基于评估大熊猫源CDV/CPV病毒样颗粒疫苗抗体的ELISA方法建立及应用

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作者 李强 邓英 +4 位作者 兰景超 罗娌 孙珊珊 胡洹圆 颜其贵 《云南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期68-77,共10页

【目的】建立2种间接ELISA方法,用于检测大熊猫源犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)/犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)病毒样颗粒疫苗免疫后的特异性抗体水平。【方法】以大熊猫源CDV为基础材料,构建含有F蛋白和H蛋白主要抗原... 【目的】建立2种间接ELISA方法,用于检测大熊猫源犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)/犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)病毒样颗粒疫苗免疫后的特异性抗体水平。【方法】以大熊猫源CDV为基础材料,构建含有F蛋白和H蛋白主要抗原表位的原核表达质粒;利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达系统进行表达,获得重组蛋白后进行纯化、透析、复性并检测其反应原性。以FH融合蛋白和大熊猫源CPV VP2蛋白分别作为ELISA包被抗原,优化抗原质量浓度、血清稀释度等检测条件,并进行特异性、敏感性和重复性检验。使用这2种ELISA方法以及商业化CDV/CPV抗体检测试剂盒,检测CDV/CPV病毒样颗粒疫苗免疫犬血清中的特异性抗体含量,并评估二者的符合率。【结果】成功获得分子质量约为35 ku的FH融合蛋白。以FH融合蛋白为包被抗原时,最佳包被质量浓度为8μg/mL,血清最佳稀释度为1∶800;以VP2蛋白为包被抗原时,最佳包被质量浓度为4μg/mL,血清最佳稀释度为1∶400。成功建立了2种用于检测大熊猫源CDV和CPV特异性抗体含量的间接ELISA方法,且其特异性、敏感性及重复性均表现良好,检测灵敏度优于商业化检测试剂盒。【结论】本研究建立的2种间接ELISA方法能够准确反映大熊猫源CDV/CPV病毒样颗粒疫苗的免疫效果,具有较好的临床应用价值。 展开更多

关键词 大熊猫 犬瘟热病毒 犬细小病毒 病毒样颗粒疫苗 ELISA

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病毒样颗粒疫苗及其在禽病防控中的应用研究进展

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作者 郭通 王海鸣 +1 位作者 王静静 刘华雷 《中国动物检疫》 2025年第8期86-93,共8页

病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)疫苗作为一种新兴的疫苗技术,因其安全性高、免疫原性强,在传染病防控领域展现了巨大的潜力,能有效激发机体的免疫反应。随着生物技术的快速发展,VLP疫苗的研究和应用取得了较为显著进展,成为疫苗... 病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)疫苗作为一种新兴的疫苗技术,因其安全性高、免疫原性强,在传染病防控领域展现了巨大的潜力,能有效激发机体的免疫反应。随着生物技术的快速发展,VLP疫苗的研究和应用取得了较为显著进展,成为疫苗领域的一个重要方向。本文从VLP疫苗的优势,免疫机制,表达系统(细菌、酵母以及植物、昆虫和哺乳动物细胞等)及其在禽病防控中的应用方面进行综述,旨在为禽病VLP疫苗的研发提供参考。随着技术进步和防控需要,VLP疫苗有望在禽类疫病防控实践中发挥重要的作用。 展开更多

关键词 病毒样颗粒疫苗 优势 免疫机制 表达系统 防控应用

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猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中的新型应用

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作者 张满义 梁军 +3 位作者 于三科 冯泽泰 蒲小峰 张志刚 《中国动物保健》 2024年第8期10-11,共2页

口蹄疫作为一种高度传染性病毒性疾病,主要感染偶蹄类动物,如牛、羊和猪等,对养殖业造成严重影响。疫苗是口蹄疫防控的重要手段之一,近年来研究表明,猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中展现出了新的应用前景。本文就该疫苗的基本特点... 口蹄疫作为一种高度传染性病毒性疾病,主要感染偶蹄类动物,如牛、羊和猪等,对养殖业造成严重影响。疫苗是口蹄疫防控的重要手段之一,近年来研究表明,猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中展现出了新的应用前景。本文就该疫苗的基本特点、应用情况、免疫效果、安全性评估以及在口蹄疫防控中的作用等方面进行综述,旨在为猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中的更广泛应用提供参考。 展开更多

关键词 口蹄疫 猪矿化病毒样颗粒疫苗 防控 新型应用

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hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗抗胃癌免疫的初步研究

4

作者 郭红 郝嘉 +2 位作者 吴超 石云 房殿春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期169-171,共3页

目的设计新型的人端粒酶逆转录酶(hTERT)肽-核酸病毒样颗粒疫苗,并研究其抗胃癌的作用。方法将阳离子隐性表位肽和DNA疫苗协同性结合于同一疫苗形成病毒样颗粒,通过DNA阻滞试验、DNA沉淀试验、免疫组化等试验优化该疫苗参数,并鉴定其免... 目的设计新型的人端粒酶逆转录酶(hTERT)肽-核酸病毒样颗粒疫苗,并研究其抗胃癌的作用。方法将阳离子隐性表位肽和DNA疫苗协同性结合于同一疫苗形成病毒样颗粒,通过DNA阻滞试验、DNA沉淀试验、免疫组化等试验优化该疫苗参数,并鉴定其免疫原性和观察其体内激发特异性CTL反应的有效性。结果确定制备疫苗的参数为浓度为150mmol/LNaCl,电荷比为4。证实该疫苗可激发特异性CTL反应,并对胃癌细胞具有特异性杀伤活性,Elispot实验显示能够有效诱导的IFN-γ分泌。结论成功构建了具有特异性CTL杀伤活性的hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗,为进一步探索其体内抗胃癌免疫作用奠定了基础。 展开更多

关键词 人端粒酶逆转录酶 胃癌 隐性表位 肽-核酸病毒样颗粒疫苗 细胞毒T淋巴细胞

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3种TLR配体对猪圆环病毒2型病毒样颗粒疫苗佐剂活性的比较

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作者 李洋洋 宗扬 +4 位作者 程健 王亚杰 张鑫宇 夏晓莉 孙怀昌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期595-600,共6页

为比较3种TLR配体对猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)疫苗的佐剂活性,本研究利用重组大肠杆菌表达脑膜炎奈瑟菌Ag473脂蛋白、创伤弧菌FlaB鞭毛蛋白和结核分枝杆菌热应激蛋白70(Hsp70),采用镍亲和柱纯化获得该3种重组蛋白;分别将相同... 为比较3种TLR配体对猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)疫苗的佐剂活性,本研究利用重组大肠杆菌表达脑膜炎奈瑟菌Ag473脂蛋白、创伤弧菌FlaB鞭毛蛋白和结核分枝杆菌热应激蛋白70(Hsp70),采用镍亲和柱纯化获得该3种重组蛋白;分别将相同剂量(10μg)3种重组蛋白、ISA206佐剂(100μL)和不完全弗氏佐剂(FIA)(100μL)与PCV2 VLP疫苗(50μg)混合,肌肉注射免疫小鼠,初免后14 d加强免疫1次;初免后每周采血分离血清,采用ELISA检测抗原特异抗体;加强免疫后14 d利用PCV2攻毒,攻毒后7 d和14 d采血分离血清,采用荧光定量PCR检测病毒DNA拷贝数;攻毒后14 d迫杀小鼠,制备并培养其脾细胞,经PCV2 VLP疫苗刺激后,采用试剂盒检测细胞因子的表达。SDS-PAGE分析结果显示,3种TLR配体在重组大肠杆菌中均获得正确表达,纯化重组蛋白的纯度大于90%。从初免14 d起,3个分子佐剂组中Ag473佐剂组的PCV2抗体水平最高,但低于ISA206佐剂组却高于FIA组,差异不显著(p>0.05)。在PCV2攻毒前,3个分子佐剂组中Ag473佐剂组的小鼠脾细胞TNF-α和IFN-γ表达水平最高,但低于ISA206佐剂组却高于FIA组,差异显著(p<0.05);Hsp70佐剂组的IL-4表达水平最高,Ag473佐剂组次之,但均高于ISA206和FIA组。在攻毒后第7 d,5个免疫组小鼠的病毒拷贝数均较对照组显著下降(p<0.05),但免疫组间差异不显著;在攻毒后第14 d,5个免疫组小鼠的病毒拷贝数进一步下降,免疫组间差异不显著。研究结果表明在测试的3种分子佐剂中,Ag473脂蛋白具有较强的总体免疫佐剂活性,有望进一步开发为PCV2等病毒的亚单位疫苗佐剂。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 病毒样颗粒疫苗 分子佐剂 活性比较

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生物矿化的口蹄疫病毒样颗粒疫苗的免疫原性评价 被引量：3

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作者 李硕 张韵 +9 位作者 白满元 赵瑞翀 宋河涛 穆素雨 滕志东 董虎 马娥宁 孙世琪 郭慧琛 尹双辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1598-1607,共10页

生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,... 生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,采用液相阻断ELISA(LPBE)检测猪血清中的特异性抗体滴度,并经酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测免疫猪外周血淋巴细胞(PBLs)经体外刺激后分泌的特异性IFN-γ。用矿化A型VLPs、矿化O型VLPs、矿化的A型和O型二价VLPs分别免疫牛,采用LPBE、中和试验、夹心ELISA检测血清中的特异性抗体、中和抗体以及IL-4和IFN-γ的含量。结果显示,VLPs与矿化VLPs免疫猪的血清抗体水平无显著差异,相对于VLPs,矿化VLPs免疫猪的PBLs分泌的IFN-γ水平高于VLPs免疫猪(P<0.05);3种疫苗免疫牛血清中IL-4和IFN-γ水平均高于PBS组,矿化二价疫苗与相应的矿化单价疫苗免疫牛的血清特异性抗体和中和抗体效价均无显著差异。综上所述,矿化VLPs对牛和猪均具有良好的免疫原性,不同血清型的矿化VLPs可以联合使用并且矿化壳层可增强VLPs诱导细胞免疫应答的能力。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 病毒样颗粒疫苗 生物矿化 动物免疫

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猪塞内卡谷病毒和圆环病毒2型嵌合病毒样颗粒疫苗的制备与抗体检测 被引量：1

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作者 何至远 吴冬荀 +4 位作者 张贺楠 王飞 吴珊珊 刘昕泽 肖进 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期27-31,37,共6页

为了防控猪场塞内卡谷病毒(SVV)和圆环病毒2型(PCV2)的混合感染,本试验建立了一种猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗的制备方法并进行抗体检测。试验将猪SVV P 1基因部分VP 3序列替换为PCV2 ORF 2基因C端部分多肽序列,利用杆状病毒表达系... 为了防控猪场塞内卡谷病毒(SVV)和圆环病毒2型(PCV2)的混合感染,本试验建立了一种猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗的制备方法并进行抗体检测。试验将猪SVV P 1基因部分VP 3序列替换为PCV2 ORF 2基因C端部分多肽序列,利用杆状病毒表达系统获得表达猪SVV、PCV2嵌合重组蛋白的重组杆状病毒,将病毒培养物纯化,经蛋白检测及电镜观察确定成功构建猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒(大小约30 nm)。结果表明,制备的猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗可使试验猪同时产生针对猪SVV和PCV2的特异性抗体,充分显示出其作为一种针对猪场SVV和PCV2合并感染的安全有效疫苗的前景。 展开更多

关键词 猪塞内卡谷病毒 圆环病毒2型 嵌合病毒样颗粒疫苗 杆状病毒表达系统

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口蹄疫病毒矿化病毒样颗粒疫苗技术优点及其研制进展 被引量：2

8

作者 张满义 梁军 +3 位作者 于三科 冯泽泰 蒲小峰 张志刚 《猪业科学》 2023年第12期66-68,共3页

引言。口蹄疫是一种由口蹄疫病毒引起的急性传染病,广泛影响着牛、羊、猪等蹄类动物,其高传染性和快速传播特性对畜牧业造成了严重的经济损失和社会影响。为了有效控制口蹄疫的传播,疫苗的研发和应用一直是畜牧业防控口蹄疫的重要手段... 引言。口蹄疫是一种由口蹄疫病毒引起的急性传染病,广泛影响着牛、羊、猪等蹄类动物,其高传染性和快速传播特性对畜牧业造成了严重的经济损失和社会影响。为了有效控制口蹄疫的传播,疫苗的研发和应用一直是畜牧业防控口蹄疫的重要手段之一。近年来,矿化病毒样颗粒疫苗技术作为一种新兴的疫苗研发方法受到广泛关注。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 急性传染病 疫苗研发 病毒样颗粒疫苗 技术优点 畜牧业 传播特性 高传染性

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病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的应用 被引量：1

9

作者 杨希川 《中国猪业》 2023年第5期107-110,共4页

一些猪病如猪瘟、猪圆环病毒病等,其病毒可能会通过肉类食品传播给人类,对人体健康造成威胁,且危害公共卫生安全。因此,猪病防控在养猪生产中占有至关重要的地位,不仅关系到养殖户的经济效益、我国肉类供应稳定,还关系着国家食品安全与... 一些猪病如猪瘟、猪圆环病毒病等,其病毒可能会通过肉类食品传播给人类,对人体健康造成威胁,且危害公共卫生安全。因此,猪病防控在养猪生产中占有至关重要的地位,不仅关系到养殖户的经济效益、我国肉类供应稳定,还关系着国家食品安全与公共健康。病毒样颗粒(VLPs)疫苗具有安全性高、免疫原性好等优势,是目前研究预防动物病毒性疾病的疫苗的最热关注点。文章结合实践经验,对病毒样颗粒及其表达系统进行简要介绍,并对病毒样颗粒疫苗在多种猪病防控中的应用情况进行综述,包括猪细小病毒病、猪圆环病毒病、猪传染性胃肠炎、猪乙型脑炎、猪瘟等,旨在为病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的推广与使用提供更多依据。 展开更多

关键词 病毒样颗粒疫苗 猪病防控 猪细小病毒病 猪瘟

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1种能抵抗致病性新城疫病毒且区分自然感染和疫苗免疫的病毒样颗粒疫苗研究

10

作者 Park J K 刘萌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期173-173,共1页

在该研究中,作者利用昆虫细胞表达系统,构建了融合表达新城疫病毒(NDV)F蛋白和流感病毒M1蛋白的抗NDV的病毒样颗粒(VLPs)。本试验采用含有不同剂量(0.4、2、10、50μg VLP/0.5mL)的油乳剂新城疫病毒样颗粒疫苗免疫SPF鸡。免疫3周后,用... 在该研究中,作者利用昆虫细胞表达系统,构建了融合表达新城疫病毒(NDV)F蛋白和流感病毒M1蛋白的抗NDV的病毒样颗粒(VLPs)。本试验采用含有不同剂量(0.4、2、10、50μg VLP/0.5mL)的油乳剂新城疫病毒样颗粒疫苗免疫SPF鸡。免疫3周后,用商品化ELISA试剂盒检测该疫苗的免疫原性;利用新城疫强毒毒株进行功毒试验评价该疫苗的保护效果。结果表明,新城疫病毒样颗粒疫苗产生的抗新城疫抗体和攻毒保护效果是剂量依赖性的。虽然剂量为0.4或2μg的病毒样颗粒疫苗未达到高保护率,但是剂量为10或50μg的病毒样颗粒疫苗能完全保护攻毒后鸡胚,并能大大减少病毒散毒期。不仅如此,还能很容易地通过血凝抑制(HI)试验鉴别自然感染和疫苗免疫动物。结果表明,在家禽范围内利用新城疫病毒样颗粒疫苗可能是未来防控NDV最有潜力的策略。 展开更多

关键词 新城疫病毒 病毒样颗粒疫苗 自然感染 疫苗 免疫

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杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)表达的动物病毒样颗粒及疫苗研究进展 被引量：1

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作者 王炎 高婉宁 +3 位作者 范益阳 玉妹 张德荣 柏家林 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第1期203-208,共6页

杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自... 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自组装形成的纳米颗粒,由于缺乏病毒遗传物质,其安全性较高。VLP表面抗原排列高度有序,可有效诱导免疫反应,是一种新型的亚单位疫苗。本文综述了IBEVS在动物VLP疫苗中的应用现状,分析了当前IBEVS存在的问题及其解决策略,为动物VLP疫苗的进一步开发提供参考。 展开更多

关键词 病毒样颗粒 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS) 动物病毒样颗粒疫苗

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狂犬病新型基因工程疫苗研究进展 被引量：9

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作者 柴本杰 黄菲 +4 位作者 裴捷 周明 田大勇 傅振芳 赵凌 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期75-84,共10页

狂犬病是由狂犬病病毒感染中枢神经系统引起的一种古老的人兽共患传染病,人和动物感染后一旦出现临床症状,死亡率几乎100%,至今仍无有效的治疗方法。当前,接种疫苗是预防狂犬病最为有效的途径。因此,狂犬病疫苗研发一直是狂犬病研究领... 狂犬病是由狂犬病病毒感染中枢神经系统引起的一种古老的人兽共患传染病,人和动物感染后一旦出现临床症状,死亡率几乎100%,至今仍无有效的治疗方法。当前,接种疫苗是预防狂犬病最为有效的途径。因此,狂犬病疫苗研发一直是狂犬病研究领域的热点之一,进而不断涌现出新型疫苗。本文对近期狂犬病新型灭活疫苗、弱毒疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、口服疫苗等基因工程疫苗研究进展进行系统梳理,以期把握狂犬病疫苗研究现状,为研发更为有效的狂犬病新型疫苗提供新思路。 展开更多

关键词 狂犬病 狂犬病病毒 灭活疫苗 弱毒疫苗 核酸疫苗 亚单位疫苗 病毒样颗粒疫苗 口服疫苗 基因工程

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小反刍兽疫基因工程疫苗研究进展 被引量：4

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作者 曹冬伸 赵柏林 +4 位作者 曲萍 胡冬梅 王文超 宋晓晖 潘树德 《动物医学进展》 北大核心 2015年第11期101-105,共5页

2013年世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮食及农业组织(FAO)提出小反刍兽疫可能成为继牛瘟之后,被在全球范围内消灭的第2个动物疫病。近年来,广泛使用弱毒疫苗免疫预防小反刍兽疫,但由于缺乏区分免疫抗体和感染抗体的技术手段等,给小反... 2013年世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮食及农业组织(FAO)提出小反刍兽疫可能成为继牛瘟之后,被在全球范围内消灭的第2个动物疫病。近年来,广泛使用弱毒疫苗免疫预防小反刍兽疫,但由于缺乏区分免疫抗体和感染抗体的技术手段等,给小反刍兽疫的消灭和根除计划的实施带来一定的困难。因此,新型疫苗以及特异性诊断技术的研究和开发成为研究热点。论文对小反刍兽疫新型疫苗研究中的亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、基因工程弱毒苗、核酸疫苗的研究进行综述,以期为小反刍兽疫新型疫苗开发和应用提供参考。 展开更多

关键词 小反刍兽疫 亚单位疫苗 病毒样颗粒疫苗 基因工程弱毒苗 核酸疫苗

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H7N9亚型禽流感疫苗研究进展 被引量：2

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作者 梁少波 张琳 +8 位作者 朱俊峰 刘朔 彭程 尹馨 李金平 侯广宇 刘华雷 格日勒图 蒋文明 《中国动物检疫》 CAS 2021年第12期77-81,共5页

自2013年以来,H7N9亚型流感对我国养禽业和人类公共卫生造成了极大影响。疫苗作为重要防疫工具,在H7N9亚型流感防控中起到了至关重要的作用。目前我国批准使用的H7N9禽流感全病毒灭活疫苗安全性高、免疫效果好,已在国内广泛应用。随着对... 自2013年以来,H7N9亚型流感对我国养禽业和人类公共卫生造成了极大影响。疫苗作为重要防疫工具,在H7N9亚型流感防控中起到了至关重要的作用。目前我国批准使用的H7N9禽流感全病毒灭活疫苗安全性高、免疫效果好,已在国内广泛应用。随着对H7N9亚型流感病毒研究的不断深入,研究人员对核酸疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗及通用流感疫苗等新型疫苗进行了探索和尝试,并取得了一定的进展,为我国禽流感疫苗的开发与应用夯实了技术基础。本文对各类型H7N9亚型禽流感疫苗的研发情况以及优点和应用情况进行了综述,以期为更好地防控禽H7N9亚型流感提供帮助。 展开更多

关键词 H7N9 全病毒灭活疫苗 核酸疫苗 亚单位疫苗 病毒样颗粒疫苗 通用流感疫苗

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鸡传染性喉气管炎疫苗研究进展 被引量：2

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作者 徐少珠 张国丽 +4 位作者 丘成文 邝贞结 吴燕华 卢丽平 齐冬梅 《广东畜牧兽医科技》 2023年第4期35-41,共7页

鸡传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)是由喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引起的鸡的一种病毒性呼吸道传染病。ILT是一种较为严重的禽病毒病;根据ILT的临床表现分为急性型和温和型,急性型发病... 鸡传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)是由喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引起的鸡的一种病毒性呼吸道传染病。ILT是一种较为严重的禽病毒病;根据ILT的临床表现分为急性型和温和型,急性型发病率和死亡率均较高,温和型死亡率低但在养殖密集地区感染逐渐增多。ILT可引起家禽死亡和蛋鸡产蛋率下降,给养禽业带来严重的经济损失。目前,通过使用疫苗接种和生物安全相结合的综合防控措施,在集约化养禽地区ILT已得到较好的控制。该文对多个国家已商品化的ILT减毒活疫苗和重组病毒载体活疫苗,以及正在研发中的ILT重组病毒载体活疫苗、基因缺失活疫苗、病毒样颗粒疫苗等新型ILT疫苗进行综述,以期为更好地防控ILT提供理论参考。 展开更多

关键词 鸡传染性喉气管炎 减毒活疫苗 灭活疫苗 重组载体活疫苗 基因缺失活疫苗 病毒样颗粒疫苗

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稳定表达HIV-1 GagPol基因真核表达载体的构建与鉴定

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作者 张一折 王鹏 +2 位作者 张守涛 刘伟 刘国祥 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期145-148,共4页

目的:构建能稳定表达HIV-1 GagPol基因的真核表达载体。方法:用PCR方法扩增HIV-1 GagPol基因,克隆入pMD18-T,然后亚克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(-)中,将构建的重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol分别瞬时和稳定转染HEK293细胞,经G418筛选,建立... 目的:构建能稳定表达HIV-1 GagPol基因的真核表达载体。方法:用PCR方法扩增HIV-1 GagPol基因,克隆入pMD18-T,然后亚克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(-)中,将构建的重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol分别瞬时和稳定转染HEK293细胞,经G418筛选,建立稳定转染GagPol基因的细胞系,并应用Western Blot方法鉴定表达产物。结果:酶切鉴定和Western Blot检测证实重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol构建正确,并能稳定表达HIV-1 GagPol蛋白。结论:成功构建携带HIV-1 GagPol基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/GagPol,并在HEK293细胞中获得稳定表达。 展开更多

关键词 HIV-1 GagPol基因 稳定表达 病毒样颗粒疫苗

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