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果蝇细胞系中反转录病毒样粒子的电镜观察 被引量:1
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作者 曾庆韬 钱远槐 杨官品 《电子显微学报》 CAS CSCD 1999年第2期183-187,共5页
反转录病毒样粒子是反转录病毒样转座子copia的表达产物。完整的copiaDNA能在无copia的细胞系中表达,并能启动外源基因表达,因而可作为基因工程载体使用。为迅速鉴定出的细胞系中copia和确定其表达时期,本研... 反转录病毒样粒子是反转录病毒样转座子copia的表达产物。完整的copiaDNA能在无copia的细胞系中表达,并能启动外源基因表达,因而可作为基因工程载体使用。为迅速鉴定出的细胞系中copia和确定其表达时期,本研究用电子显微镜对黑腹果蝇黑条体突变型细胞系中的反转录病毒样粒子进行了观察。反转录病毒样粒子为圆形,直径约0.05μm,主要存在于稳定期细胞系的细胞核中,偶尔也能在细胞质中观察到,而在细胞分裂的指数增生期则完全观察不到。结果表明反转录病毒样粒子高效表达时期是细胞系的稳定期,这为选择外源基因的高效表达载体和受体系统以及分离表达产物提供了实验依据。 展开更多
关键词 反转录 病毒样粒子 果腹果蝇 细胞系 电镜观察
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凯米拉和现代嵌合病毒样粒子
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作者 Rainer Ulrich 吴贤福 缪从容 《生物技术通报》 CAS CSCD 1997年第4期38-40,共3页
凯米拉(Chimarea)是希腊神话中狮头、羊身、蛇尾的妖物。据说,它纵火焚烧了地处小亚西亚吕基亚王国的森林和田地,吕基亚国王派英雄柏勒洛丰去除掉怪物,同时企图让柏勒洛丰在交战中死去。然而,柏勒洛丰得到了神的相助,给他送来了双翼神... 凯米拉(Chimarea)是希腊神话中狮头、羊身、蛇尾的妖物。据说,它纵火焚烧了地处小亚西亚吕基亚王国的森林和田地,吕基亚国王派英雄柏勒洛丰去除掉怪物,同时企图让柏勒洛丰在交战中死去。然而,柏勒洛丰得到了神的相助,给他送来了双翼神马柏伽索斯。护佑女神雅典娜教会了柏勒洛丰如何驾驽柏伽索斯。柏勒洛丰骑上柏伽索斯升入天空,终于杀死了凯米拉。现代生物学已经掌握利用不同种类微生物的要素组成新的物种,与古代凯米拉相比。 展开更多
关键词 嵌合病毒样粒子 疫苗
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融合TAT重组猪细小病毒样粒子的构建及鉴定
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作者 刘金凤 杜毅超 +4 位作者 覃绍敏 白安斌 张振江 陈凤莲 吴健敏 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期66-71,共6页
为表达和鉴定含TAT蛋白转导域的重组猪细小病毒(PPV)样粒子,以PPV N株为模板扩增其VP2基因,将具有穿膜功能的TAT蛋白转导域连接在VP2基因的N端,构建TAT-VP2融合基因,并用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建含TAT-VP2基因的重组杆... 为表达和鉴定含TAT蛋白转导域的重组猪细小病毒(PPV)样粒子,以PPV N株为模板扩增其VP2基因,将具有穿膜功能的TAT蛋白转导域连接在VP2基因的N端,构建TAT-VP2融合基因,并用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建含TAT-VP2基因的重组杆状病毒,感染昆虫细胞进行融合基因的表达,通过间接免疫荧光(IFA)、电镜观察及血凝试验对表达产物进行鉴定。IFA结果显示细胞表达产物能与鼠抗PPV抗体发生特异性反应,透射电镜观察到表达产物可装配形成典型的病毒样粒子结构,形态大小与野生型PPV及VP2病毒粒子相似;血凝试验证实融合TAT重组PPV-VLPs具有与全病毒相同的血凝活性。试验结果为进一步研制高效PPV亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪细小病毒 重组杆状病毒 TAT蛋白转导域 病毒样粒子
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水貂肠炎病毒VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:5
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作者 倪佳 张蕾 +6 位作者 柴秀丽 高晗 张海玲 赵建军 白雪 邵西群 闫喜军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期97-100,共4页
利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)VP2基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEVVP2基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFa... 利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)VP2基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEVVP2基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFast-BacⅠ载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blotting鉴定。结果成功克隆MEVVP2基因。Western blotting结果证实,表达蛋白能够被MEV单克隆抗体识别。在Bac-To-Bac杆状病毒表达系统中成功的表达了MEV VP2蛋白,目的蛋白具有较好的反应原性。 展开更多
关键词 水貂肠炎病毒 VP2基因 病毒样粒子 杆状病毒表达系统
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HIV-1核心蛋白Gag与IL-6共表达重组鸡痘病毒的构建及其免疫原性研究
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作者 江文正 金宁一 +2 位作者 李子健 张立树 韩文瑜 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第11期31-34,共4页
分别将IL-6和HIV-1 gag基因插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTAL串联启动子和复合启动子(ATI-P7.5)下游,构建了重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GAG-IL6。经同源重组和Western blot检测,获得重组鸡痘病毒,并将该重组病毒免疫BALB/c小鼠,检测免疫... 分别将IL-6和HIV-1 gag基因插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTAL串联启动子和复合启动子(ATI-P7.5)下游,构建了重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GAG-IL6。经同源重组和Western blot检测,获得重组鸡痘病毒,并将该重组病毒免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠血清抗体水平和特异性CTL杀伤活性。结果获得的重组鸡痘病毒可同时表达HIV-1核心蛋白和IL-6,并在感染细胞内形成病毒样粒子。重组病毒具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫。 展开更多
关键词 鸡痘病毒 体液免疫 细胞免疫 艾滋病 病毒样粒子
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果蝇copia的克隆与分子特征 被引量:1
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作者 曾庆韬 钱远槐 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1997年第S1期46-47,共2页
果蝇copia的克隆与分子特征曾庆韬钱远槐(湖北大学生命科学系,武汉430062)CloningandMolecularCharacterizationofcopiainDrosophilamauritianZeng... 果蝇copia的克隆与分子特征曾庆韬钱远槐(湖北大学生命科学系,武汉430062)CloningandMolecularCharacterizationofcopiainDrosophilamauritianZengQingtaoQianYuanhu... 展开更多
关键词 病毒样粒子 黑腹果蝇 反转录 物理图 限制性内切酶 分子杂交 分子特征 培养细胞 生命科学 测序分析
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疫苗
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《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第4期62-64,共3页
961375 β-丙内酯对DNA的失活[英]/Perrin, P.…//Biologi-cals.-1995,23(3).-207~211[译自DBA,1995,14(22),95-13090]
关键词 F基因 烟草花叶病毒 培养基 分枝杆菌 植物组织 外壳蛋白 病毒样粒子 连续细胞系 质粒 表达产物
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