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HproTα／hIL-2融合蛋白真核载体的构建及鉴定
1
作者
周飞燕
黄明
+3 位作者
韦剑
丘力功
卢柳燕
孙希海
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2008年第2期76-80,共5页
利用基因重组技术构建了含信号肽的人源胸腺素α原和白介素2(proTα/IL-2)融合基因的真核表达载体pVAX-PI。用脂质体转染试剂转染COS-7细胞,转染后24、48、72、96 h采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2的表达情况,分别用CTLL-2依赖细胞株...
利用基因重组技术构建了含信号肽的人源胸腺素α原和白介素2(proTα/IL-2)融合基因的真核表达载体pVAX-PI。用脂质体转染试剂转染COS-7细胞,转染后24、48、72、96 h采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2的表达情况,分别用CTLL-2依赖细胞株/MTT法和脾细胞增殖实验测定融合蛋白IL-2和proTα活性,采用ECL western blotting分析和鉴定目的蛋白的相对分子质量大小。结果表明,转染上清在31 kDa处有特异性阳性反应条带,质粒在转染COS-7细胞后不同时间均可进行分泌表达,且于转染后48 h目的蛋白的表达量达峰值。细胞转染上清中的IL-2活性可达58 IU/mL,proTα具有促进小鼠脾脏细胞增殖的作用,可作为基因治疗药物的开发之用。
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关键词
胸腺素Α原
白介素如融合蛋白
转染
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题名
HproTα／hIL-2融合蛋白真核载体的构建及鉴定
1
作者
周飞燕
黄明
韦剑
丘力功
卢柳燕
孙希海
机构
广西师范大学生命科学学院
广州拜迪生物医药有限公司
出处
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2008年第2期76-80,共5页
基金
广东省自然科学基金资助项目(04006313)
文摘
利用基因重组技术构建了含信号肽的人源胸腺素α原和白介素2(proTα/IL-2)融合基因的真核表达载体pVAX-PI。用脂质体转染试剂转染COS-7细胞,转染后24、48、72、96 h采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2的表达情况,分别用CTLL-2依赖细胞株/MTT法和脾细胞增殖实验测定融合蛋白IL-2和proTα活性,采用ECL western blotting分析和鉴定目的蛋白的相对分子质量大小。结果表明,转染上清在31 kDa处有特异性阳性反应条带,质粒在转染COS-7细胞后不同时间均可进行分泌表达,且于转染后48 h目的蛋白的表达量达峰值。细胞转染上清中的IL-2活性可达58 IU/mL,proTα具有促进小鼠脾脏细胞增殖的作用,可作为基因治疗药物的开发之用。
关键词
胸腺素Α原
白介素如融合蛋白
转染
Keywords
prothymosin α
interleukin-2
fusion protein
transfection
分类号
R979.1 [医药卫生—药品]
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1
HproTα／hIL-2融合蛋白真核载体的构建及鉴定
周飞燕
黄明
韦剑
丘力功
卢柳燕
孙希海
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2008
0
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