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人ASPP2重组腺病毒质量控制研究
被引量：
1
1
作者
王爽
许坚吉
+1 位作者
刘晓霓
陈德喜
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期881-885,共5页
目的对人ASPP2重组腺病毒制剂进行质量分析,并针对其关键质量特性建立质控方法。方法采用PCR法对重组腺病毒的载体结构特征基因E2B和目的基因ASPP2进行扩增,琼脂糖电泳进行分子量鉴定;采用UV-SDS法测定重组腺病毒的病毒颗粒数;采用组织...
目的对人ASPP2重组腺病毒制剂进行质量分析,并针对其关键质量特性建立质控方法。方法采用PCR法对重组腺病毒的载体结构特征基因E2B和目的基因ASPP2进行扩增,琼脂糖电泳进行分子量鉴定;采用UV-SDS法测定重组腺病毒的病毒颗粒数;采用组织培养半数感染剂量法(TCID50)测定重组腺病毒的感染滴度;采用Western blot法对重组腺病毒感染靶细胞后目的蛋白ASPP2的表达情况进行检测;通过MTT实验观察重组腺病毒对肝癌细胞的生物学效应;采用A549细胞进行重组腺病毒的复制型病毒检测。结果腺病毒载体E2B基因和目的基因ASPP2的鉴定结果与理论值相符;重组腺病毒的病毒颗粒数为每毫升5.6×10^(12)VP,病毒滴度为每毫升2×10^(11)IU,比活性为3.5%;病毒感染靶细胞24 h后可检测出ASPP2蛋白的表达;重组腺病毒对肝癌细胞具有生长抑制作用;复制型腺病毒(RCA)水平小于1 RCA/3.0×10^(10)VP,符合中国食品药品监督管理局(SFDA)的标准。结论建立了人ASPP2重组腺病毒的关键特征的质量控制方法,为该重组腺病毒质量标准的建立及相关应用奠定了基础。
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关键词
基因治疗
腺
病毒
ASPP2
质量控制
病毒比活
MTT
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职称材料
题名
人ASPP2重组腺病毒质量控制研究
被引量：
1
1
作者
王爽
许坚吉
刘晓霓
陈德喜
机构
首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期881-885,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81272266)
国家自然科学基金国际(地区)合作与交流项目(No 81361120401)
+1 种基金
北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目资助(No 2015-3-101)
北京市肝病研究所自主课题基金(No BJIH-01604)
文摘
目的对人ASPP2重组腺病毒制剂进行质量分析,并针对其关键质量特性建立质控方法。方法采用PCR法对重组腺病毒的载体结构特征基因E2B和目的基因ASPP2进行扩增,琼脂糖电泳进行分子量鉴定;采用UV-SDS法测定重组腺病毒的病毒颗粒数;采用组织培养半数感染剂量法(TCID50)测定重组腺病毒的感染滴度;采用Western blot法对重组腺病毒感染靶细胞后目的蛋白ASPP2的表达情况进行检测;通过MTT实验观察重组腺病毒对肝癌细胞的生物学效应;采用A549细胞进行重组腺病毒的复制型病毒检测。结果腺病毒载体E2B基因和目的基因ASPP2的鉴定结果与理论值相符;重组腺病毒的病毒颗粒数为每毫升5.6×10^(12)VP,病毒滴度为每毫升2×10^(11)IU,比活性为3.5%;病毒感染靶细胞24 h后可检测出ASPP2蛋白的表达;重组腺病毒对肝癌细胞具有生长抑制作用;复制型腺病毒(RCA)水平小于1 RCA/3.0×10^(10)VP,符合中国食品药品监督管理局(SFDA)的标准。结论建立了人ASPP2重组腺病毒的关键特征的质量控制方法,为该重组腺病毒质量标准的建立及相关应用奠定了基础。
关键词
基因治疗
腺
病毒
ASPP2
质量控制
病毒比活
MTT
Keywords
gene therapy
adenovirus
ASPP2
quality control
virus specific activity
MTT
分类号
R373.1 [医药卫生—病原生物学]
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人ASPP2重组腺病毒质量控制研究
王爽
许坚吉
刘晓霓
陈德喜
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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