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重组犬瘟热病毒抗原表位T'TB和犬细小病毒vp2基因的真核表达
被引量:
1
1
作者
王亚君
华育平
高光慧
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期349-353,358,共6页
将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位T'TB基因克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-T'TB。应用PCR方法扩增犬细小病毒vp2基因,将其克隆至pMD18-T载体,测序后将vp2基因插入T'TB基因下...
将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位T'TB基因克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-T'TB。应用PCR方法扩增犬细小病毒vp2基因,将其克隆至pMD18-T载体,测序后将vp2基因插入T'TB基因下游,命名为pFastBacHTc-T'TB-VP2,进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得携带犬瘟热病毒T'TB细胞表位和犬细小病毒vp2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T'TB-VP2,转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T'TB-VP2蛋白,大小约为70ku。经Westernblot分析,表达的蛋白可与犬细小病毒阳性血清反应,具有良好的免疫原性。
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关键词
犬瘟热
病毒
犬细小
病毒
犬瘟热
病毒
T^ITB
抗原
表
位
VP2基因
杆状
病毒
表
达系统
表
达
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职称材料
猪圆环病毒抗原表位肽免疫层析试纸条的研制
被引量:
1
2
作者
杨礼
《国外畜牧学(猪与禽)》
2020年第7期22-27,共6页
猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)的感染与断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS)的发生密切相关。为快速便捷地检测猪圆环病毒2型抗体,本次试验主要采用柠檬酸三钠还原法制备胶体...
猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)的感染与断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS)的发生密切相关。为快速便捷地检测猪圆环病毒2型抗体,本次试验主要采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,运用金黄色葡萄球菌蛋白A蛋白(Staphylococal Protein A,SPA)作为标记蛋白制备金标垫,分别以猪圆环病毒抗原表位肽和SPA免疫兔血清纯化IgG作为检测带(T带)与质控带(C带),经多次重复试验,分别确定了胶体金的最佳标记浓度、最适pH、重悬液和样品垫处理液的最佳配方以及检测带(优势抗原表位肽)和质控带(多抗IgG)的最适包被浓度,最终装配成抗体检测试纸条,用以检测已知的PCV2阳性血清和阴性血清,验证其检测的敏感性、特异性与稳定性。结果表明,经纳米粒度仪检测可得知胶体金颗粒大小在10 nm^14 nm之间。用SPA标记胶体金的最适pH为6.0,最佳标记量为7μg/mL。检测带和质控带的蛋白包被浓度均为1 mg/mL。经验证,该试纸条不同批次间以及同一批次内重复性较好,具有较好的灵敏度、特异性和稳定性,能够准确检测猪血清样品中的抗体水平,可以进一步评价猪圆环病毒病疫苗的免疫效果。
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关键词
猪圆环
病毒
2型
猪圆环
病毒抗原表位
肽
免疫层析试纸
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职称材料
猪流感病毒多表位融合蛋白对小鼠的免疫原性分析
3
作者
师小潇
哈卓
+3 位作者
丁长根
潘洁
饶柏忠
刘惠莉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第9期1284-1288,共5页
作者拟利用表位多肽的抗原性及黏膜佐剂免疫增强作用,设计可通过黏膜途径免疫接种的猪流感病毒通用型疫苗。体外合成H1N1、H3N2亚型猪流感病毒表位抗原基因,C末端串联大肠杆菌热敏性肠毒素LTb基因,构建pET30(a)-ep-LTb表达载体,利用SDS-...
作者拟利用表位多肽的抗原性及黏膜佐剂免疫增强作用,设计可通过黏膜途径免疫接种的猪流感病毒通用型疫苗。体外合成H1N1、H3N2亚型猪流感病毒表位抗原基因,C末端串联大肠杆菌热敏性肠毒素LTb基因,构建pET30(a)-ep-LTb表达载体,利用SDS-PAGE、Western blot分析重组融合蛋白表达及生物学特性,小鼠免疫试验分析融合蛋白免疫原性。SDS-PAGE检测表达蛋白相对分子质量约38ku,主要以包涵体形式存在。重组蛋白可与抗His-tag抗体和CTB抗体发生特异性反应。ELISA及HI试验检测,经黏膜途径免疫的小鼠产生了针对重组表位模拟抗原蛋白及H1N1、H3N2亚型猪流感病毒的血清抗体及局部黏膜分泌型IgA抗体。利用猪流感病毒表位抗原与LTb基因串连获得的融合蛋白具有良好的免疫原性和反应原性,且在黏膜接种局部产生理想的分泌型IgA抗体,能有效阻断病原由黏膜局部感染,为研制猪流感病毒通用型疫苗奠定了基础。
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关键词
猪流感
病毒
表
位
抗原
大肠杆菌热敏性肠毒素B亚基(LTb)
免疫原性
通用疫苗
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职称材料
猪细小病毒病研究进展
被引量:
9
4
作者
刘运超
陈玉梅
+3 位作者
杨苏珍
魏蔷
郝慧芳
柴书军
《动物医学进展》
北大核心
2024年第3期107-110,共4页
猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种无囊膜DNA病毒,主要引起母猪繁殖障碍。该病毒在全世界广泛流行,我国猪场PPV感染率高达90%以上,给养猪业带来巨大经济损失。PPV经口、鼻传播,主要侵染猪的生殖器官,引起母猪的死胎、木乃伊胎...
猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种无囊膜DNA病毒,主要引起母猪繁殖障碍。该病毒在全世界广泛流行,我国猪场PPV感染率高达90%以上,给养猪业带来巨大经济损失。PPV经口、鼻传播,主要侵染猪的生殖器官,引起母猪的死胎、木乃伊胎和公猪的精液质量下降。临床采用接种疫苗的方式进行防控,起到了一定的效果。论文对病毒的基因组和蛋白特征、流行病学和疫苗研究进行综述,以期为PPV的基础研究和疫苗开发提供参考。
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关键词
猪细小
病毒
VLP组装
病毒抗原表位
VP2蛋白
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职称材料
题名
重组犬瘟热病毒抗原表位T'TB和犬细小病毒vp2基因的真核表达
被引量:
1
1
作者
王亚君
华育平
高光慧
机构
东北林业大学野生动物学院
黑龙江省哈尔滨市道里区动物检疫站
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期349-353,358,共6页
基金
黑龙江省青年专项基金(2007Q0256-00)
国家林业局科技课题资助项目
文摘
将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位T'TB基因克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-T'TB。应用PCR方法扩增犬细小病毒vp2基因,将其克隆至pMD18-T载体,测序后将vp2基因插入T'TB基因下游,命名为pFastBacHTc-T'TB-VP2,进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得携带犬瘟热病毒T'TB细胞表位和犬细小病毒vp2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T'TB-VP2,转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T'TB-VP2蛋白,大小约为70ku。经Westernblot分析,表达的蛋白可与犬细小病毒阳性血清反应,具有良好的免疫原性。
关键词
犬瘟热
病毒
犬细小
病毒
犬瘟热
病毒
T^ITB
抗原
表
位
VP2基因
杆状
病毒
表
达系统
表
达
Keywords
canine distemper virus
canine parvovirus virus
T^ITB antigen epitope
vp2 gene
baculovirus expression system
expression
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪圆环病毒抗原表位肽免疫层析试纸条的研制
被引量:
1
2
作者
杨礼
机构
甘肃农业大学应用技术学院
出处
《国外畜牧学(猪与禽)》
2020年第7期22-27,共6页
文摘
猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)的感染与断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS)的发生密切相关。为快速便捷地检测猪圆环病毒2型抗体,本次试验主要采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,运用金黄色葡萄球菌蛋白A蛋白(Staphylococal Protein A,SPA)作为标记蛋白制备金标垫,分别以猪圆环病毒抗原表位肽和SPA免疫兔血清纯化IgG作为检测带(T带)与质控带(C带),经多次重复试验,分别确定了胶体金的最佳标记浓度、最适pH、重悬液和样品垫处理液的最佳配方以及检测带(优势抗原表位肽)和质控带(多抗IgG)的最适包被浓度,最终装配成抗体检测试纸条,用以检测已知的PCV2阳性血清和阴性血清,验证其检测的敏感性、特异性与稳定性。结果表明,经纳米粒度仪检测可得知胶体金颗粒大小在10 nm^14 nm之间。用SPA标记胶体金的最适pH为6.0,最佳标记量为7μg/mL。检测带和质控带的蛋白包被浓度均为1 mg/mL。经验证,该试纸条不同批次间以及同一批次内重复性较好,具有较好的灵敏度、特异性和稳定性,能够准确检测猪血清样品中的抗体水平,可以进一步评价猪圆环病毒病疫苗的免疫效果。
关键词
猪圆环
病毒
2型
猪圆环
病毒抗原表位
肽
免疫层析试纸
分类号
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪流感病毒多表位融合蛋白对小鼠的免疫原性分析
3
作者
师小潇
哈卓
丁长根
潘洁
饶柏忠
刘惠莉
机构
上海农业科学院畜牧兽医研究所/上海市农业遗传育种重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第9期1284-1288,共5页
基金
上海市科技委员会重点科技攻关项目(053919116)
文摘
作者拟利用表位多肽的抗原性及黏膜佐剂免疫增强作用,设计可通过黏膜途径免疫接种的猪流感病毒通用型疫苗。体外合成H1N1、H3N2亚型猪流感病毒表位抗原基因,C末端串联大肠杆菌热敏性肠毒素LTb基因,构建pET30(a)-ep-LTb表达载体,利用SDS-PAGE、Western blot分析重组融合蛋白表达及生物学特性,小鼠免疫试验分析融合蛋白免疫原性。SDS-PAGE检测表达蛋白相对分子质量约38ku,主要以包涵体形式存在。重组蛋白可与抗His-tag抗体和CTB抗体发生特异性反应。ELISA及HI试验检测,经黏膜途径免疫的小鼠产生了针对重组表位模拟抗原蛋白及H1N1、H3N2亚型猪流感病毒的血清抗体及局部黏膜分泌型IgA抗体。利用猪流感病毒表位抗原与LTb基因串连获得的融合蛋白具有良好的免疫原性和反应原性,且在黏膜接种局部产生理想的分泌型IgA抗体,能有效阻断病原由黏膜局部感染,为研制猪流感病毒通用型疫苗奠定了基础。
关键词
猪流感
病毒
表
位
抗原
大肠杆菌热敏性肠毒素B亚基(LTb)
免疫原性
通用疫苗
Keywords
epitope of swine influenza virus
heat-labile toxin B subunit(LTb)
antigenicity
universal vaccine
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪细小病毒病研究进展
被引量:
9
4
作者
刘运超
陈玉梅
杨苏珍
魏蔷
郝慧芳
柴书军
机构
河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2024年第3期107-110,共4页
基金
“十三五”国家重点研发计划项目(2017YFD0501103)
河南省农业科学院自主创新项目(2023ZC085,2023ZC087)。
文摘
猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种无囊膜DNA病毒,主要引起母猪繁殖障碍。该病毒在全世界广泛流行,我国猪场PPV感染率高达90%以上,给养猪业带来巨大经济损失。PPV经口、鼻传播,主要侵染猪的生殖器官,引起母猪的死胎、木乃伊胎和公猪的精液质量下降。临床采用接种疫苗的方式进行防控,起到了一定的效果。论文对病毒的基因组和蛋白特征、流行病学和疫苗研究进行综述,以期为PPV的基础研究和疫苗开发提供参考。
关键词
猪细小
病毒
VLP组装
病毒抗原表位
VP2蛋白
Keywords
Porcine parvovirus
virus like particle assembly
viral antigen epitope
VP2 protein
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组犬瘟热病毒抗原表位T'TB和犬细小病毒vp2基因的真核表达
王亚君
华育平
高光慧
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
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职称材料
2
猪圆环病毒抗原表位肽免疫层析试纸条的研制
杨礼
《国外畜牧学(猪与禽)》
2020
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
猪流感病毒多表位融合蛋白对小鼠的免疫原性分析
师小潇
哈卓
丁长根
潘洁
饶柏忠
刘惠莉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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职称材料
4
猪细小病毒病研究进展
刘运超
陈玉梅
杨苏珍
魏蔷
郝慧芳
柴书军
《动物医学进展》
北大核心
2024
9
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职称材料
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