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新型酵母表达系统-Pichia.pastoris高效分泌型表达病毒生长因子的研究 被引量:2
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作者 付平平 黎洋 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第7期378-380,共3页
目的:实现痘苗病毒生长因子的高效分泌型表达。方法:构建pPIC9K/VGF表达载体,扩增引物分别为P1:TATACGTAGATAGTGGTAAGG,P2:TAGAATTCTTAAGTGTTTGGTTTT;采用Pichia.pastoris酵母表达系统。结果:经酶切鉴定,证明克隆的基因是正确... 目的:实现痘苗病毒生长因子的高效分泌型表达。方法:构建pPIC9K/VGF表达载体,扩增引物分别为P1:TATACGTAGATAGTGGTAAGG,P2:TAGAATTCTTAAGTGTTTGGTTTT;采用Pichia.pastoris酵母表达系统。结果:经酶切鉴定,证明克隆的基因是正确的;经SDS-PAGE分析,证明转化基因组中确实整合有VGF基因,其分子量为9.6kD;得到了高效分泌型VGF高产菌株,目的蛋白占培养液上清蛋白总量的80%以上,产量为0.45g/L。结论:证实可以通过Pichia.pasoris系统制备可溶性痘菌病毒生长因子。为大规模工业生产打下基础。 展开更多
关键词 痘苗病毒生长因子 酵母表达系统 分泌型表达
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