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兔病毒性出血症病毒基因组3′端非编码区的分子克隆及生物信息学分析 被引量:12
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作者 刘光清 张玉颖 +7 位作者 云涛 倪征 张淼涛 梁华丽 华炯刚 李双茂 杜青云 盛祖恬 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第3期16-20,25,共6页
采用3′RACE方法对兔病毒性出血症病毒(RHDV)JX/CHA/97株基因组3′端全序列进行了扩增、克隆和测序,并利用ONAstar和DNAman软件分析了RHDV JX/CHA/97株与各参比毒株3′NCR的序列同源性,用RNA structure软件对3′NCR的二级结构进行... 采用3′RACE方法对兔病毒性出血症病毒(RHDV)JX/CHA/97株基因组3′端全序列进行了扩增、克隆和测序,并利用ONAstar和DNAman软件分析了RHDV JX/CHA/97株与各参比毒株3′NCR的序列同源性,用RNA structure软件对3′NCR的二级结构进行了预测和分析。结果表明,所扩增的目的基因片段长1500 bp,包括部分VP60基因序列、ORF2基因、3′端非编码区(3′Non Coding Region,3′NCR)和poly(A)尾巴,其中 3′NCR位于ORF2终止密码子TAG之后,长59 bp,poly(A)至少含有27个A;3′NCR序列具有较高的同源性 (93.5%-100%);3′NCR二级结构可以形成2个潜在的茎-环结构(SL1和SL2),其中SL2具有一定的保守性,其形状和形成位置与poly(A)尾巴的长度关系不大,但是SL1的结构和形成位置与poly(A)尾巴的存在与否密切相关,提示poly(A)尾巴与3′NCR高级结构的稳定性以及基因组复制有一定关系。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 3’端非编码区 POLY(A) 二级结构 生物信息学
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肉兔病毒性出血症病毒与A型产气荚膜梭菌混合感染的诊断 被引量:3
2
作者 孙艳平 向钟平 +1 位作者 包秀芬 袁文兴 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期215-216,共2页
云南省曲靖市沾益县某养殖户的300多只肉兔从2009年6月初开始发病,为及时控制疫情,尽量挽回饲养户的经济损失,经流行病学调查,临床症状观察,病理剖解,细菌分离、鉴定,动物接种和家兔病毒性出血症病毒HA试验,结果分离到A型产气荚膜梭菌,... 云南省曲靖市沾益县某养殖户的300多只肉兔从2009年6月初开始发病,为及时控制疫情,尽量挽回饲养户的经济损失,经流行病学调查,临床症状观察,病理剖解,细菌分离、鉴定,动物接种和家兔病毒性出血症病毒HA试验,结果分离到A型产气荚膜梭菌,兔病毒性出血症病毒HA试验阳性,诊断为兔病毒性出血症病毒与A型产气荚膜梭菌的混合感染。 展开更多
关键词 肉兔 病毒性出血症病毒 A型产气荚膜梭菌 诊断
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兔病毒性出血症病毒中国株(JX/CHA/97)全基因组分子克隆及序列分析 被引量:1
3
作者 倪征 方维焕 +3 位作者 张玉颖 云涛 陈锦清 刘光清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期668-671,675,共5页
本研究首次完成了兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)中国分离株JX/CHA/97全基因组序列的测定与分析。研究结果表明,JX/CHA/97株的全基因组由7437个核苷酸组成,其基因组构成为:5′端有一个长度仅为9nt的非编码... 本研究首次完成了兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)中国分离株JX/CHA/97全基因组序列的测定与分析。研究结果表明,JX/CHA/97株的全基因组由7437个核苷酸组成,其基因组构成为:5′端有一个长度仅为9nt的非编码区,随后有2个阅读框架(ORFs),分别编码一个聚合蛋白和一个结构蛋白。在基因组的3′端也有一个非编码区,长度为59nt。另外,采用RACE方法获得了RHDV的poly (A)尾序,证明该结构至少含有27个A。根据RHDV衣壳蛋白的基因序列,将JX/CHA/97株与来自世界各地的22株RHDV分离株的基因组序列进行了比较与分析,并绘制了系统发生树。结果表明,RHDV各分离株之间存在较高的序列同源性,可以将它们至少分为6个拓朴群,提示RHDV有朝不同方向发生进化的趋势。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 JX/CHA/97株 克隆 序列分析
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兔病毒性出血症病毒保藏及其对疫苗效果的研究 被引量:1
4
作者 陈绳亮 李天宪 +1 位作者 张忠 杨宝玉 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期86-88,共3页
将不同地区收集到的 8株兔病毒性出血症典型病料 ,放在 -3 0℃低温冰箱中分别保藏 5年和 1 0年 ,保藏期满后取样检测血凝效价 ;并用保藏 5年的 RHDV病料和 2 0 0 1年活化增殖的新鲜病料分别制成病毒疫苗。试验结果表明 RHDV以病料形式 ... 将不同地区收集到的 8株兔病毒性出血症典型病料 ,放在 -3 0℃低温冰箱中分别保藏 5年和 1 0年 ,保藏期满后取样检测血凝效价 ;并用保藏 5年的 RHDV病料和 2 0 0 1年活化增殖的新鲜病料分别制成病毒疫苗。试验结果表明 RHDV以病料形式 (主要是肝、肺等脏器 )保藏 ,在 -3 0℃低温冰箱中 ,经 5年后 ,病毒血凝效价稳定不变 ,保藏 1 0年后总下降率为2 5% ,但病毒效价仍大于 2 560 ,可用于疫苗生产 ;说明该病毒在上述条件下保藏 5~ 1 0年病毒是比较稳定的。不同保藏年限的病料批量生产疫苗 ,安全性和免疫保护率均达到 1 0 0 %。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 保藏 疫苗
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兔病毒性出血症病毒高免血清的制备与应用效果
5
作者 张冰 张丹 李军 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期89-90,共2页
以兔病毒性出血症病毒组织灭活疫苗免疫家兔 ,经五次免疫之后 ,抗体效价可达1 2 log2以上 ,采集兔血清 ,以此治疗攻毒兔 ,结果大部分兔都存活 ;临床应用效果表明 :以此血清治疗自然感染兔病毒性出血症病毒的发病兔 ,治愈率达 80 %以上。
关键词 病毒性出血症病毒 高免血清 制备 应用效果
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兔病毒性出血症病毒毒种的保存期试验
6
作者 高金源 张存帅 吴涛 《中国兽药杂志》 2002年第1期15-16,共2页
本试验对 3个不同代次的兔病毒性出血症病毒进行了最小致死量测定 ,并对经兔病毒性出血症病毒F1代毒种繁殖冻干的 1批兔病毒性出血症病毒F3 代毒种 (1998.4 .6冻干 )进行了血凝性、特异性、最小致死量、免疫原性鉴定。结果表明 ,三个不... 本试验对 3个不同代次的兔病毒性出血症病毒进行了最小致死量测定 ,并对经兔病毒性出血症病毒F1代毒种繁殖冻干的 1批兔病毒性出血症病毒F3 代毒种 (1998.4 .6冻干 )进行了血凝性、特异性、最小致死量、免疫原性鉴定。结果表明 ,三个不同代次的兔病毒性出血症病毒在 -70℃条件下分别保存 15年、10年、15年 ,其最小致死量均可达到 10 - 4稀释 ,家兔 3/ 4死亡 ,符合规程要求 ; 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 保存期 最小致死剂量 毒种保存
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SYBR Green II荧光定量PCR结合熔解曲线鉴别不同亚型兔病毒性出血症病毒方法的建立 被引量:3
7
作者 谭永贵 刘腾 +7 位作者 朱杰 郭慧敏 吴巧梅 李琦 缪秋红 陈宗艳 李传峰 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第1期7-11,共5页
本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法。根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣... 本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法。根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣壳蛋白VP60序列保守区设计了1对特异性引物,利用SYBR Green II荧光染料,在实时荧光定量PCR方法的基础上结合熔解曲线进行分析,经典RHDV和RHDV2熔解温度(Tm)分别为(86.3±0.1)℃和(85.1±0.1)℃,扩增产物的熔解曲线分析均只出现单特异峰。结果表明,本研究建立的方法能够快速地鉴别经典RHDV和RHDV2。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 荧光定量PCR 熔解曲线 鉴别
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兔病毒性出血症病毒重组蛋白VP60间接ELISA抗体检测方法的建立与应用 被引量:4
8
作者 李云琴 赵美盈 刁富花 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期69-72,共4页
为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒抗体检测方法,本研究以原核表达的重组VP60蛋白作为诊断抗原,建立了检测兔病毒性出血症病毒抗体的VP60-ELISA诊断方法。该方法检测3种常见兔病(兔轮状病毒、仙台病毒和魏氏梭菌)的阳性血清均为阴性;... 为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒抗体检测方法,本研究以原核表达的重组VP60蛋白作为诊断抗原,建立了检测兔病毒性出血症病毒抗体的VP60-ELISA诊断方法。该方法检测3种常见兔病(兔轮状病毒、仙台病毒和魏氏梭菌)的阳性血清均为阴性;检测灵敏度为1∶12800;批内、批间重复性试验的变异系数分别小于4.9%和6.9%。本研究建立的RHDV VP60-ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,为RHDV的抗体检测及流行病学调查等快速诊断提供了一种技术手段。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 VP60蛋白 间接ELISA
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兔病毒性出血症病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:3
9
作者 王景儒 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期86-89,共4页
为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据Gen-Bank上登录的RHDVVP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病毒... 为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据Gen-Bank上登录的RHDVVP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病毒、仙台病毒、健康兔肝脏组织的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10ng,第2次扩增的敏感性是0.1ng,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的RHDV,将为兔病毒性出血症的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、简单、高效、特异、灵敏的检测方法。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 巢式RT-PCR 检测
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基于便携式荧光定量PCR仪的兔病毒性出血症病毒现场检测方法的建立及应用 被引量:2
10
作者 李天芝 于新友 《饲料博览》 2019年第12期1-4,共4页
为建立兔病毒性出血症病毒免疫荧光PCR检测方法,参照GenBank中兔病毒性出血症病毒基因组序列,设计特异引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了能检测兔病毒性出血症病毒的荧光PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表... 为建立兔病毒性出血症病毒免疫荧光PCR检测方法,参照GenBank中兔病毒性出血症病毒基因组序列,设计特异引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了能检测兔病毒性出血症病毒的荧光PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测兔病毒性出血症病毒灵敏度可达1.38LD50·100μL-1,该法对兔巴氏杆菌、兔大肠杆菌、兔沙门氏菌、兔水疱性口炎病毒(RVSTV)和兔轮状病毒(RRV)的检测结果均为阴性。试验建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法可对兔病毒性出血症进行现场快速鉴别诊断,为兔病毒性出血症的诊断及防控工作奠定了基础。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 TagMan 荧光PCR
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兔病毒性出血症病毒YT株的分离及生物学特性鉴定 被引量:1
11
作者 王晓丽 程志伟 +2 位作者 王永明 朱万光 李世成 《上海畜牧兽医通讯》 2011年第4期48-49,共2页
兔病毒性出血症又称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起家兔的一种急性、高度接触性传染病,以呼吸系统出血、肝脏坏死、实质脏器水肿、瘀血、出血和高死亡率为特征。本病于1984年春天首次发现于我国江苏省,迅速蔓延至全国,之后世界各地均... 兔病毒性出血症又称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起家兔的一种急性、高度接触性传染病,以呼吸系统出血、肝脏坏死、实质脏器水肿、瘀血、出血和高死亡率为特征。本病于1984年春天首次发现于我国江苏省,迅速蔓延至全国,之后世界各地均有发生。本病常呈暴发性流行,发病率及死亡率极高,给世界养兔业带来了巨大危害,是目前规模化兔场的主要传染病之一。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 特性鉴定 生物学 接触性传染 分离 规模化兔场 呼吸系统 死亡率
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兔病毒性出血症病毒分离鉴定
12
作者 金明兰 《养殖技术顾问》 2010年第3期173-173,共1页
兔病毒性出血症是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的急性、败血性、高度接触性传染病。感染病兔多在48-72小时内死亡,给养兔业造成的威胁日益突出。因此,及时准确地对RHDV进行诊断已经成为防治该病的关键。
关键词 病毒性出血症病毒 病毒分离鉴定 接触性传染 RHDV 败血性 养兔业 死亡
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一例兔病毒性出血症病毒感染的诊治
13
作者 郭明臻 苏启涛 《中国动物保健》 2019年第12期17-18,共2页
兔病毒性出血症是兔易感的病毒性传染病,呈暴发性流行,发病率和死亡率都很高,对养兔业危害巨大,家兔感染后全身组织器官出血,肝坏死,实质器官水肿、淤血、出血,是一种严重的急性、烈性、致死性传染病。本文通过对临床一例疑似兔病毒性... 兔病毒性出血症是兔易感的病毒性传染病,呈暴发性流行,发病率和死亡率都很高,对养兔业危害巨大,家兔感染后全身组织器官出血,肝坏死,实质器官水肿、淤血、出血,是一种严重的急性、烈性、致死性传染病。本文通过对临床一例疑似兔病毒性出血症病毒感染病例的诊治,为相关疾病的诊断提供参考。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 感染 预防 诊治
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兔病毒性出血症病毒的分离和诊治
14
作者 臧协峰 金明兰 《养殖技术顾问》 2008年第12期135-135,共1页
兔病毒性出血症是由兔病毒性出血症病毒引起的高度接触传染性、急性、致死性的传染病,以传染性极强、呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为特征,其潜伏期短、发病率和死亡率高,是兔的一种毁灭性传染病。本病的传... 兔病毒性出血症是由兔病毒性出血症病毒引起的高度接触传染性、急性、致死性的传染病,以传染性极强、呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为特征,其潜伏期短、发病率和死亡率高,是兔的一种毁灭性传染病。本病的传染源是病兔和带毒兔,可经消化道、呼吸道、伤口和黏膜直接接触传播,或通过病兔、带毒兔的排泄物、分泌物、死兔的内脏器官、血液、兔毛等传播。近几年,兔出血症病毒与细菌混合感染在很多地方不断暴发,大大增加了兔群的死亡率。本文将从以下几个方面对兔病毒性出血症阐述如下。 展开更多
关键词 毒性出血 病毒性出血症病毒 接触传染性 诊治 分离 出血病毒 内脏器官 呼吸系统
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兔病毒性出血症病毒的分离和鉴定
15
作者 陈雅冰 《福建畜牧兽医》 2023年第4期15-17,共3页
本试验对山东某兔场疑似感染兔瘟致死的病料进行中和试验、血凝和血凝抑制试验、PCR鉴定及测序比对。试验结果表明,4份分离的病毒上清液都能与1%人O型红细胞发生凝集,凝集效价均为1:1024;与兔病毒性出血症阳性血清中和反应后,对人O型红... 本试验对山东某兔场疑似感染兔瘟致死的病料进行中和试验、血凝和血凝抑制试验、PCR鉴定及测序比对。试验结果表明,4份分离的病毒上清液都能与1%人O型红细胞发生凝集,凝集效价均为1:1024;与兔病毒性出血症阳性血清中和反应后,对人O型红细胞没有凝集反应;PCR扩增结果显示4份送检样品均在286 bp位置出现了目的条带,经测序比对,该序列与中国的03/China/2016毒株VP60基因(登入号为MF669712.1)序列同源性最高,相似度为99.65%。试验结果充分说明该病毒为兔病毒性出血症病毒,该兔场流行疫病为兔瘟。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 分离鉴定 PCR扩增 测序
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兔病毒性出血症病毒分离和鉴定
16
作者 张颖 王金良 《中国畜禽种业》 2016年第10期130-131,共2页
从疑似感染兔病毒性出血症病毒的病兔体内分离到1株病毒,病兔表现体温升高、呼吸困难、全身实质脏器出血等典型病变。取病兔肝脏做血凝和血凝抑制试验,分离毒株可以凝集1.0%人"O"型红细胞,可以被兔病毒性出血症病毒阳性血清中... 从疑似感染兔病毒性出血症病毒的病兔体内分离到1株病毒,病兔表现体温升高、呼吸困难、全身实质脏器出血等典型病变。取病兔肝脏做血凝和血凝抑制试验,分离毒株可以凝集1.0%人"O"型红细胞,可以被兔病毒性出血症病毒阳性血清中和,对家兔的LD50为10-6.75/ml,是一株对家兔具有高致病力的强毒株,对分离毒株进行RT-PCR检测为阳性,说明该病兔感染了兔病毒性出血症病毒,本病毒的成功分离和鉴定为发病兔场找到了致病原,为兔瘟疾病的诊断和防制提供了参考。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 分离 鉴定
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兔病毒性出血症的诊治 被引量:2
17
作者 李峰 杨慧 +1 位作者 苗立中 沈志强 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第11期43-44,共2页
兔病毒性出血症(Rabbit hemorrhagic disease,RHD)又称兔瘟.是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性、烈性传染病,易感兔发病率、死亡率高达40%-90%。该病自1984年首次在我国江苏省发现以来,国内外均有相关的报道.该病的发生和... 兔病毒性出血症(Rabbit hemorrhagic disease,RHD)又称兔瘟.是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性、烈性传染病,易感兔发病率、死亡率高达40%-90%。该病自1984年首次在我国江苏省发现以来,国内外均有相关的报道.该病的发生和蔓延给世界养兔业造成了巨大的损失。 展开更多
关键词 病毒性出血症病毒 诊治 烈性传染 死亡率 江苏省 养兔业 国内外
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兔病毒性出血症研究概况及前景 被引量:3
18
作者 朱海霞 张强 《中国动物检疫》 CAS 2009年第1期59-62,共4页
兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,病死率高达100%。本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、体外培养、分子生物学、病毒的检测和疫苗等方面做了系统深入... 兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,病死率高达100%。本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、体外培养、分子生物学、病毒的检测和疫苗等方面做了系统深入综述,并提出了存在的问题及展望。 展开更多
关键词 毒性出血 病毒性出血症病毒 研究概况
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仔兔病毒性出血症肌肉毒株的培育和疫苗研制 被引量:1
19
作者 杨秀女 孟艳 +1 位作者 武秋双 郑丽丽 《河北畜牧兽医》 2005年第10期9-9,26,共2页
关键词 毒性出血 定向培育 疫苗研制 肌肉 病毒性出血症病毒 组织灭活苗 毒株 急性传染 经济损失
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兔病毒性出血症研究概况 被引量:2
20
作者 朵红 《青海畜牧兽医杂志》 2005年第3期41-42,共2页
本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、兔病毒性出血症病毒的分子生物学、兔病毒性出血症病毒的诊断、兔病毒性出血症病毒的疫苗等方面进行了简要综述。
关键词 毒性出血 病毒性出血症病毒 研究概况
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