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痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立
被引量：
15
1
作者
闻伟刚
盛蕾
+1 位作者
张吉红
谭钟
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第12期622-626,共5页
采用半巢式PCR技术建立了食品中痕量及微量转基因大米成分的检测方法。根据大米内源SPS基因以及转基因大米Bt63含有的外源Cry1A(b)/Cry1A(c)融合基因和Btc基因,分别设计了6对普通与半巢式PCR引物。扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测...
采用半巢式PCR技术建立了食品中痕量及微量转基因大米成分的检测方法。根据大米内源SPS基因以及转基因大米Bt63含有的外源Cry1A(b)/Cry1A(c)融合基因和Btc基因,分别设计了6对普通与半巢式PCR引物。扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测灵敏度,普通PCR扩增灵敏度为1ng/μl左右,半巢式PCR扩增灵敏度达到10-3～10-4ng/μl,半巢式PCR比普通PCR方法提高了103～104倍;在质量百分比的检测灵敏度方面,普通PCR方法扩增灵敏度在0.1%～1%之间,半巢式PCR方法的检测灵敏度能够达到0.001%～0.01%,半巢式PCR比普通PCR方法要提高10倍以上。在实际样品的检测中,速冻汤圆、婴儿米粉及芝士小圆饼等食品经普通PCR扩增,其内源SPS基因条带模糊或未扩增到,进一步采用半巢式PCR扩增后,能够得到清晰明亮的特异性条带。所有样品均未扩增到外源Cry1A(b)/Cry1A(c)和Btc基因。
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关键词
痕量及微量转基因大米
半巢式PCR
检测
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题名
痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立
被引量：
15
1
作者
闻伟刚
盛蕾
张吉红
谭钟
机构
宁波出入境检验检疫局
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第12期622-626,共5页
基金
宁波市科技计划项目(2005C100094)
文摘
采用半巢式PCR技术建立了食品中痕量及微量转基因大米成分的检测方法。根据大米内源SPS基因以及转基因大米Bt63含有的外源Cry1A(b)/Cry1A(c)融合基因和Btc基因,分别设计了6对普通与半巢式PCR引物。扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测灵敏度,普通PCR扩增灵敏度为1ng/μl左右,半巢式PCR扩增灵敏度达到10-3～10-4ng/μl,半巢式PCR比普通PCR方法提高了103～104倍;在质量百分比的检测灵敏度方面,普通PCR方法扩增灵敏度在0.1%～1%之间,半巢式PCR方法的检测灵敏度能够达到0.001%～0.01%,半巢式PCR比普通PCR方法要提高10倍以上。在实际样品的检测中,速冻汤圆、婴儿米粉及芝士小圆饼等食品经普通PCR扩增,其内源SPS基因条带模糊或未扩增到,进一步采用半巢式PCR扩增后,能够得到清晰明亮的特异性条带。所有样品均未扩增到外源Cry1A(b)/Cry1A(c)和Btc基因。
关键词
痕量及微量转基因大米
半巢式PCR
检测
Keywords
trace transgenic rice
semi-nested PCR
detection
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立
闻伟刚
盛蕾
张吉红
谭钟
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008
15
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