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鱼类病毒性神经坏死病毒的分离和部分特性研究
被引量：
5
1
作者
蒋方军
高隆英
+1 位作者
何俊强
江育林
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期409-413,共5页
收集福建某渔场的患病石斑鱼苗制备组织切片,同时将患病石斑鱼苗组织匀浆后接种到条纹月醴细胞系（striped snakehead,SSN-1）,对发生细胞病变（cytopathic effects,CPE）的SSN-1细胞进行逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、纯化负染,并...
收集福建某渔场的患病石斑鱼苗制备组织切片,同时将患病石斑鱼苗组织匀浆后接种到条纹月醴细胞系（striped snakehead,SSN-1）,对发生细胞病变（cytopathic effects,CPE）的SSN-1细胞进行逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、纯化负染,并制备细胞超薄切片,借助SSN-1细胞系从患病石斑鱼苗中分离病毒性神经坏死病毒（viral nervous necrosis virus,VNNV）。试验结果表明：在病鱼脑和视网膜中可见大量的空泡,接种SSN-1后2～3 d出现CPE,PCR检测可扩增出VNNV特异性带,提示这是VNNV病毒。负染及SSN-1细胞超薄切片的电镜观察显示,该病毒为直径25～30 nm的二十面体病毒粒子,在胞质中呈不完全晶体状排列,同时细胞质中有大量空泡,进一步说明分离株为VNNV。对该分离株进行细胞敏感性试验、脂溶剂敏感试验（氯仿处理）、热敏感试验（55℃30 min）、酸碱敏感试验（pH值为3和pH值为11各1 h）,试验结果表明：石斑鱼吻端细胞、鲤上皮瘤细胞、肥头鲤细胞在28℃、25℃、20℃时对该病毒都不敏感;该病毒对氯仿不敏感,对热和酸碱都比较敏感。研究结果表明,用SSN-1细胞系可以从患病鱼中分离VNNV。
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关键词
病毒性神经坏死病毒
分离
病毒
特性
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职称材料
6株鱼类病毒性神经坏死病病毒cp基因的分子特征和遗传发生分析
被引量：
2
2
作者
田飞焱
吕建强
+3 位作者
刘荭
李惠芳
刘宗晓
陈昌福
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期414-418,共5页
根据已报道的鱼类病毒性神经坏死病毒（viral nervous necrosis virus,VNNV）衣壳蛋白基因（coatprotein gene,cp基因）设计引物,对2006年从我国沿海养殖石斑鱼中分离到的6株鱼类神经坏死病毒进行RT-PCR扩增,特异性扩增出6株病毒的完整...
根据已报道的鱼类病毒性神经坏死病毒（viral nervous necrosis virus,VNNV）衣壳蛋白基因（coatprotein gene,cp基因）设计引物,对2006年从我国沿海养殖石斑鱼中分离到的6株鱼类神经坏死病毒进行RT-PCR扩增,特异性扩增出6株病毒的完整衣壳蛋白基因,分别连接到pMD18-T载体中,并进行序列测定和分析。结果发现,6个VNNV分离株的cp基因核苷酸序列的同源性在97.3%以上;推导的氨基酸序列同源性在79.6%～99.1%之间。根据cp基因核苷酸序列绘制分子进化树,发现6个VNNV分离株在进化树同一分枝上,属于RGNNV基因型,与已报道的点带石斑鱼神经坏死病病毒（ECNNV）、巨石斑鱼神经坏死病病毒（ET-NNV）及玛拉巴石斑鱼神经坏死病病毒（MGNNV）亲缘关系较近。试验结果表明,目前我国沿海养殖场发生的鱼类病毒性神经坏死病均由同一来源的病毒引起,该基因型的鱼类神经坏死病毒在我国沿海养殖的石斑鱼中广泛传播流行。
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关键词
病毒性神经坏死病毒
衣壳蛋白基因
序列分析
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职称材料
题名
鱼类病毒性神经坏死病毒的分离和部分特性研究
被引量：
5
1
作者
蒋方军
高隆英
何俊强
江育林
机构
华中农业大学水产学院
深圳出入境检验检疫局
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期409-413,共5页
基金
中华人民共和国质量监督检验检疫总局项目(2006IK013)资助
文摘
收集福建某渔场的患病石斑鱼苗制备组织切片,同时将患病石斑鱼苗组织匀浆后接种到条纹月醴细胞系（striped snakehead,SSN-1）,对发生细胞病变（cytopathic effects,CPE）的SSN-1细胞进行逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、纯化负染,并制备细胞超薄切片,借助SSN-1细胞系从患病石斑鱼苗中分离病毒性神经坏死病毒（viral nervous necrosis virus,VNNV）。试验结果表明：在病鱼脑和视网膜中可见大量的空泡,接种SSN-1后2～3 d出现CPE,PCR检测可扩增出VNNV特异性带,提示这是VNNV病毒。负染及SSN-1细胞超薄切片的电镜观察显示,该病毒为直径25～30 nm的二十面体病毒粒子,在胞质中呈不完全晶体状排列,同时细胞质中有大量空泡,进一步说明分离株为VNNV。对该分离株进行细胞敏感性试验、脂溶剂敏感试验（氯仿处理）、热敏感试验（55℃30 min）、酸碱敏感试验（pH值为3和pH值为11各1 h）,试验结果表明：石斑鱼吻端细胞、鲤上皮瘤细胞、肥头鲤细胞在28℃、25℃、20℃时对该病毒都不敏感;该病毒对氯仿不敏感,对热和酸碱都比较敏感。研究结果表明,用SSN-1细胞系可以从患病鱼中分离VNNV。
关键词
病毒性神经坏死病毒
分离
病毒
特性
Keywords
viral nervous necrosis virus
isolation
characterization of virus
分类号
Q939.47 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
6株鱼类病毒性神经坏死病病毒cp基因的分子特征和遗传发生分析
被引量：
2
2
作者
田飞焱
吕建强
刘荭
李惠芳
刘宗晓
陈昌福
机构
华中农业大学水产学院
深圳出入境检验检疫局
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期414-418,共5页
基金
中华人民共和国质量监督检验检疫总局项目(2006IK003)资助
文摘
根据已报道的鱼类病毒性神经坏死病毒（viral nervous necrosis virus,VNNV）衣壳蛋白基因（coatprotein gene,cp基因）设计引物,对2006年从我国沿海养殖石斑鱼中分离到的6株鱼类神经坏死病毒进行RT-PCR扩增,特异性扩增出6株病毒的完整衣壳蛋白基因,分别连接到pMD18-T载体中,并进行序列测定和分析。结果发现,6个VNNV分离株的cp基因核苷酸序列的同源性在97.3%以上;推导的氨基酸序列同源性在79.6%～99.1%之间。根据cp基因核苷酸序列绘制分子进化树,发现6个VNNV分离株在进化树同一分枝上,属于RGNNV基因型,与已报道的点带石斑鱼神经坏死病病毒（ECNNV）、巨石斑鱼神经坏死病病毒（ET-NNV）及玛拉巴石斑鱼神经坏死病病毒（MGNNV）亲缘关系较近。试验结果表明,目前我国沿海养殖场发生的鱼类病毒性神经坏死病均由同一来源的病毒引起,该基因型的鱼类神经坏死病毒在我国沿海养殖的石斑鱼中广泛传播流行。
关键词
病毒性神经坏死病毒
衣壳蛋白基因
序列分析
Keywords
vrial nervous necrosis virus
coat protein gene
sequences analysis
分类号
Q939.47 [生物学—微生物学]
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题名
作者
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被引量
操作
1
鱼类病毒性神经坏死病毒的分离和部分特性研究
蒋方军
高隆英
何俊强
江育林
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
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下载PDF
职称材料
2
6株鱼类病毒性神经坏死病病毒cp基因的分子特征和遗传发生分析
田飞焱
吕建强
刘荭
李惠芳
刘宗晓
陈昌福
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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