病,也是一种多发病,全球约有3亿哮喘患者,其中我国约有2 000万人催患此病[1].随着工业化的进展及生活方式的改变,哮喘发病率和死亡率在大多数国家呈上升趋势,己成为严重的公共卫生问题.然而,哮喘发病机制至今尚不... 哮喘是常见的呼吸道疾病,也是一种多发病,全球约有3亿哮喘患者,其中我国约有2 000万人催患此病[1].随着工业化的进展及生活方式的改变,哮喘发病率和死亡率在大多数国家呈上升趋势,己成为严重的公共卫生问题.然而,哮喘发病机制至今尚不十分清楚.结合文献我们选择白介素4受体(Interleukin-4 receptor,IL-4R)基因的rs3024608、rs1110470、rs3024685共3个多态位点,探讨青岛地区成人中该基因多态性与哮喘的相关性,以期进一步揭示哮喘的遗传学发病机制,有利于哮喘的预防、早期诊断和治疗. 展开更多
关键词 哮喘患者 基因多态性 受体基因 白细胞介素4 相关性 RECEPTOR 公共卫生问题 白介素4受体
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系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞IL-4受体水平的研究
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作者 姚煦 李遇梅 +3 位作者 弓娟琴 胡兹嘉 李文忠 陈志强 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期69-71,共3页
目的:探讨白介素(IL)-4受体在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用及其临床意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30名健康对照者外周血单一核细胞(PBMC)中IL-4受体mRNA的表达水平;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测... 目的:探讨白介素(IL)-4受体在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用及其临床意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30名健康对照者外周血单一核细胞(PBMC)中IL-4受体mRNA的表达水平;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-4水平。结果:①活动期SLE患者、非活动期SLE患者及健康对照者PBMCIL-4受体表达阳性率为100%。②活动期SLE患者、非活动期SLE患者及健康对照者PBMCIL-4受体mRNA表达水平分别为0.604±0.147、0.400±0.130、0.370±0.070。活动期SLE患者和非活动期SLE患者比较、活动期SLE患者和正常对照者比较差异均有显著性(P=0.000),非活动期SLE患者和正常对照者比较差异无显著性(P=0.351)。③血清中IL-4水平在活动期SLE患者显著高于非活动期SLE患者和正常对照组(P=0.000),非活动期SLE患者显著高于正常对照组(P=0.000),活动期和非活动期SLE患者血清中IL-4水平与PBMCIL-4受体表达水平呈正相关(r=0.622~0.859,P<0.05)。结论:IL-4及其受体的异常表达可能在SLE疾病活动和进展过程中起重要作用。检测SLE患者PBMCIL-4受体的表达水平可作为了解疾病活动性的指标之一。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 白介素-4 受体 白介素-4
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肝X受体激动剂对脂多糖诱导的炎症反应相关因子IRAK-4和NF-κB的影响 被引量:6
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作者 王丁 苗春木 龚建平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期293-295,298,共4页
目的:观察在枯否细胞中人工合成的肝X受体激动剂在脂多糖(LPS)诱导的炎症反应中,对白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)和核因子NF-κB的影响。方法:雄性昆明小鼠,用胶原酶原位灌注法分离和培养肝脏Kupffer细胞,获得的细胞随机分为正常... 目的:观察在枯否细胞中人工合成的肝X受体激动剂在脂多糖(LPS)诱导的炎症反应中,对白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)和核因子NF-κB的影响。方法:雄性昆明小鼠,用胶原酶原位灌注法分离和培养肝脏Kupffer细胞,获得的细胞随机分为正常对照组、LPS处理组、LXR人工合成激动剂T0901317处理组和LPS+T0901317共同处理组。实时-聚合酶链式反应和蛋白Western blot检测各组细胞LXR、IRAK-4和NF-κB的mRNA和蛋白表达水平;凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活性水平。结果:LXR mRNA和蛋白在T0901317组表达都是最高的,而在LPS处理组最低。I-RAK4和NF-κB的mRNA和蛋白水平在LPS处理组最高,联合处理组要低于LPS处理组。NF-κB的活性在LPS最高,联合处理组和T0901317处理组都较LPS组降低。结论:LXR激动剂能有效的上调LXR基因和蛋白水平,同时抑制TLR4信号通路中IRAK-4和NF-κB的mRNA水平和蛋白表达水平,并且能抑制NF-κB的活化。 展开更多
关键词 肝X受体 枯否细胞 白介素-1受体相关激酶-4 核因子-ΚB Toll样受体4
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上海地区儿童哮喘与单核苷酸多态性关系研究 被引量:6
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作者 戴红 刘全华 +2 位作者 华丽 霍婧 鲍一笑 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1039-1042,1046,共5页
目的单点及联合分析5个SNP位点对上海地区儿童哮喘发病的影响。方法应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法,分别对来自上海地区的96名正常对照和96例哮喘患儿的3个常见哮喘相关基因(IL4-RA、TGF-β1、NOS1基因)的5个SNP位点(IL4-R... 目的单点及联合分析5个SNP位点对上海地区儿童哮喘发病的影响。方法应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法,分别对来自上海地区的96名正常对照和96例哮喘患儿的3个常见哮喘相关基因(IL4-RA、TGF-β1、NOS1基因)的5个SNP位点(IL4-RA Q551R、NOS1 C5266T、TGF-β1 C-509T、TGF-β1L10P、TGF-β1 R25P)进行检测。分析上述单个位点在两组间的基因型分布差异,筛选出上海地区儿童哮喘易感SNP位点,并对易感位点是否对哮喘发病起协同作用进行联合分析。结果①NOS1 C5266T、TGF-β1 L1OP、TGF-β1 R25P 3个SNP位点在哮喘组和正常对照组间的基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。②IL4-RAQ551R和TGF-β1 C-509T 2个位点在两组间的基因型分布差异有统计学意义(P=0.048、0.005),其中IL4-RAQ551R A/G杂合子和TGF-β1 C-509T C/T杂合子在哮喘组的基因型频率明显高于正常对照组(分别为50.0%和34.4%,OR=1.92,P=0.028;80.2%和58.3%,OR=2.95,P=0.003)。③携带IL4-RA Q551R A/G+TGF-β1C-509T C/T基因型组合者发生哮喘的相对危险度较仅携带单一IL4-RA Q551R A/G或TGF-β1 C-509T C/T基因型者差别无统计学意义(χ2=0.789、0.842,P均>0.05)。结论 NOS1 C5266T、TGF-β1 L1OP、TGF-β1 R25P 3个SNP位点与上海地区儿童哮喘发生无关;IL4-RA Q551R和TGF-β1 C-509T是上海地区儿童哮喘易感SNP位点,其中IL4-RA Q551R A/G或TGF-β1 C-509T C/T杂合基因型与哮喘发病明显相关,两者不存在协同效应。 展开更多
关键词 哮喘 单核苷酸多态性 白介素4受体 一氧化氮合酶 转化生长因子
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anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1纳米粒子的构建及其治疗哮喘小鼠的应用
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作者 汪蓉蓉 张天宝 曹旭妮 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期693-701,共9页
采用基因工程方法分别将抗表皮生长因子受体(EGFR)的单链抗体(anti-EGFR scFv)和靶向白介素-4-受体(IL-4R)的AP1短肽分别修饰到铁蛋白重链亚基(FTH1)的N端,再通过蛋白表达、体外混合复性后成功制备了anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1双靶... 采用基因工程方法分别将抗表皮生长因子受体(EGFR)的单链抗体(anti-EGFR scFv)和靶向白介素-4-受体(IL-4R)的AP1短肽分别修饰到铁蛋白重链亚基(FTH1)的N端,再通过蛋白表达、体外混合复性后成功制备了anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1双靶向纳米粒子。结果表明:该纳米粒子能正确组装成铁蛋白的特征笼状结构,粒径为(13.2±1.3)nm。在哮喘小鼠模型中发现该纳米粒子能有效抑制哮喘多种症状,且在缓解气道高反应方面的效果优于单靶向anti-EGFR scFv-FTH1/FTH1纳米粒子。 展开更多
关键词 哮喘 铁蛋白 纳米粒子 表皮生长因子受体 白介素-4受体
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